Basıldığında KONTROLSUZ KOPYA niteliğindedir. ULUSAL MİKROBİYOLOJİ STANDARTLARI (UMS) Suçiçeğinin (Varicella zoster virus enfeksiyonunun) Mikrobiyolojik Tanısı Hazırlayan Birim Klinik Viroloji Tanı Standartları Çalışma Grubu Onaylayan Birim Türkiye Halk Sağlığı Kurumu Kategori Viroloji Bölüm Mikrobiyolojik Tanımlama Standart No V-MT-09 Sürüm No 1.1 Onay tarihi 01.01.2015 Geçerlilik tarihi 01.01.2018 Sürüm no Değişiklik Tarih Suçiçeği İÇİNDEKİLER KAPSAM VE AMAÇ............................................................. 3 KISALTMALAR VE TANIMLAR .............................................. 3 GENEL BİLGİ ................................................................... 3 Hastalığın önemi............................................................... 3 Klinik özellikleri ................................................................ 4 Laboratuvar Tanısı ............................................................ 5 TEKNİK BİLGİLER ............................................................. 6 1 2 3 4 5 Hedef mikroorganizma .................................................. 6 Tanı için asgari laboratuvar koşulları ................................ 6 Suçiçeğinin tanısında kullanılan teknikler .......................... 8 Test sonuçlarının yorumu, raporlama, bildirim ................... 9 Olası sorunlar/kısıtlılıklar .............................................. 10 KAYNAKLAR ................................................................... 10 Sayfa 2 / 10 Ulusal Mikrobiyoloji Standartları 01.01.2015 / Sürüm: 1.1 / V-MT-09 / Mikrobiyolojik Tanımlama / Viroloji Suçiçeği Kapsam ve Amaç Suçiçeği (varicella; chickenpox) genellikle çocukluk yaş grubunu etkileyen akut döküntülü bir viral enfeksiyondur. 2000’li yılların ortalarından itibaren ülkemizde sürveyans kapsamına alınmış; bildirimi zorunlu hastalıklar listesine dâhil edilmiştir (1,2). Suçiçeğinin tanısında enfeksiyon özelliklerinin tipik olması nedeni ile sıklıkla tanı klinik olarak konmakla birlikte bazı olgularda mikrobiyolojik tanı gerekmektedir. Bu çerçevede, bu UMS belgesinde suçiçeğinin laboratuvar tanısı için güncel ve geçerli yöntem ve yaklaşımların verilmesi hedeflenmiştir. Kısaltmalar ve Tanımlar FAMA Membran antijenine karşı floresan antikor testi HSV Herpes simpleks virüs ORF Open reading frame (açık okuma çerçevesi) VZV Varisella zoster virus Genel Bilgi Suçiçeği enfeksiyonu varicella zoster virus (VZV)’ün neden olduğu bir klinik tablodur. Etken VZV bir DNA virüsüdür ve diğer herpes virüslerinde içinde yer aldığı Herpesviridae ailesinin bir üyesidir (3). Yalnızca insanda hastalık yapar ve insanlar bu virüs için tek enfeksiyon kaynağıdır. Virüsün çevresel şartlarda kısa bir yaşam süresi olduğu tahmin edilmektedir. Diğer herpes virüsleri gibi, VZV de ilk enfeksiyondan sonra vücutta latent bir enfeksiyon şeklinde varlığını sürdürme özelliğine sahiptir ve duyusal sinir ganglionlarında kalmaya devam eder. VZV ile ilk enfeksiyon suçiçeği ile sonuçlanır. Herpes zoster (zona) tekrarlayan enfeksiyonun bir sonucudur ve genellikle erişkinlerde, hem 45 yaş üzeri bağışıklık sistemi normal bireylerde hem de HIV ve diğer immün yetmezlik durumlarında görülür (4). Hastalığın önemi Suçiçeği dünyanın hemen her yerinde görülen bir hastalıktır. Rutin