İnsan MGMT Fare Monoklonal Primer Antikor Klon

Anti – İnsan MGMT
Fare Monoklonal Primer Antikor
Klon: UMAB56
IVD
REF CE00017
KATALOG NO
C0017MA10-MA 1.0 mL
TÜRKÇE
Kullanım Amacı
Anti-insan MGMT (Klon: UMAB56) Fare Monoklonal Primer Antikor donmuş veya formalin fikse insan dokularında ve
hücrelerinde O6-metilguanin DNA metiltransferaz ekspresyonunun tespiti için kullanılır. Pozitif boyanmanın veya boyanma
olmamasının klinik yorumlaması doğru kontrollerin kullanıldığı morfolojik ve histolojik incelemeler ile desteklenmelidir.
Değerlendirmeler hastanın klinik hikayesi ve yetkin bir patoloğun yaptığı diğer tanı testleri ile birlikte yapılmalıdır. Bu antikor
vücut dışı tanı (IVD) amacıyla kullanılır.
Genel Bilgi
MGMT geni tarafından eksprese edilen O6-metilguanin DNA metiltransferaz, O6-metilguanin’den metili koparıp guanozine
dönüştürerek DNA onarımı yapar. O6-metilguanin, sitidin yerine timin baz çiftleri yaparak DNA replikasyonu ve
transkripsiyonu sırasında hatalara sebep olur. MGMT metillemesi protein ekspresyonunun kaybı ile ilişklidir.
Diğer isimler: O6-alkilguanin DNA alkitransferaz, AGT, AGAT
Ürün Bilgisi
Anti-insan MGMT Fare Monoklonal Primer Antikor (Klon: UMAB56) 20mM Sodyum fosfat, 150mM Sodyum klorür, %0.2 BSA,
%0.09 Sodyum azid ile birlikte pH 7.4 sıvı formda sunulur. Antikorun izotipi IgG1’dir. Protein konsantrasyonu yaklaşık
0.6mg/ml’dir (+/- 0.05 mg/ml).
Bu primer antikor immünohistokimyada formalin-fikse parafine-gömülü insan dokuları için, kullanılan görüntüleme sistemine
bağlı olarak 1:100 – 1:200 dilüsyonda kullanılabilir. Bu yalnızca başlangıç için öneridir ve en uygun dilüsyon oranı laboratuvar
tarafından belirlenmelidir.
İmmünojen
E. coli’de üretilmiş tam boy insan MGMT rekombinant proteini (NP_002403)
Spesifiklik
Anti-insan MGMT Fare Monoklonal Primer Antikorun spesifikliği insan meme kanserinde, normal insan beyin ve kalp
dokularında belirlenmiştir. İmmünohistokimya (IHC) test yöntemlerinde Anti-MGMT antikoru, normal insan beyininde ve
kalbinde boyanma göstermemiş, insan meme kanseri dokularında pozitif boyanma göstermiştir.
Gerekli Diğer Malzemeler
Antikor dilüenti, Antijen açma (HIER) solüsyonu, Antikor görüntüleme kitleri, Kromojen, Boyama reaktifleri, negatif ve pozitif
kontrol dokusu lamları.
Önlemler
1. Yalnızca eğitimli personel kullanabilir.
2. Bu ürünün içinde saf halindeyken çok toksik olan Sodyum Azid (NaN 3) vardır. NaN3’in bu üründe bulunan
konsantrasyonu tehlikeli olarak sınıflandırılmadığı halde kurşun veya bakır boru tesisatı ile reaksiyona girerek son
derece patlayıcı olan metal azid birikimleri oluşturabilir. Boru tesisatında metal azidlerin birikmesini önlemek için atık
ürünü döktükten sonra ardından bol su dökün.
