KimyaKongreleri.org

7. Ulusal Afinite Teknikleri Kongresi, Ege Üniversitesi, 13-15 Eylül 2013, Çesme / Izmir
P-33
IgG Saflaştırmasına Yönelik Yeni Bir Metal-Şelat Afinite Sistemi
Olarak Cu(II) Bağlı p(HEMA-MIM) Manyetik Nanoküreler
Raziye Hilal ŞENAY1, Esra FEYZİOĞLU1, Burcu HOCA1, Mustafa SAÇMACI3,
Şerife SAÇMACI3, Şenol KARTAL3, Sinan AKGÖL3, Adil DENİZLİ4
1
Ege Üniversitesi, Fen Fakültesi, Biyokimya Bölümü, İzmir
Bozok Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Kimya Bölünmü, Yozgat
3
Erciyes Üniversitesi, Fen Fakültesi, Kimya Bölümü, Kayseri
4
Hacettepe Üniversitesi,Fen Fakültesi, Kimya Bölümü, Ankara
2
[email protected]
İmmunoglobilin G (IgG), immün sistemdeki en önemli antikor türüdür ve antikorların
yarısından fazlasını IgG oluşturur. Serumda ve doku sıvısında bol miktarda bulunur. Teröpatik,
immunodiagnostik ve immunokromatografik uygulamalarda genellikle yüksek saflıkta IgG
gerekmektedir [1]. Spesifik immunoglobulinlerin saflaştırılmasında başlıca çöktürme ve iyon değişim,
hidrofobik etkileşimler, boya afinite, immobilize metal şelat afinite tekniklerini içeren çeşitli
fizikokimyasal metodlar kullanılmaktadır [2]. İmmobilize metal iyon afinite kromatografisi (IMAC),
çeşitli protein, monoklonal antikorların ve enzimlerin saflaştırılmasında kullanılan etkili bir yöntemdir
[3]. IMAC, spesifik IgG ılımlı koşullarda elüsyonunu sağlar, biyolojik aktivitelerini korur ve protein
bağlanma afinitesinin kontrolü için geniş uygulama sağlar [3].
Bu çalışmada, IgG uzaklaştırmasına yönelik metal-şelat p(HEMA-MIM) manyetik nanoküreler
sürfaktansız emülsiyon polimerizasyonuyla sentezlenmiştir. Nanopartiküllerin ortamdan ayırımı
zahmetli ve maliyetli bir işlem olduğundan sentez aşamasında yapıya manyetik özellik
kazandırılmıştır. Sentezlenen p(HEMA-MIM) manyetik nanoküreleri Cu(II) iyonuyla
şelatlandırılmıştır. SEM, EDX ve FTIR teknolojileriyle manyetik nanokürelerin karakterizasyonu
yapılmıştır. Ardından Cu(II) bağlı p(HEMA-MIM) nanokürelerin IgG adsorpsiyon koşullarının (pH,
konsantrasyon, sıcaklık, iyon şiddeti) optimizasyonu gerçekleştirilmiştir. Son olarak, Cu(II) bağlı
p(HEMA-MIM) manyetik nanokürelerin, IgG adsorpsiyon kapasitelerinde dikkate değer kayıplar
olmadan tekrar tekrar kullanılabilir oldukları gösterilmiştir.
Anahtar Kelimeler: Metal-şelat afinite, IgG saflaştırılması, MIM, manyetik nanoküreler
Kaynaklar
[1 ] Uygun D.A., Şenay R.H., Türkcan C., Akgöl S., Denizli A., Appl Biochem Biotechnol, (2012), 168:1528–
1539
[2] Yavuz H., Akgöl S., Say R., Denizli A., International Journal of Biological Macromolecules (2006), 39,
303–309
[3] Tishchenko G., Hodrova B., Simunek J., Bleha M., Journal of Chromatography A, (2003), 983, 125–132
69
KimyaKongreleri.org