aşılama programı uygulanmayan ülkelerde suçiçeği yaygın olarak çocukluk çağında görülür. Suçiçeği son derece bulaşıcıdır; etken virüs solunum damlacıklarıyla çok kolay yayıldığından, çocukların hemen hepsi hastalığı geçirir. İkincil enfeksiyon atağı duyarlı ev temaslılarında %61-100 oranındadır (4). Rutin aşılama programı uygulanmayan ülkelerde erişkinlerde VZV’ye karşı bağışıklık %90’dır. Suçiçeği genellikle ılımlı bir hastalık tablosu ile seyretse de yol açabildiği komplikasyonlar ve ölüm riski nedeniyle halk sağlığı açısından önem arz eder. Ulusal Mikrobiyoloji Standartları Viroloji / Mikrobiyolojik Tanımlama / V-MT-09 / Sürüm: 1.1 / 01.01.2015 Sayfa 3 / 10 Suçiçeği Hastalığın şiddeti ve komplikasyonlarının 1 yaşın altındaki bebeklerde, erişkin yaşta ilk enfeksiyonu geçirenlerde ve bağışıklığı baskılanmış kişilerde arttığı bilinmektedir. Bağışıklığı baskılanmış olgularda VZV enfeksiyonu ciddi ve jeneralize seyreder (5). Doğumdan önceki 5 gün ve sonraki 2 gün arasında döküntüleri başlayan kadınların yeni doğan bebekleri de ciddi enfeksiyon riski altındadır ve fatalite oranı %30 kadar yüksek olabilir (6). Ancak, sağlıklı çocuklar ve yetişkinlerde de ciddi komplikasyonlar gelişebilir ve ölüm olabilir. Sekonder bakteriyel enfeksiyonlar (en önemlisi A grubu beta-hemolitik streptokokun neden olduğu sellülit, nekrotizan fasiit, septisemi, ve toksik şok sendromu gibi enfeksiyonlar), pnömoni, ensefalit, serebellar ataksi, Reye sendromu ve ölüm en önemli komplikasyonlardır (4,6). VZV gebelik esnasında anneden bebeğe plasental yol ile geçebilir ve fetüsü etkiler. Bulaşma, suçiçeği ya da herpes zosterli kişilerle direkt temas veya suçiçeği olan bireylerin solunum damlacıkları veya lezyonlarından saçılan virüsün solunum yoluyla alınması sonucu olur. Kapalı ortamlarda damlacık enfeksiyonu olasılığının artmasına bağlı olarak suçiçeği prevalansı sert iklimlerde daha yüksektir. Klinik özellikleri Suçiçeğinin inkübasyon süresi 10-21 gündür. İnkübasyon döneminden sonra ateş ve halsizlik gibi prodrom belirtiler başlar. Ardından önce kaşıntılı papüller izlenir. Eritemli papül üzerinde oluşan vezikül zaman içersinde püstülleşir ve kurutlanır. Hastalık tablosunda görülen döküntüler her gün yeni eklenen döküntüler nedeni ile aynı anda makülopapüler, veziküler ve kabuklanmış olabilir. Makülopapüler lezyonlar vezikülleştikten sonra 1-2 gün içinde kabuklanır, ama üç haftadan önce tamamen iyileşmez. Döküntülerin dağılımı gövdede başlar sonra yüz ve ekstremitelere yayılır. Avuç içleri ve ayak tabanları nadir etkilenirler. Bulaştırıcılık döküntülerin/semptomların 1-2 gün öncesinde başlar ve açık lezyonlar olduğu sürece ve immünkompetan olgularda döküntünün yaklaşık beşinci gününe kadar sürer. Suçiçeği sağlıklı çocuklarda oldukça ılımlı seyreder. Ancak bazen komplikasyonlar görülebilir. Suçiçeğinin en yaygın komplikasyonu deri lezyonlarının stafilokoklar veya streptokoklarla sekonder bakteriyel enfeksiyonlardır (4). Ayrıca pnömoni, menenjit, ensefalit ve myelit tablolarına da neden olabilir. Pnömoni genellikle viraldir, fakat bazen bakteriyel de olabilir. Ensefalit primer akut enfeksiyonu takiben veya postenfeksiyöz izlenebilir; oldukça nadir bir komplikasyon olmakla birlikte (tahminen 10.000 vakada 1.8) nöbetlere ve