real tıme pcr unıversal master mđks

advertisement
REAL TIME PCR UNIVERSAL MASTER MĐKS - 1X
TAVSĐYE EDĐLEN PCR PROGRAMI(*)
KATALOG NUMARALARI
SNPRTM01 (10 TEST)
SNPRTM05 (50 TEST)
GĐRĐŞ
95 °C
10 dk.
95 °C
15 sn.
60 °C
1 dk.
35 döngü
Real Time PCR Universal master miks, içerisinde primer ve prob hariç
bir PCR reaksiyonun gerektirdiği tüm bileşenler olan 10X PCR Buffer,
(*) Çalışmaya göre değişebilir
MgCl2, dNTP ve su bulundurur. Primer ve prob, bölgeye özgüdür ve
kullanıcı tarafından eklenmelidir. Reaksiyon için gerekli olan Hot Start
TEST PROSEDÜRÜ
Taq DNA polimeraz da miks ile bilrlikte verilmektedir.
Universal PCR Master Miks, kullanıma hazır bir mikstir. Ancak, primere
ve proba özgü optimizasyon gerektirebilir. Standart bir reaksiyon içeriği
aşağıda belirtilmiştir. Kullanılacak olan PCR programı primerler ile ilişkili
olması nedeniyle kullanıcı tarafından tekrar optimize edilebilir.
MĐKS PRENSĐBĐ
PCR esnasında enzim aktivitesi ile birlikte reporter ve quencer arasında
bulunan prob parçalanarak ayrılır ve reporter boya üzerindeki
Universal Master Miks
19,5 µl
baskılanmanın ortadan kalkmasıyla ışıma meydana gelir. Bu işlem
Primer F (10 pmol)
* µl
sadece hedef bölge üzerinde hibridize olmuş problarda gerçekleşir.
Primer R (10 pmol)
* µl
Amplifikasyon miktarı arttıkça,
Prob (5 pmol)
* µl
birlikte ışıma doğrusal olarak artmakta ve bu artış cihaz tarafından eş-
Hot start taq DNA Polimeraz
0.2 µl
zamanlı olarak tespit edilmektedir. Bu miks prop içermeyen diğer real
DNA **
time PCR (Syber Green-Scorpion gibi) çalışmaları için de güvenle
PCR Grade Su
kullanılabilir
-------------------------------------------------------
reporter boyanın açığa çıkmasıyla
(Toplamda 100 - 150 ng)
25 µl’ye tamamlayın
Toplam Miktar
25 µl
ÜRÜN ĐÇERĐĞĐ
Bileşen
• Real Time PCR Universal Master Miks (1X)
• Enzim
• PCR Grade Su
10 Test
200 µl
6 µl
100 µl
(*)
Primer ve prob konsantrasyonuna göre değişebilir.
(**) DNA miktarı (µl de kaç ng olduğu) izolasyon yöntemine göre farklılıklar
gösterebilmektedir. Bu nedenle ng cinsinden bahsedilen miktara eşdeğer µl
konulması önerilir.
UYARILAR
SAKLAMA KOŞULLARI
•
Tüm bileşenler – 20°C de ve karanlıkta saklanmalıdır.
•
Tüm bileşenler, ürün kutusunun üzerinde belirtilen son kullanma
•
unutulmuş solüsyonları kullanmayınız.
•
tarihine kadar kullanılabilir.
•
Sürekli eritip çözdürmek, ürünün hassasiyetinde azalmalara neden
Saklama koşullarına uygun olarak saklayınız, oda sıcaklığında
Solüsyonlar, baş aşağı edilerek hafifçe karıştırıldıktan sonra tüplere
bölünmelidir.
•
olabilir.
Belirtilenden fazla miktarda enzim kullanılması sonucu olumsuz
etkileyebilmektedir.
•
Master Miks içeriğinde bulunan tüm solüsyonlar vücut içinde
kullanıma uygun değildir. Sadece vücut dışı test kiti olarak
kullanılır.
•
Master
mikslerin
raf
ömrü
etiket
üzerinde
Kullanmadan önce üretim tarihine dikkat edilmelidir.
Düzenlenme Tarihi: 12.03.2012
belirtilmiştir.
Download