İnsan p53 Fare Monoklonal Primer Antikor Klon: DO7 IVD

Anti – İnsan p53
Fare Monoklonal Primer Antikor
Klon: DO7
IVD
REF CE00003
KATALOG NO
C0003MA01-MA 0.1 mL
C0003MA05-MA 0.5 mL
C0003MA10-MA 1.0 mL
TÜRKÇE
Kullanım Amacı
Anti-insan p53 (Klon:DO7) Fare Monoklonal Primer Antikor donmuş veya formalin fikse insan dokularında ve hücrelerinde p53
proteini ekspresyonunun tespiti için kullanılır. Pozitif boyanmanın veya boyanma olmamasının klinik yorumlaması doğru
kontrollerin kullanıldığı morfolojik ve histolojik incelemeler ile desteklenmelidir. Değerlendirmeler hastanın klinik hikayesi ve
yetkin bir patoloğun yaptığı diğer tanı testleri ile birlikte yapılmalıdır. Bu antikor vücut dışı tanı (IVD) amacıyla kullanılır.
Genel Bilgi
p53/TP53 geni transkripsiyon aktivasyonu, DNA bağlayıcı ve oligomerleşme bölgelerini içeren bir tümör baskılayıcı proteini
kodlar. TP53 geni 17p13.1 kromozom bölgesinde yer alır. Kodlanan protein çeşitli hücresel streslere yanıt vererek hedef
genlerin ekspresyonlarını, dolayısıyla da hücre döngüsü durmasını, apoptozisi, senesensi, DNA onarımını veya metabolizma
değişikliklerini düzenler. Bu gende meydana gelen mutasyonlar Li-Fraumeni sendromu gibi kalıtsal kanserler dahil olmak
üzere çeşitli insan kanserleriyle ilişkilidir. Bu genin değişik şekilde eklenmesi ve alternatif promoterlerin kullanılması çok
sayıda transkript varyantlarına ve izoformlara yol açar. Farklı translasyon başlangıç kodonlarının kullanımı sonucunda başka
izoformların meydana geldiği gösterilmiştir (PMIDs: 12032546, 20937277). [Kaynak RefSeq, Şubat 2013].
Diğer isimler: Li-Fraumeni Sendromu p53 Tümör Proteini; P53, TRP Antijen NY-CO-13; Fosfoprotein p53; Tümör baskılayıcı
p53
Ürün Bilgisi
Anti-insan p53 (Klon:DO7) Fare Monoklonal Primer Antikor 20mM Sodyum fosfat, 150mM Sodyum klorür, %0.2 BSA, %0.09
Sodyum azid ile birlikte pH 7.4 sıvı formda sunulur. Antikorun izotipi IgG2b’dir. Toplam protein konsantrasyonu 0.2mg/ml’dir
(+/- 0.05 mg/ml).
Bu primer antikor immünohistokimyada formalin-fikse parafine-gömülü insan dokuları için, kullanılan görüntüleme sistemine
bağlı olarak 1:100 – 1:200 dilüsyonda kullanılabilir. Bu yalnızca başlangıç için öneridir ve en uygun dilüsyon oranı laboratuvar
tarafından belirlenmelidir.
İmmünojen
E. coli’de eksprese edilmiş rekombinant insan wild tip p53 proteini
Spesifiklik
Anti-insan p53 (Klon:DO7) Fare Monoklonal Primer Antikorun spesifikliği insan kolon tümöründe ve negatif insan akciğer
dokusunda belirlenmiştir. İmmünohistokimya (IHC) test yöntemlerinde Anti-p53 antikoru, formalin fikse akciğer dokusunda
boyanma göstermemiş, formalin fikse insan kolon dokusunda pozitif boyanma göstermiştir.
Gerekli Diğer Malzemeler
Antikor dilüenti, Antijen açma (HIER) solüsyonu, Antikor görüntüleme kitleri, Kromojen, Boyama reaktifleri, negatif ve pozitif
kontrol dokusu lamları.
Önlemler
1. Yalnızca eğitimli personel kullanabilir.
2. Bu ürünün içinde saf halindeyken çok toksik olan Sodyum Azid (NaN 3) vardır. NaN3’in bu üründe bulunan
konsantrasyonu tehlikeli olarak sınıflandırılmadığı halde kurşun veya bakır boru tesisatı ile reaksiyona girerek son
derece patlayıcı olan metal azid birikimleri oluşturabilir. Boru tesisatında metal azidlerin birikmesini önlemek için atık
ürünü döktükten sonra ardından bol su dökün.
