İnsan EGFR Fare Monoklonal Primer Antikor Klon

Anti – İnsan EGFR
Fare Monoklonal Primer Antikor
Klon: UMAB95
IVD
REF CE00021
KATALOG NO
C0021MA01-MA 0.1 mL
C0021MA05-MA 0.5 mL
TÜRKÇE
Kullanım Amacı
Anti-insan EGFR Fare Monoklonal Primer Antikor donmuş veya formalin fikse insan dokularında ve hücrelerinde EGFR proteini
ekspresyonunun tespiti için kullanılır. Pozitif boyanmanın veya boyanma olmamasının klinik yorumlaması doğru kontrollerin
kullanıldığı morfolojik ve histolojik incelemeler ile desteklenmelidir. Değerlendirmeler hastanın klinik hikayesi ve yetkin bir
patoloğun yaptığı diğer tanı testleri ile birlikte yapılmalıdır. Bu antikor vücut dışı tanı (IVD) amacıyla kullanılır.
Genel Bilgi
EGFR, protein kinaz üst ailesinin bir üyesi olan transmembran glikoproteindir. Bu protein epidermal büyüme faktörü ailesi için
bir reseptördür. EGFR, epidermal büyüme faktörünü bağlayan bir hücre yüzeyi proteinidir. Proteinin bir liganda bağlanması
reseptörün dimerleşmesini ve tirozin oto-fosforillenmesini uyarır ve hücre proliferasyonuna yol açar. Bu gendeki mutasyonlar
akciğer kanseri ile ilişkilendirilir. Bu gen için farklı protein izoformlarını kodlayan çok sayıda alternatif eklenme transkriptleri
bulunmuştur.
Diğer isimler: ERBB1; HER1; Epidermal Büyüme Faktörü Reseptörü
Ürün Bilgisi
Anti-insan EGFR Fare Monoklonal Primer Antikor (Klon: UMAB95) 20mM Sodyum fosfat, 150mM Sodyum klorür, %0.2 BSA,
%0.09 Sodyum azid ile birlikte pH 7.4 sıvı formda sunulur. Antikorun izotipi IgG1’dir. Toplam protein konsantrasyonu
0.4mg/ml’dir (+/- 0.05 mg/ml).
Bu primer antikor immünohistokimyada formalin-fikse parafine-gömülü insan dokuları için, kullanılan görüntüleme sistemine
bağlı olarak 1:100 – 1:200 dilüsyonda kullanılabilir. Bu yalnızca başlangıç için öneridir ve en uygun dilüsyon oranı laboratuvar
tarafından belirlenmelidir.
İmmünojen
HEK293T hücresinde üretilmiş insan tam boy EGFR rekombinant proteini (NP_958440)
Spesifiklik
Anti-insan EGFR Fare Monoklonal Primer Antikorun spesifikliği normal insan plasentasında, akciğer kanserinde ve dalakta
belirlenmiştir. İmmünohistokimya (IHC) test yöntemlerinde Anti-EGFR antikoru, formalin-fikse insan dalağında boyanma
göstermemiş, normal plasentada ve akciğer kanserinde pozitif boyanma göstermiştir.
Gerekli Diğer Malzemeler
Antikor dilüenti, Antijen açma (HIER) solüsyonu, Antikor görüntüleme kitleri, Kromojen, Boyama reaktifleri, negatif ve pozitif
kontrol dokusu lamları.
Önlemler
1. Yalnızca eğitimli personel kullanabilir.
2. Bu ürünün içinde saf halindeyken çok toksik olan Sodyum Azid (NaN 3) vardır. NaN3’in bu üründe bulunan
konsantrasyonu tehlikeli olarak sınıflandırılmadığı halde kurşun veya bakır boru tesisatı ile reaksiyona girerek son
derece patlayıcı olan metal azid birikimleri oluşturabilir. Boru tesisatında metal azidlerin birikmesini önlemek için atık
ürünü döktükten sonra ardından bol su dökün.