3. Gözler ve cilt ile temasından sakınmak için uygun kişisel korunma giysileri kullanın.
4. Kullanılmayan reaktifler yerel ve ulusal düzenlemelere uygun olarak atılmalıdır.
Saklama
2-8°C’de saklayın. Ürünü etiketinin üzerinde belirtilen son kullanma tarihinden sonra kullanmayın. Reaktifler belirtilenden
farklı koşullarda saklanırsa bu koşulların uygun olup olmadığını kullanıcısı doğrulamalıdır. Saklanan ürünün stabilitesinin
kaybolduğunu belli eden bir gösterge yoktur, bu yüzden hasta örnekleri çalışılırken aynı zamanda pozitif ve negatif kontroller
de çalışılmalıdır.
Örneklerin Hazırlaması
Parafin kesitler
Anti-insan MGMT Fare Monoklonal Primer Antikor formalin-fikse, parafine-gömülü doku kesitlerinde 1:100 – 1:200 dilüsyonda
kullanılabilir. Isı Yoluyla Epitop Açma (HIER) solüsyonu ile 20 dakika ön işlem yapılması gerekir. Bu işlemde Accel HIER Buffer
CE00017
Versiyon 2
07/2015
Sayfa 1/2
solüsyonunun (GBI Labs (B22C-100)) kullanılmasını öneririz. Dilüsyon oranları yaklaşık tahminlerdir ve boyanma sonuçları
kullanılan reaktiflere ve görüntüleme protokollerine göre farklılık gösterebilir. Antikorun performansının ve uygun protokolün
doğrulanması kullanıcının sorumluluğundadır.
Boyama Prosedürü
Manuel Boyama Prosedürü
1. Lamları deparafinize edin.
2. Lamları yaklaşık 10 dakika süreyle %3 peroksidaz bloklama solüsyonunda tutun ve ardından her biri 2 dakika olmak
üzere distile su ile 2 kez yıkayın.
3. Bu antikor için Isı Yoluyla Epitop Açma işlemi gereklidir. Accel pH 8.5 HIER solüsyonu [GBI Labs B22C-100] ile 95100°C sıcaklıkta 20 dakika veya basınçlı ortamda 3 dakika ön işlem yapılmasını öneririz.
4. Boyamadan önce PBS ile her biri 2 dakikadan 3 kez yıkayın. Serum bloklama solüsyonu uygulayın (isteğe bağlı).
5. Primer antikoru uygulayın ve oda sıcaklığında 30-60 dakika inkübe edin. İnkübasyondan sonra PBS-T ile her biri 2
dakika olmak üzere 3 kez yıkama yapın.
6. Sekonder antikoru uygulayın ve görüntüleme sisteminin kullanma talimatında belirtilen şekilde inkübe edin. PBS-T ile
her biri 2 dakika olmak üzere 3 kez yıkama yapın.
7. Enzim konjugatı uygulayın ve görüntüleme sisteminin kullanma talimatında belirtilen şekilde inkübe edin. PBS-T ile
her biri 2 dakika olmak üzere 3 kez yıkama yapın.
8. Kromojeni uygulayın ve 5-10 dakika inkübe edin, ardından distile su ile yıkayın.
Boyanmanın Yorumlanması
Normal insan beyin ve kalp dokularının bu antikor için negatif olduğu gösterilmiştir.
Anti-insan MGMT Fare Monoklonal Primer Antikorun (Klon: UMAB56) insan meme kanserinde seçici olarak hücre çekirdeğinde
boyanma oluşturur.
İletişim Bilgisi
SDIX LLC
111 Pencader Drive Newark, Delaware 19702 USA
+1 302 456 6789 +1 800 544 8881(USA) www.SDIX.com
Türkiye Temsilcisi
Novogen Diagnostik Laboratuar ve Sağlık Hizmetleri San. ve Tic. Ltd. Şti.
Mimar Sinan Mah. Üsküdar Cad. No:1 Yedpa Ticaret Merkezi, E Cad. No: 3 Ataşehir / İstanbul
Tel: 0216 457 93 33 Faks: 0216 457 93 44 [email protected]
CE00017
Versiyon 2
07/2015
Sayfa 2/2