3. Gözler ve cilt ile temasından sakınmak için uygun kişisel korunma giysileri kullanın.
4. Kullanılmayan reaktifler yerel ve ulusal düzenlemelere uygun olarak atılmalıdır.
Saklama
2-8°C’de saklayın. Ürünü etiketinin üzerinde belirtilen son kullanma tarihinden sonra kullanmayın. Reaktifler belirtilenden
farklı koşullarda saklanırsa bu koşulların uygun olup olmadığını kullanıcısı doğrulamalıdır. Saklanan ürünün stabilitesinin
CE00003
Versiyon 5
07/2015
Sayfa 1/2
kaybolduğunu belli eden bir gösterge yoktur, bu yüzden hasta örnekleri çalışılırken aynı zamanda pozitif ve negatif kontroller
de çalışılmalıdır.
Örneklerin Hazırlaması
Parafin kesitler
Anti-insan p53 Fare Monoklonal Primer Antikor formalin-fikse, parafine-gömülü doku kesitlerinde 1:100 – 1:200 dilüsyonda
kullanılabilir. Anti-insan p53 Fare Monoklonal Primer Antikorun boyama yapması için Isı Yoluyla Epitop Açma (HIER)
solüsyonu ile 20 dakika ön işlem yapılması gerekir. Bu işlemde HIER TEE Buffer pH 9.0 solüsyonunun kullanılmasını öneririz.
Bu solüsyon ile işlem yapıldığında tek adımlı görüntüleme sistemleriyle (Polink-1 Broad HRP) ile birlikte kullanılan 1:200
dilüsyondaki antikor kolon kanserinde optimum boyanma göstermiş, p53 negatif olan normal akciğer dokusunda negatif
boyanma göstermiştir. Dilüsyon oranları yaklaşık tahminlerdir ve boyanma sonuçları kullanılan reaktiflere ve görüntüleme
protokollerine göre farklılık gösterebilir. Antikorun performansının ve uygun protokolün doğrulanması kullanıcının
sorumluluğundadır.
Boyama Prosedürü
Manuel Boyama Prosedürü
1. Lamları deparafinize edin.
2. Lamları yaklaşık 10 dakika süreyle peroksidaz bloklama solüsyonunda tutun ve ardından her biri 2 dakika olmak
üzere PBS-T ile 3 kez yıkayın.
3. Bu antikor için Isı Yoluyla Epitop Açma işlemi gereklidir.
4. Serum bloklama solüsyonu uygulayın (isteğe bağlı).
5. Primer antikoru uygulayın ve oda sıcaklığında 30-60 dakika inkübe edin. İnkübasyondan sonra PBS-T ile her biri 2
dakika olmak üzere 3 kez yıkama yapın.
6. Sekonder antikoru uygulayın ve görüntüleme sisteminin kullanma talimatında belirtilen şekilde inkübe edin. PBS-T ile
her biri 2 dakika olmak üzere 3 kez yıkama yapın.
7. Enzim konjugatı uygulayın ve görüntüleme sisteminin kullanma talimatında belirtilen şekilde inkübe edin. PBS-T ile
her biri 2 dakika olmak üzere 3 kez yıkama yapın.
8. Kromojeni uygulayın ve 5-10 dakika inkübe edin, ardından distile su ile yıkayın.
Boyanmanın Yorumlanması
Anti-insan p53 Fare Monoklonal Primer Antikorun hücredeki boyaması yoğun olarak hücre çekirdeğinde olur.
Performans Özellikleri
Normal dokularda/hücrelerde beklenen boyanma
Normal insan akciğerinin bu antikor için negatif olduğu gösterilmiştir.
Tümörde beklenen boyanma
Anti-insan p53 Fare Monoklonal Primer Antikoru (Klon:DO7) insan kolon tümörü dokularında güçlü çekirdek boyanmaları
oluşturur.
İletişim Bilgisi
SDIX LLC
111 Pencader Drive Newark, Delaware 19702 USA
+1 302 456 6789 +1 800 544 8881(USA) www.SDIX.com
Türkiye Temsilcisi
Novogen Diagnostik Laboratuar ve Sağlık Hizmetleri San. ve Tic. Ltd. Şti.
Mimar Sinan Mah. Üsküdar Cad. No:1 Yedpa Ticaret Merkezi, E Cad. No: 3 Ataşehir / İstanbul
Tel: 0216 457 93 33 Faks: 0216 457 93 44 [email protected]
CE00003
Versiyon 5
07/2015
Sayfa 2/2