3. Gözler ve cilt ile temasından sakınmak için uygun kişisel korunma giysileri kullanın.
4. Kullanılmayan reaktifler yerel ve ulusal düzenlemelere uygun olarak atılmalıdır.
Saklama
2-8°C’de saklayın. Ürünü etiketinin üzerinde belirtilen son kullanma tarihinden sonra kullanmayın. Reaktifler belirtilenden
farklı koşullarda saklanırsa bu koşulların uygun olup olmadığını kullanıcısı doğrulamalıdır. Saklanan ürünün stabilitesinin
kaybolduğunu belli eden bir gösterge yoktur, bu yüzden hasta örnekleri çalışılırken aynı zamanda pozitif ve negatif kontroller
de çalışılmalıdır.
Örneklerin Hazırlaması
Parafin kesitler
CE00021
Versiyon 0
08/2015
Sayfa 1/2
Anti-insan EGFR Fare Monoklonal Primer Antikor formalin-fikse, parafine-gömülü doku kesitlerinde 1:100 – 1:200 dilüsyonda
kullanılabilir. Anti-insan EGFR Fare Monoklonal Primer Antikorun boyama yapması için Isı Yoluyla Epitop Açma (HIER)
solüsyonu ile basınç altında 95-100°C’de 20 dakika ön işlem yapılması gerekir. Bu işlemde Sitrat tamponlu pH 6.0 (GBI Labs
B05C-100) solüsyonunun kullanılmasını öneririz. Bu solüsyon ile işlem yapıldığında iki adımlı görüntüleme sistemleriyle
(Polink-2 Broad HRP) ile birlikte kullanılan 1:200 dilüsyondaki antikor insan akciğer kanserinde ve plasentasında optimum
boyanma göstermiş, insan dalak dokusunda dokusunda negatif boyanma göstermiştir.
Boyama Prosedürü
Manuel Boyama Prosedürü
1. Lamları deparafinize edin.
2. Lamları yaklaşık 10 dakika süreyle peroksidaz bloklama solüsyonunda tutun ve ardından her biri 2 dakika olmak
üzere PBS-T ile 3 kez yıkayın.
3. Bu antikor için basınç altında Isı Yoluyla Epitop Açma işlemi gereklidir.
4. Serum bloklama solüsyonu uygulayın (isteğe bağlı).
5. Primer antikoru uygulayın ve oda sıcaklığında 30-60 dakika inkübe edin. İnkübasyondan sonra PBS-T ile her biri 2
dakika olmak üzere 3 kez yıkama yapın.
6. Sekonder antikoru uygulayın ve görüntüleme sisteminin kullanma talimatında belirtilen şekilde inkübe edin. PBS-T ile
her biri 2 dakika olmak üzere 3 kez yıkama yapın.
7. Enzim konjugatı uygulayın ve görüntüleme sisteminin kullanma talimatında belirtilen şekilde inkübe edin. PBS-T ile
her biri 2 dakika olmak üzere 3 kez yıkama yapın.
8. Kromojeni uygulayın ve 5-10 dakika inkübe edin, ardından distile su ile yıkayın.
Boyanmanın Yorumlanması
Anti-insan EGFR Fare Monoklonal Primer Antikorun hücredeki boyaması sitoplazmada ve hücre zarında olur.
Performans Özellikleri
Normal dokularda/hücrelerde beklenen boyanma
Normal insan plasentasının ve insan akciğer kanserinin bu antikor için pozitif olduğu gösterilmiştir. Normal insan dalağının
negatif olduğu gösterilmiştir.
İletişim Bilgisi
SDIX LLC
111 Pencader Drive Newark, Delaware 19702 USA
+1 302 456 6789 +1 800 544 8881(USA) www.SDIX.com
Türkiye Temsilcisi
Novogen Diagnostik Laboratuar ve Sağlık Hizmetleri San. ve Tic. Ltd. Şti.
Mimar Sinan Mah. Üsküdar Cad. No:1 Yedpa Ticaret Merkezi, E Cad. No: 3 Ataşehir / İstanbul
Tel: 0216 457 93 33 Faks: 0216 457 93 44 [email protected]
CE00021
Versiyon 0
08/2015
Sayfa 2/2