komaya neden olabilir (3,6). Yaygın serebral tutulum daha ziyade erişkinlerde olur. Gebelikte geçirilen enfeksiyon fetal enfeksiyona yol açar. VZV aşısı sonrasında 7-42. günde (ortalama 3-4 hafta) aşı yerinde veya vücutta suçiçeği benzeri döküntüler de görülebilir. Bu lezyonlardan VZV Oka (aşı) suşu PCR ile saptanabilir (3,7). Eğer duyu sinir gangliyonlarında yerleşik latent VZV yeniden -genellikle primer enfeksiyondan yıllar sonra- aktive olursa (nüks), zona meydana gelir ve dorsal gangliyonun inerve ettiği anatomik bölgede, deride, suçiçeğinde görülene benzer lezyonlar ortaya çıkar. VZV’nin latentlik durumunu kontrol eden immünolojik mekanizma iyi anlaşılmamıştır. Ancak, ileri yaş, immün baskılanma, VZV’ye intrauterin maruz kalma ve erken yaşta (18 aylıktan küçük bebek) suçiçeği geçirme gibi faktörlerin nüks ile ilişkili olduğu bilinmektedir. Sayfa 4 / 10 Ulusal Mikrobiyoloji Standartları 01.01.2015 / Sürüm: 1.1 / V-MT-09 / Mikrobiyolojik Tanımlama / Viroloji Suçiçeği Zona lezyonları konak immün yanıtı ile (özellikle anti-VZV sitotoksik T hücre) kontrol altına alınır ve birkaç haftada iyileşir. Nadiren immün yeterli kişilerde, çok ağrılı post-herpetik nevralji, menenjit, ensefalit, göz tutulumu, perivaskülit, atipik nekrotizan retinopati gibi komplikasyonlar gelişebilir. HIV enfeksiyonu ve bazı kanserler gibi immün yetmezlik hallerinde ağır ve yaşamı tehdit eden zona görülebilir (3,4). Laboratuvar Tanısı Klinik özelliklerin çok tipik olması nedeni ile tanı çoğunlukla klinik olarak konur. Suçiçeği bildirimi zorunlu bir hastalıktır ve sürveyansa esas standart vaka tanımına göre klinik olarak akut başlayan, belirgin başka bir nedeni olmayan saçlı deri ve gövdede daha yoğun olmak üzere tüm vücutta- yaygın ve değişik dönemleri bir arada görülen papüloveziküler döküntülerin eşlik ettiği hastalık olası suçiçeği vakasıdır. Laboratuvarca doğrulanmış bir vakayla epidemiyolojik ilişkili olan olası vaka, ya da laboratuvar tanısı yoksa da epidemiyolojik olarak birbiri ile ilişkili iki olası suçiçeği vakası kesin suçiçeği vakası olarak tanımlanmaktadır (2). Ancak şüpheli suçiçeği olguları eğer mümkünse laboratuvar incelemesi ile doğrulanmalıdır. Özellikle atipik seyirli enfeksiyon HSV enfeksiyonu döküntüleri ile karışabilir. Virüs kültürlerden izole edilebilirse de, hayli düşük duyarlılığa sahip olması, buna karşın emek yoğun bir teknik olması ve sonucun günler sonra çıkması nedeniyle tercih edilmemektedir. Eğer kültür yapılacaksa en iyi örnek veziküler sıvıdır. Kültür ile vahşi tip VZV ve aşı suşunun ayrımını yapmak da mümkündür (4). Viral izolasyonda kullanılan hücre dizileri Vero, Afrika yeşil maymun, insan amniyotik epitel ve insan embriyonik deri fibroblastlarıdır. Viral kültür sonrası tanımlama ise floresan ile işaretlemiş monoklonal antikorlar ile yapılır. Suçiçeğinde döküntülerin başladığı ilk üç günde virüs lezyonlarda saptanmaya başlanır (3). Ciddi veya enfeksiyonun alışılmadık bir görünümde seyrettiği bir vakada, özgül antiviral tedavinin en kısa zamanda başlanabilmesi için hızlı tanımlama teknikleri önem kazanmaktadır. Bu nedenle suçiçeği tanısında öncelikle önerilen yöntem PCR’dır. Gerçek-zamanlı PCR en duyarlı tekniktir ve artık laboratuvarlarda yaygın bir şekilde uygulanabilmektedir. Sonuçlar