Koliform Grup Bakteri / Fekal koliformlar / E. coli İlişkisi Ankara Üniversitesi Araştırma Fonu 97 11 12 01 nolu proje. Yürütücü: Prof. Dr. A. Kadir Halkman. Ankara, 1999. * Bu çalışmanın ; koliform grup bakteriler genel bilgiler, koliform grup bakterilerin aranması ve sayılması bölümlerine ulaşabilirsiniz. 01. Genel Bilgiler 01. Genel Bilgiler Koliform grup bakteri tanımındaki karmaşaya benzer şekilde E. coli dışında hangi türlerin fekal koliform olarak tanımlanması gerektiği açık değildir. Jay (1992) fekal koliformları E. coli tip I ile bazı Citrobacter ve Klebsiella türleri olarak tanımlamıştır. Çeşitli salatalarda fekal koliform aranması adlı çalışmada analiz edilen 101 örneğin 86' sında koliform grup bakteri bulunduğu, bunların 61 'inin (%70.9) fekal koliform grup bakteri olduğu belirlenmiştir. Koliform grup bakteri pozitif olan 86 örnekte β-GUR enzimi varlığı ile yapılan E. coli testinde 63 örnek (%73.2) pozitif sonuç vermiştir. Bir diğer deyiş ile β-GUR enzimi ile saptanan E. coli varlığının tümü fekal koliform analizine dayalı E. coli testi ile doğrulanmamıştır. Fekal koliform belirlenen örneklerin sadece bir adedinde E. coli saptanamamıştır. Bir diğer deyiş ile fekal koliform testinin pozitif olduğu örneklerde E. coli oranı %98.4 olarak bulunmuştur. Yapılan izolasyon ve identifikasyon testleri sonunda EC Broth besiyerinde 44.5 oC' da gelişerek gaz oluşturan bakterilerin Enterobacter aerogenes ve Serratia spp. oldukları saptanmıştır. Çeşitli şarküteri ürünlerinde fekal koliform aranması adlı çalışmada ise analiz edilen 100 örneğin 75 adedi koliform grup bakteri açısından pozitif bulunmuştur. Bunların 66 adedi (%85) fekal koliform varlığı açısından pozitif iken fekal koliform bulunan örneklerin 56 adedinde (%85) E. coli saptanmıştır. E. coli bulunan örneklerin tümünde fekal koliform bulunmuştur. Gürsu (1998)' nun bulgularına paralel olarak bu çalışmada da yapılan izolasyon ve identifikasyon testleri sonunda yine EC broth besiyerinde 44.5 oC' da gelişip gaz oluşturan bakterilerin Enterobacter aerogenes ve Serratia spp. oldukları belirlenmiştir. Bir başka çalışmada fekal koliformlar ile E. coli arasında r= 0.86 düzeyinde yüksek ilişki olduğunu bulmuştur. Benzer şekilde fekal koliformların çok büyük bir bölümünün E. coli olduğuna deyinilmekte, depolanmış ve taze istiridyelerde fekal koliform ile E. coli arasında çok büyük bir korelasyon olduğu ve dolayısı ile bu üründe fekal koliform tayini ile beraberce yapılan 1 E. coli tayininin gereksiz olduğunu belirtilmektedir. Yenilebilir su kaplumbağası (Diamondback Terrapin ; Malaclemys terrapin centrata) ile yapılan bir çalışmada fekal koliform izolatları içinde E. coli 'nin büyük paya sahip olduğu gösterilmiştir. HGMF ile gıdaların koliform içeriğinin saptamasına yönelik bir çalışmada elde edilen kolonilerin %100' ünün koliform grup bakteri, %98' inin fekal koliform ve %97-99' unun E. coli olduğu belirtilirken fekal koliformlar içinde E. coli 'nin payı da dolaylı olarak gösterilmiştir.Sularda yapılan fekal koliform analizinde izolatlar %96.69 E. coli, %2.32 Ent. cloacae, %0.66 Kleb. pneumoniae, %0.33 Citr. freundii olarak identifiye edilmiştir. Yapılan araştırmalar fekal bir bakteri olan E. coli suşlarının %90 kadarının 44.5 oC' da gaz üretebildiğini ve E. coli suşlarının 44.5 oC' da triptofandan indol oluşturma testinin aynı sıcaklıkta laktozdan gaz oluşturma özelliğinden daha stabil olduğunu gösterirken, fekal koliform testinde gaz üreten bakterilerin %95-98 ' inin E. coli olduğu saptanmıştır. Buna göre sadece E. coli aranması %95-98 doğrulukla fekal koliform sayısının belirlenmesinde kullanılabilir. Bunun yanında fekal olmayan bazı Enterobacter ve Klebsiella türlerinin de fekal koliform testinde pozitif sonuç verdiği saptanmıştır. Bu bulgular fekal koliform testinin grubun en tipik üyesi olan E. coli belirlenmesinde dahi yetersiz olduğunu açıklamaktadır Koliform grup bakteriler ve E. coli üzerine yapılan bir araştırmada haşlanıp dondurulmuş gıdaların %40' ı fekal koliform testinde pozitif sonuç vermiş, bu örneklerin sadece %29' unda E. coli belirlenmiştir. Aynı çalışmada EC broth besiyerinde 44.5 oC' daki inkübasyonda E. coli dışında gaz oluşturan bakterilerin sırası ile Kleb. pneumoniae, Ent. cloacae, Ent. agglomerans, Ent. aerogenes oldukları, bunlarında fekal değil toprak kökenli oldukları saptanmış, elde edilen düşük E. coli / fekal koliform oranı E. coli 'nin dondurma işlemine diğer bakterilerden daha duyarlı olmasına bağlanmıştır. Bununla beraber fekal olmayan bakterilerin de bu test sonucunda gaz oluşturmaları bu oranı dolaylı ve hatalı şekilde düşürmektedir. Fekal koliform sayısının BGB broth besiyerinde 44.5 oC inkübasyon sıcaklığında belirlendiği bir çalışmada 70 örneğin 43' ünde E. coli bulunmuş, BGB brothda 44.5 oC' da gaz pozitif sonuç veren 347 izolatın %42.7 'sinin E. coli, %57.3 'ünün ise diğer koliform bakteriler olduğu belirlenmiştir. Midyelerden izole edilen 463 fekal koliform bakterinin IMViC testi ile 458 adedinin E. coli olduğu belirlenmiş, sonra Automicrobic System (AMS) ve API 20E test kitleri ile 458 E. coli 'nin identifikasyonu tekrarlanmıştır. AMS bu izolatların 433 adedini E. coli, 25 adedini E. hermanii olarak, API 20E ise tüm izolatları E. coli olarak tanımlamıştır. Yapılan ek testler AMS 'nin E. hermanii olarak belirlediği identifikasyon sonuçlarının hatalı olduğunu göstermiştir. 2