KimyaKongreleri.org

III. Eser Analiz Çalistayi (EsAn-2014), 15-18 Mayis 2014, Gaziosmanpasa Üniversitesi, Tokat
P35
ŞAP AŞISI ÜRETİMİNDE KULLANILAN BHK (BABY HAMSTER KIDNEY)
HÜCRESİNE KADMİYUMUN ETKİSİNİN ARAŞTIRILMASI
Eda Taş, ALİ Rehber Türker
a
Şap Enstitüsü Müdürlüğü, Eskişehir yolu 7. km 06044 Söğütözü/ ANKARA
b
Gazi Üniversitesi, Fen Fakültesi, Kimya Bölümü, 06500 ANKARA
[email protected]
Şap hastalığı tüm çift tırnaklı hayvanlarda görülen, kontrolü zor, yayılması hızlı, çok büyük süt ve
et kaybı ile özellikle kültür ırkı sığırlarda ve buzağılarda ölümlere yol açması nedeniyle üzerinde en
çok durulan akut seyirli çok bulaşıcı ve ateşli bir viral hastalıktır[1].
Hastalığa karşı uygulanacak olan aşılar, şap virüsünün inaktif hale getirilerek hazırlandığı aşılardır.
Elde edilecek olan şap virüsünün üretilip çoğaltılabilmesi içinde BHK 21(BABY HAMSTER
KIDNEY) hücresi kullanılmaktadır.
Hücre kültürü bir dokudan ayrılan hayvan veya bitki hücrelerinin in vitro ortamda uygun besinlerin
ve koşulların varlığında yaşatılması ve çoğaltılmasıdır. Hücre kültür sistemleri de hücre popülasyon
yoğunluğuna ve hücrenin bir substrat yüzeyine tutunması veya süspanse halde üremesine bağlı
olarak, tek tabaka hücre kültürü ve süspanse hücre kültürü olarak ikiye ayrılır[2].
Bu çalışmada amaç, üretimine çalışılan BHK 21 hücresine kadmiyumun etkisini araştırmaktır. Bu
amaçla, BHK 21 hücresinin bulunduğu ortamdaki değişkenin sadece kadmiyum olması
düşünüldüğü için ortam ile ilgili değişken sayısının az olduğu tek tabaka hücre kültür ortamında
araştırmalar yapılmıştır.
Bu çalışmada BHK 21 hücresi, yaşadığı ortam olan kültür şişelerinde çoğaltıldı ve hücrenin
kadmiyum içeren besi ortamında yaşamını sürdürüp sürdüremeyeceği araştırıldı. Hücrenin
yaşamını sürdürebileceği en yüksek kadmiyum derişiminin bulunabilmesi amacıyla
sitotoksisitedenemesi olan MTT (metiltiazoldifenil-tetrazolyum bromür)’den yararlanıldı. Hücrenin
kadmiyum içeren besi ortamında %75 oranında yaşayabildiğikadmiyum derişimi 2,27 ± 0,01 mg/L
olarak bulundu. Belirlenen bu derişimde kadmiyum içeren besi ortamları hazırlanarak, hücre
canlılığı ortamda bulunan hücrenin sayısı yönünden hücreye etkisiolarak doğrulanmıştır. Yapılan
denemelerin sonucu olarak 2,50 ± 0,14 mg/L kadmiyum içeren besi ortamında %58 hücre canlılığı
varken, 2,90 ± 0,12 mg/L kadmiyum içeren besi ortamında %50 hücre canlılığı, 4,50 ± 0,27
mg/Lkadmiyum içeren besi ortamında ise %35 hücre canlılığı olmuştur. Kadmiyum tayini alevli
atomik absorbsiyon spektrometresi ile yapılmıştır.
Ayrıca kadmiyumun hücrede birikim yapıp yapmadığı da hücre canlılığının%75
olduğuCdderişiminde(2,27 ± 0,01 mg/L) araştırılmıştır. Hücre bu derişimde Cd içeren besi ortamı
ile 10 pasaj olarak üretildi. Her pasaj sonunda hücrenin bulunduğu besi ortamı ile hücre ayrıldı.
Ayrılan besi ortamında kadmiyum tayiniyapıldı ve sonuç2,05 ± 0,03 mg/L olarak bulundu.
Bulunan bu sonuca göre hücrede yaklaşık % 10 Cd birikimi olduğu belirlendi.
KAYNAKLAR
[1] Ergin, G. “Şap Virusu Üretiminin Dolgulu Reaktörlerde Araştırılması’’ Hacettepe Üniversitesi, Fen
Bilimleri Enstitüsü, Yüksek Lisans Tezi, 2010.
[2] Kiremitçi, M. “Süspansiyon Polimerizasyonuyla Üretilen Akrilik Ve Alkil Plazmaları İle Modifiye Edilen
Polistiren Bazlı PolimerikMikrotaşıyıcılar İle Desteklenmiş BHK Hücre Kültürü ve Şap Virüsü
üretiminin Deneysel Ve Matematiksel Olarak İncelenmesi’’ Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri
Enstitüsü, Doktora Tezi, 1988.
75
KimyaKongreleri.org