birkaç saat içinde alınabilmektedir. Eğer gerçek-zamanlı PCR imkânı yoksa -daha az duyarlı, örnek toplanması ve incelenmesi daha fazla titizlik isteyen bir teknik olsa da- DFA kullanılabilir (3,4). Atipik tabloda lezyondan VZV antijeninin saptanması hızlı sonuç veren bir yaklaşımdır. Santral sinir sistemi enfeksiyonunun tanısı ise BOS’ta VZV DNA’nın saptanması ile konur. Vezikül sıvısı, kurut/kabuk ve amniyon sıvısından VZV DNA’nın saptanması tanı koydurucudur (3,5,8,8). Serolojik tanı da primer enfeksiyonun saptanmasında anlamlıdır. Piyasada çeşitli EIA kitleri mevcuttur. Serum örneğinde kuvvetli IgM pozitifliğinin saptanması veya IgG’nin serokonversiyonunun gösterilmesi tanı koydurucudur. Öte yandan, suçiçeğinde döküntü ayırt ettirici ve subklinik vakalar da çok nadir olduğu için, suçiçeği geçirmiş olma öyküsü bağışıklığın geçerli bir ölçüsüdür. Bu nedenle bağışıklığın değerlendirilmesi amacıyla özellikle çocuklarda serolojik test yapılmasının gereksiz olduğu kabul edilmektedir (4). Ulusal Mikrobiyoloji Standartları Viroloji / Mikrobiyolojik Tanımlama / V-MT-09 / Sürüm: 1.1 / 01.01.2015 Sayfa 5 / 10 Suçiçeği Teknik Bilgiler 1 Hedef mikroorganizma Varicella zoster virus (VZV) 2 Tanı için asgari laboratuvar koşulları 2.1. Laboratuvar güvenliği Suçiçeği şüpheli enfeksiyonların tanısı asgari BGD2 laboratuvar şartlarında gerçekleştirilmelidir. Bütün klinik örnekler enfeksiyöz kabul edilmeli, daima standart önlemler uygulanmalı ve önlemler risk değerlendirmesi ile de desteklenmelidir. Aerosol oluşturması muhtemel tüm laboratuvar çalışmaları bir sertifikalı sınıf-IIA BGK içinde yapılmalıdır (ayrıca bkz. “Ulusal Laboratuvar Güvenliği Rehberi”). Serum ayırma ve testlerin çalışılması sırasında daima eldiven giyilmelidir! 2.2. Sorumluluklar ve asgari personel gerekleri Bu UMS’yi kullanacak laboratuvar personeli; (i) teknikleri uygulamadan önce, amaçlanan kullanım ile ilgili eğitim almış olmalı; (ii) uygulamaya tüm yönleriyle aşina olmalı, ve; (iii) daima tüm laboratuvar güvenlik kurallarına uymalıdır. Hem güvenlik önlemlerine uyumun sağlanmasından hem de testlerin standart prosedürlere uygun yapılmasından ve tanının doğruluğu ve güvenilirliğinden Mikrobiyoloji Uzmanı sorumludur. 2.3. Örnek, Reaktif, Kit, Donanım İnceleme örnekleri İnceleme örneklerinin seçimi, özellikleri, alınması, gönderilmesi ve laboratuvara kabulü ile ilgili kriterler ve bilgi için “Bulaşıcı Hastalıkların Laboratuvar Tanısı için Saha Rehberi”ne başvurulmalıdır. Aşağıda bazı önemli noktalara tekrar dikkat çekilmiştir. Serolojik incelemeler için - Serum PCR için - Vezikül sıvısı, vezikül kazıntısı, vezikül kabuğu örnekleri idealdir. Makülopapüler lezyonlardan (henüz vezikül oluşmamış iken) da lezyonun üzeri bir lam veya bistüri kenarı ile tahriş edildikten sonra kazıntı örneği alınabilir. Bu örnekler steril, herhangi bir taşıma besiyeri içermeyen tüpe konurlar ve kuru olarak oda sıcaklığında gönderilirler. Kuru örnekler oda sıcaklığında birkaç hafta stabil kalabilirler. Bu önemli bir taşıma kolaylığı sağlar (8). PCR için - BOS, doku biyopsi örnekleri, amniyon sıvısı, BAL ve diğer vücut sıvıları da alınabilir. Bu örnekler laboratuvara soğuk zincirde gönderilmeli; uzun süreli saklama için ise dondurulmalıdır. DFA için - Veziküler lezyon