LISANSUSTU TEZ SAVUNMASı - FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ
advertisement
T.C. RECEP TA YYİp ERDOGAN ÜNİvERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ • •••• LISANSUSTU TEZ SAVUNMASı BİYOLOJİ ANABİLİM DALı TEZ BAŞLIGI SUNAN DANIŞMAN : Bazı Bitki Yaprak, Çiçek Ve Tohum Özütlerinden Gram (+) Replikatif DNA Polimeraz İnhibitörlerinin İzolasyonu Ve Karakterizasyonu : AHMET MİDİLLİ : DOÇ. DR. CEMAL SANDALLı SAVUNMA TARİHİ : 13.05.2016 SAATİ : 14:00 YERİ : FEN-EDEBİYAT FAK., 405 NOLU DERSLİK ÖZET . Diospyros kaki (D. kaki) bitkisinin replikatif DNA polimeraz inhibisyonu, antimikrobial aktivitesi ve bazı kimyasal içeriklerinin çalışıldığı bu yüksek lisans tezinde bitkinin yaprak ve meyve kısımları kullanıldı. Replikatif bakteriyal DNA polimeraz olarak Bacillus subtilis (B. subtilis) replikatif DNA polimeraz Illa (PoIC) seçildi. Rekombinant üretim aşaması PolC'yi kodlayan genin PZR ile çoğaltılması ve pET-IOO TOPO vektörüne klonlanmasıyla sağlandı. Saflaştırma işleminde nikel afinite kolon kullanıldı. İnhibisyonun belirlenmesi için primer uzatma deneylerinde kullanılan bitkinin meyve ve yapraklarının metanol ve DMSO özüderi hazırlandı. Hazırlanan metanol özüderi PolC'ye karşı kullanıldı. Primer uzatma deneylerinde florojenik primer ihtiva eden ve sentetik olarak dizayn edilen 45/20-mer DNA kullanıldı. Diospyros kaki bitkisinin yaprak özütünün PolC üzerinde güçlü bir şekilde inhibisyon gösterdiği gözlemlenirken meyve özütünün ise PolC üzerinde inhibisyon etkisi göstermediği belirlendi. Hazırlanan DMSO özüderi ise antimikrobiyal aktivite için kullanıldı. Diospyros kaki yaprak özüderinin hem gram (-) hemde gram (+) olmak üzere iki grup bakteri üzerinde de antimikrobiyal aktiviteye sahip olduğu tespit edildi. Diospyrus kaki bitkisinin inhibisyon görülen yapraklarından eter ve metanol özüderinin HPLC-DAD ile fenolik bileşikleri aydınlatıldı. Diospyros kaki bitkisi yaprak özütlerinde rutin türevleri ve kamferol bulundu.
