KimyaKongreleri.org

6. Ulusal Afinite Teknikleri Kongresi, Aksaray Üniversitesi, 26-29 Mayis 2010, Aksaray
P-10
HİSTİDİN İÇEREN MONOLİTİK KOLONLARLA ANTİBADİ AYRILMASI
1
1
1
1
2
Canan Armutcu , Engin Bayram , Nilay Bereli , Lokman Uzun , Rıdvan Say ,
Adil Denizli
1
1
Hacettepe Üniversitesi, Kimya Bölümü, Ankara
2
Anadolu Üniversitesi, Kimya Bölümü, Eskişehir
Glikoprotein, şeker ve aminoasitlerden oluşmuş organik moleküller için kullanılan genel tanımdır. Canlı
organizmalarda bulunan pekçok molekül glikoprotein yapısındadır. Ayrıca protein ve karbonhidratlar
glikoproteinleri oluştururlar. Ayrıca bazı hormonlar ve bağışıklık sistemi bazı kısımları glikoproteinlere
dahildir. IgG molekülü Y harfi şeklinde, monomer yapıda ve 150.000 dalton molekül ağırlığındadır.
IgG’ler globulin yapısında protein olduğundan polipeptid zincirlerinden meydana gelmişlerdir. Bir IgG
molekülünde 2 çeşit polipeptid zinciri vardır ve her bir çeşitten de 2’şer adet bulunur.
Monolitik kolonlar, tek parçalı gözenekli yapılar olarak kolon tüpleri içerisinde polimerizasyonla
hazırlanmaktadırlar. Gerekli durumlarda, matriks yüzeyi fonksiyonel hale getirilerek istenilen bağlama
özelliğine sahip sorbent üretimi yapılmaktadır. Kolay hazırlanabilmesi, eşsiz özellikleri ve mükemmel
performansından dolayı Yüksek Performans Sıvı Kromatografisinde (HPLC) son dönemlerde dikkatleri
üzerine çekmektedirler.
Yapılan çalışmada, monolitik kolon (HPLC) çelik kolonları (0.8 x 12 cm) içerisinde hazırlanmıştır.
Monolitik kolona fonksiyonel özellik kazandırmak için IgG molekülleriyle seçici etkileşime girdiği bilinen
psödo-seçici afinite ligand olarak histidin molekülü içeren monomer kullanılmıştır. Monolitler, FTIR ve
şişme testi ölçümleri ile karakterize edilmiştir. Hazırlanan monolitik kolonların etkinliğini belirlemek için
immunoglobulin G (IgG) model glikoprotein olarak seçilmiştir. Monolitlerin IgG ayırma performasına;
akış hızı, pH, derişim ve tuz derişiminin etkileri incelenmiştir. Çalışmanın son aşamasında plazmadan
albumin / IgG ayrılması gerçekleştirilmiştir.
KimyaKongreleri.org