tabanından epitel kazıntı örneği kullanılır. Sayfa 6 / 10 Ulusal Mikrobiyoloji Standartları 01.01.2015 / Sürüm: 1.1 / V-MT-09 / Mikrobiyolojik Tanımlama / Viroloji Suçiçeği Reaktif/Kit ELISA kitleri - VZV IgM ve VZV IgG için; ticari olarak piyasadan temin edilebilir. DFA kiti (antijen saptama için) - Floresan işaretlemiş monoklonal antikorlar ticari olarak piyasadan hazır temin edilebilir. PCR kiti - Piyasadan hazır temin edilebilen kitler vardır. Kullanılan testin özelliklerine göre ayrıca nükleik asit ekstraksiyon kiti ve PCR karışımları da piyasadan hazır temin edilebilir. Nükleik asit testleri laboratuvar yapımı reaksiyon karışımları ile de çalışılabilir. Bunun için amaca uygun primer dizileri temin edilmiş olmalıdır. İster hazır, iser laboratuvar yapımı olsun; PCR ile vahşi virüs için ORF 38 ve ORF 54 bölgeleri, aşı virüsü için ise ORF 62 bölgesi araştırılmalıdır. Bu yaklaşımla aşı suşuna bağlı komplikasyonların gösterilmesi de mümkündür. Bunun dışında hedef bölgeyi ORF 17, 29, 31, 62 ve 69 olarak öneren çalışmalar da vardır (3,7). VZV genotiplemesi yapılacaksa tanımlanan beş majör ve iki minör yedi genotipin saptanması için ORF21, ORF22 ve ORF50 gen bölgeleri araştırılmalıdır (7). Diğer gereç, donanım İmmunfloresan boyama (antijen saptama için) donanım; Floresan mikroskop (objektifler 40, 100 immersiyon; oküler 10) Seroloji gereç, donanım; ELISA okuyucu, yıkayıcı veya otomatize, yarı-otomatize EIA sistemleri PCR için donanım; En az üç ayrı oda - nükleik asit ekstraksiyonu, PCR karışımının hazırlanması, amplifikasyonun ve sonuç gözetiminin yapılabileceği ayrı odalar. İdeal olarak PCR karışımı hazırlama odası (temiz oda) pozitif basınçlı, agaroz jel elektroforezi yapılan oda (kirli oda) negatif basınçlı havalandırmaya sahip olmalıdır. Cihazlar – biyogüvenlik kabini, soğutmalı mikrosantrifüj, hassas terazi, vorteks, su banyosu, yatay çalkalayıcı, mikrodalga fırın, otomatize / yarı otomatize nükleik asit ekstraksiyon sistemleri, ve nükleik asit amplifikasyon cihazı, jel görüntüleme sistemi, elektroforez ünitesi vb. 2.4. Kalite kontrol Her testte iç kalite kontrol amacıyla en az bir pozitif ve bir negatif internal kalite kontrol serumu çalışmaya dahil edilir. Eksternal kalite kontrol testleri belirli aralıklarla çalışılarak sonuçları değerlendirilir. Nükleik asit testlerinde ekstraksiyonun ve amplifikasyonun verimliliği ve inhibitör olup olmadığını anlamak için, internal kontrol, izolasyon basamağından itibaren hasta örneği ile birlikte aynı reaksiyon tüpünde amplifiye edilmelidir. Ulusal Mikrobiyoloji Standartları Viroloji / Mikrobiyolojik Tanımlama / V-MT-09 / Sürüm: 1.1 / 01.01.2015 Sayfa 7 / 10 Suçiçeği 3 Suçiçeğinin tanısında kullanılan teknikler 3.1. Seroloji VZV IgM Diğer kit formatlarında duyarlılık ve özgüllükle ilgili sorunlar fazla olduğu için VZV capture-IgM ELISA önerilir. Özgül bir testtir. Ancak duyarlılık bunda da değişkendir (6). Rutin doğrulama için (özellikle önceden aşılanmış bireylerde) güvenilir bir metot değildir ancak pozitif sonuçlar akut/yeni enfeksiyonu düşündürür. Klinik bulguların yokluğunda pozitif IgM sonucu anlamlı kabul edilmez. Yüksek düzeyde IgG antikorlarının varlığında yalancı IgM sonuçları sorun yaratabilir. VZV IgG IgG antikorlarının gösterilmesinde çok