KimyaKongreleri.org

6. Ulusal Afinite Teknikleri Kongresi, Aksaray Üniversitesi, 26-29 Mayis 2010, Aksaray
P-35
HİDROFOBİK ETKİLEŞİM KROMATOGRAFİSİ İLE DNA SAFLAŞLAŞTIRILMASI
Recep Üzek, Lokman Uzun, Serap Şenel, Adil Denizli
Hacettepe Üniversitesi, Kimya Bölümü, Ankara
Hidrofobik etkileşim kromatografisi; biyomoleküllerin yapısında bulunan polar olmayan bölgeler ile
ligandlar arasında gerçekleşen hidrofobik etkileşimleri temel alan bir protein saflaştırma tekniğidir.
DNA, adenin, guanin, sitozin ve timin olarak adlandırılan bazların fosfodiester bağlarıyla birbirlerine
bağlanmasıyla oluşur. Bu bazlar hidrofobik özelliğe sahip oldukları için DNA’ya hidrofobik özellik
kazandırmaktadır. Hidrofobik etkileşim kromatografisi yüzeylerinin farklı hidrofobik karakterlere sahip
olması temeline dayandığı için DNA’da bu teknik ile saflaştırılmaktadır. Bu çalışmada, adsorbent
olarak
poli(2-hidroksiletil
metakrilat-N-metakriloil-L-fenilalanin)
[poli(HEMA-MAPA)]
kriyojeli
hazırlanmıştır. MAPA monomeri, ligand olarak yapısına girdiği poli(HEMA) ya hidrofobik özellik
kazandırır. Poli(HEMA) ise temel taşıyıcı katı destek olarak seçilmiştir.
Süpermakrogözenekli
hidrofobik poli(HEMA-MAPA) kriyojeli sulu dağıtma ortamında, HEMA ve MAPA monomerlerinin
serbest radikal polimerizasyonu ile üretilmiştir. Süpermakrogözenekli kriyojel, fourier transform ınfrared
spektroskopisi (FTIR), taramalı elektron mikroskopisi (SEM) ile karakterize edilmiştir. Adsorpsiyon
deneyleri, farklı ortam koşullarında sürekli kolon sisteminde incelenmiştir (pH, akış hızı, DNA derişimi,
sıcaklık, tuz etkisi). Poli(HEMA-MAPA)
kriyojelin DNA adsorpsiyon kapasitesi 89.6 mg/g olarak
bulunmuştur. Desorpsiyon için glisin tamponu ( pH:3, 0.1 M NaCl) kullanılmış ve % 91 geri kazanım
sağlanmıştır. Bu çalışmadaki tüm deneylerde aynı kriyojel kullanılmış ve adsorpsiyon kapasitesinde
önemli bir değişim gözlenmemiştir.
KimyaKongreleri.org