UNIVERSAL PCR MASTER MĐKS - 1X TAVSĐYE EDĐLEN PCR PROGRAMI(*) KATALOG NUMARALARI SNPM01 (10 TEST) SNPM05 (50 TEST) GĐRĐŞ 95 °C 10 dk. 95 °C 15 sn. 60 °C 1 dk. 35-45 döngü Universal PCR master miks, içerisinde primer hariç bir PCR reaksiyonun gerektirdiği tüm bileşenler olan 10X PCR Buffer, MgCl2, dNTP ve su bulundurur. Primer, bölgeye özgüdür ve kullanıcı (*) Çalışmaya göre değişebilir tarafından eklenmelidir. Reaksiyon için gerekli olan Hot Start Taq DNA polimeraz TEST PROSEDÜRÜ da miks ile birlikte verilmektedir. Universal PCR Master Miks, kullanıma hazır bir mikstir. Ancak, primere MĐKS PRENSĐBĐ belirtilmiştir. Kullanılacak olan PCR programı primerler ile ilişkili olması Universal PCR Master Miks, klasik PCR ve Agaroz Jel Elektroforez nedeniyle kullanıcı tarafından tekrar optimize edilebilir. özgü optimizasyon gerektirebilir. Standart bir reaksiyon içeriği aşağıda çalışmalarına uygun olarak geliştirilmiştir. PCR, nükleik asitlerin in-vitro olarak (canlı organizma dışında), uygun Universal Master Miks 43 µl koşullar altında çoğaltılmasına dayanmaktadır. Çoğaltılmak istenen Primer F (10 pmol) * µl bölgenin iki ucuna özgü, bu bölgedeki baz dizilerine tamamlayıcı olan, Primer R (10 pmol) * µl 18-25 baz uzunluğunda bir çift sentetik oligonükleotid primer Hot start taq DNA Polimeraz kullanarak, bu iki primer ile sınırlandırılan bölgenin enzimatik olarak DNA ** sentezlenmesi sağlanır. PCR Grade Su 0.3 µl (Toplamda 100 - 150 ng) 45 µl’ye tamamlayın DNA’nın elektroforetik analizinin temeli, bu molekülün elektriksel bir ------------------------------------------------------- alanda, jel üzerinde hareketine dayanmaktadır. Toplam Miktar ÜRÜN ĐÇERĐĞĐ (*) Bileşen • PCR Universal Master Miks (1X) • Enzim • PCR Grade Su 10 Test 450 µl 6 µl 100 µl 45 µl Primer konsantrasyonuna göre değişebilir. (**) DNA miktarı (µl de kaç ng olduğu) izolasyon yöntemine göre farklılıklar gösterebilmektedir. Bu nedenle ng cinsinden bahsedilen miktara eşdeğer µl konulması önerilir. UYARILAR SAKLAMA KOŞULLARI • Tüm bileşenler – 20°C de ve karanlıkta saklanmalıdır. • Tüm bileşenler, ürün kutusunun üzerinde belirtilen son kullanma tarihine kadar kullanılabilir. • Sürekli eritip çözdürmek, ürünün hassasiyetinde azalmalara neden olabilir. • Saklama koşullarına uygun olarak saklanmalıdır. • Oda sıcaklığında unutulmuş PCR master miskler kullanılmamalıdır. • PCR master miksi oda sıcaklığında tamamen eritilip, baş aşağı edilerek hafifçe karıştırıldıktan sonra tüplere bölünmelidir. • Master miksler tüplere bölündükten sonra Hot Start Taq DNA Polimeraz ve DNA eklenerek hemen PCR işlemine geçilmelidir. • Belirtilenden fazla Hot Start Taq DNA Polimeraz koyulmamalıdır. • PCR master miksleri vücut içinde kullanıma uygun değildir. Sadece In vitro kullanım içindir. • PCR master mikslerin raf ömrü etiket üzerinde belirtilmiştir. Kullanmadan önce üretim tarihine dikkat edilmelidir. Düzenlenme Tarihi: 12.03.2012