çeşitli teknikler geliştirilmiştir. Bunlar ELISA, lateks aglütinasyonu (LA), IFA, gpELISA ve FAMA şeklinde sayılabilir. gpELISA ve FAMA, her ikisi de yüksek düzeyde duyalı ve özgül olmakla birlikte yaygın bulunmayan ya da ticari olarak her yerde hazır bulunamayan kitlerdir. FAMA ile membran antijenine karşı oluşan antikorlar saptanır. Bu yöntem aşıya bağlı serokonversiyonun izleminde yararlıdır (6). IFA’nın duyarlılığı ve özgüllüğü de yüksektir. LA 15 dakikada sonuç veren hızlı bir testtir; ELISA’dan daha duyarlı ancak daha az özgüldür. Yanlış pozitif sonuç verebilir. Daha çok tarama amaçları için kullanılır. Laboratuvarlarda en yaygın kullanılan IgG ELISA’dır. Özgüldür ancak duyarlılığı yüksek değildir. Tek serum örneğinde IgG pozitifliği saptanması geçirilmiş enfeksiyon veya aşıya bağlı bağışıklık düşündürür. Çift serum örneğinde IgG titrelerinde artışın gösterilmesinin –“geç tanı” anlamına geldiği için- klinik yararı sınırlıdır. Ancak, hastalığın özellikle atipik seyrettiği durumlarda tanı hastanın tedavisini yönlendireceği için değil ama ikinci bir -epidemiyolojik ilişkili- vakanın varlığında onun tanısının desteklenmesi amacıyla çift serum örneğinde IgG titrelerinin arttığının gösterilmesi anlamlıdır. Çift serum örneğinde (akut ve konvalesan faz serumları aynı testte çalışılmış olarak) VZV IgG ELISA ile; (a) serokonversiyon saptanmış ise (IgG akut faz örneğinde negatif iken konvalesan faz örneğinde pozitif ise) “kesin tanı” bulgusudur veya (b) 4 kat titre artışı saptanmış ise “kesin tanı” bulgusudur. Sayfa 8 / 10 Ulusal Mikrobiyoloji Standartları 01.01.2015 / Sürüm: 1.1 / V-MT-09 / Mikrobiyolojik Tanımlama / Viroloji Suçiçeği 3.2. Moleküler tanı Suçiçeği tanısında PCR öncelikle önerilen yöntemdir. Ancak gerektirdiği altyapı nedeniyle yaygın kullanılamayabilir. Serolojik tanını yeterli olmadığı durumlarda, atipik olgularda, santral sinir sistemi tutulumunda ve intrauterin tanıda gereklidir. VZV DNA örnekten PCR/gerçek zamanlı PCR yöntemleri ile araştırılır. Lezyondan alınan kurutlarda da VZV DNA’nın araştırılmalıdır (3,8). Pozitif sonuç kesin tanı koydurur. 3.3. Örneklerin, izolatların saklanması Serolojik testler için laboratuvara gelen örnekler en fazla 5 gün için +4°C'de saklanabilir. Bu süre içinde teste alınmayacaklarsa -20°C’de dondurulmamalıdır. Moleküler testler için gönderilmiş kuru örnekler oda sıcaklığında uzun süre stabil kalabildiği için birkaç hafta bu şekilde saklanabilir. Moleküler testler için gönderilmiş ıslak örnekler (BOS, diğer vücut sıvıları vb.) asla oda sıcaklığında saklanmaz. IgM pozitif örnekler laboratuvarda sonraki çalışmalarda iç kalite kontrol amacıyla kullanılmak üzere saklanır. Virüs DNA’sı pozitif bulunan örnekler ileri moleküler genotipleme analizi için -70°C'de tutulur. Dondurulmuş örneklerin tekrarlayan dondurma-çözme işleminden sakınılmalıdır. Bunun için örnekler mümkünse başlangıçta alikotlara ayrılarak saklamaya alınmalıdır. 