SICAKLIK DEĞİŞİMLERİNİN MONOSİT/MAKROFAJ SİTOKİN

advertisement
SICAKLIK DEĞİŞİMLERİNİN MONOSİT/MAKROFAJ SİTOKİN CEVAPLARINA
ETKİSİ
Melikşah R. DEMİRCAN, Erol Nadi VARLI, M. Yasin ÖZTOPRAK, Ali Nazmican
GÜRÖZ, Zirvecan GÜNEŞ,
Danışmanlar: Doç. Dr. Nuray YAZIHAN, Arş. Gör. Can ATEŞ
Amaç
Enfeksiyonda vücut sitokin salınımında artış ile cevap verir. Bu sitokinler dış etkene karşı
konakçı savunma mekanizmasında rol alan hücrelerin ve yapıların iletişimini ve
aktivasyonunu sağlarlar. Vücut sıcaklığındaki değişimler immün hücre fonksiyonunu etkiler.
Bu projede farklı sıcaklık (30-40°C) değişimlerinin monositlerden TNF-α , IL-10 ve IFN-ɣ
sekresyonunu normal koşullarda ve E. Coli O157 lipopolisakkariti (LPS) uyarımı ile
değişimini belirlemeyi amaçladık.
Gereç Yöntem
İnsan monositer hücre dizisi THP-1 hücreleri farklı sıcaklıklarda (30-34-37-40°C) kültüre
edilerek monosit-makrofaj farklılaşması, hücrede apoptosis caspase-3 düzeyinin florimetrik
ölçümüyle hücre proliferasyonu MTT yöntemiyle ve sitokin sekresyonları ELISA kitiyle
ölçülerek değerlendirilmiş, naive/PMA ile uyarılmış monositlerin E. COli LPS
uygulanarakTNF-α, IL-10 ve IFN-Ɣ sekresyon düzeyleri ELISA yöntemiyle ölçülmüştür.
Değişkenlerin gruplar bazında dağılımları Kolmogorov Smirnov ve Shapiro Wilk testleriyle
değerlendirilmiş, normal dağılım varsayımlarının sağlandığı görüldükten sonra, değişkenlerde
gruplar arasındaki farklılığın incelenmesi için Tek Yönlü Varyans Analizi ve postdoc Tukey
çoklu karşılaştırma testi uygulanmıştır (SPSS 17). İstatistiksel anlamlılık sınırı olarak p < 0.05
kabul edilmiştir.
Bulgular
Ortam sıcaklığının 37 oC den 34 oC ye düşmesi genel olarak sitokin sekresyon fonksiyonlarını
azaltmaktadır, sıcaklığın 37 oC den 30 oC ye düşmesi hem monositlerde hem de makrofajlarda
belirgin apoptosise ve hücre ölümüne neden olmaktadır. 30 oC de makrofaja farklılaşmanın ve
sitokin sekresyonlarının arttığı gözlenmiştir. Ortam sıcaklığının 37 oC den 40 oC ye
yükselmesi proinflamatuar sitokin sekresyon fonksiyonlarını arttırmaktadır. 40 oC de hem
monositlerin hem de makrofajların proliferasyonları artmış, apoptosisi
azalmıştır.Bulgularımız 40 oC de immun hücre fonksiyonlarının arttığını düşündürmektedir.
Sonuç
Enfeksiyon gibi immün hücre fonksiyonlarının önemli olduğu durumlarda vücut «ateş» nin
artmasının mikrobiyal ajanlara karşı savunma sistemimizi güçlendiren önemli bir mekanizma
olduğu görülmektedir. Organ transplantasyonu gibi immun hücre fonksiyonlarının
baskılanması gereken durumlarda ortam sıcaklığındaki değişimlerin kontrollü ayarlanması
gerektiği, 30 oC gibi ortamların beklenenin aksine aşırı immun cevapla ortaya çıkabileceği
görülmektedir.
Anahtar Kelimeler:
LPS,Monosit,Makrofaj,Sıcaklık,Sitokin sekresyon düzeyleri
Download