4 Test sonuçlarının yorumu, raporlama, bildirim PCR veya gerçek-zamanlı PCR testi ile VZV DNA pozitifliği “kesin tanı” bulgusudur. En kısa sürede testi isteyen hekime bildirilmelidir. Klinik bulguların varlığında VZV IgM pozitifliği “kesin tanı” bulgusudur. En kısa sürede testi isteyen hekime bildirilmelidir. Yakın zaman önce yapılmış bir aşılama varsa aşıya bağlı IgM pozitifliği olabilir. IgM sınır değer bulunmuş ise 7-10 gün sonra yeni bir kan örneği ile test tekrarlanır. Akut enfeksiyonda VZV IgM bağışıklık sistemi baskılanmış hastada ve yeni doğanda/in-utero dönemde negatif veya düşük pozitif olabilir. Tek serum örneğinde VZV IgG pozitifliği sadece immüniteyi gösterir. VZV IgG sonucu rutin koşullarda raporlanabilir. Gebelikte şüpheli temas hikayesi varsa VZV IgM negatif ve VZV IgG testi pozitifse virüs ile daha önce karşılaşmayı gösterir. VZV IgM ve IgG negatifliğinde 7-10 gün sonra test yinelenir. Ulusal Mikrobiyoloji Standartları Viroloji / Mikrobiyolojik Tanımlama / V-MT-09 / Sürüm: 1.1 / 01.01.2015 Sayfa 9 / 10 Suçiçeği 5 Olası sorunlar/kısıtlılıklar Moleküler testler için örnek alırken her zaman sentetik (dakron ya da rayon uçlu) eküvyonlar tercih edilmelidir. Kalsiyum aljinatlı, pamuklu ve ahşap saplı eküvyon kullanılmamalıdır. PCR’da inhibitör etki yapabilirler (3,8). Döküntü tarihine göre uygun zaman diliminde alınmayan örneklerde (2-5 gün) pozitif sonuç saptanmasında sorun yaşanabilir. Örneklerin uygun zamanda alınması önemlidir. Hemolizli veya lipemik serum örnekleri antikor titrelerinin hatalı okunmasına neden olabilir. Bebeklerde VZV IgG antikorları 6-8 aya kadar maternal antikorlar olabilir. HSV enfeksiyonları VZV IgM ve IgG testlerinde çapraz reaksiyona neden olabilir. Kaynaklar 1 Bulaşıcı Hastalıkların İhbarı ve Bildirim Sistemi, Standart Tanı, Sürveyans ve Laboratuvar Rehberi, Sağlık Bakanlığı, Ankara. 2004. http://www.shsm.gov.tr/public/documents/legislation/bhkp/asi/bhibs/BulHastBilSistStanSurveLa bReh.pdf (erişim tarihi: 18.12.2013) 2 Bulaşıcı Hastalıklar Sürveyans ve Kontrol Esasları Yönetmeliğinde Değişiklik Yapılmasına Dair Yönetmelik. Resmi Gazete; 02.04.2011 – 27893. http://www.resmigazete.gov.tr/eskiler/2011/04/20110402-3.htm (son erişim tarihi: 06.01.2014) 3 Puchhammer-Stöckl E, Aberle SW. Varisella-zostervirus. In: Versalovic J, Carroll KC, Funke G, Jorgensen JH, Landry ML, Warnock DW (eds). Manual of Clinical Microbiology. 10th ed. ASM Press, Washington D.C. 2011, p. 1545-57. 4 CDC. Varicella. Epidemiology and Prevention of Vaccine-Preventable Diseases. The Pink Book: Course Textbook - 12th ed., Second printing, May 2012. http://www.cdc.gov/vaccines/pubs/pinkbook/varicella.html (son erişim tarihi: 06.01.2014) 5 Fölster-Holst R, Kreth HW. Viral exanthems in childhood – infectious (direct) exanthems. Part 2: Other viral exanthems J Dtsch Dermatol Ges 2009;7:414–8 6 CDC, Chapter 17: Varicella. Manual for the Surveillance of Vaccine-Preventable Diseases (5th ed., 2012). http://www.cdc.gov/vaccines/pubs/surv-manual/chpt17-varicella.html (son erişim tarihi: 06.01.2014) 7 Pahud BA, Glaser CA, Dekker CL, Arvin AM, Schmid DA. Varicella zoster disease of the central nerve system: epidemiological, clinical and laboratory features 10 years after the introduction of the varicella vaccine. J Infect Dis 2011;203(3):316-23. 8 CDC. Collecting specimens for varicella zoster virus (VZV) testing. http://www.cdc.gov/chickenpox/lab-testing/collecting-specimens.html (son erişim tarihi 18.12.2013) Sayfa 10 / 10 Ulusal Mikrobiyoloji Standartları 01.01.2015 / Sürüm: 1.1 / V-MT-09 / Mikrobiyolojik Tanımlama / Viroloji