SYBR GREEN PCR MASTER MĐKS

advertisement
SYBR GREEN PCR MASTER MĐKS - 2X
KATALOG NUMARALARI
TEST PROSEDÜRÜ
SNPSYBRS-2X (10 TEST)
•
12,5 µl Master miks
SNPSYBR1-2X (100 TEST)
•
Primerler (Forward ve revers primerin her birinden 10 pmol) (*)
SNPSYBR5-2X (500 TEST)
•
0,2 µl Enzim
•
Toplam DNA 1 – 5 µl DNA (1 – 100 ng) (*)
•
Toplam Hacim 25 µl olacak şekilde PCR Grade su ilave edilir.
GĐRĐŞ
•
Hafifçe pipetlenerek karıştırılır.
SYBR green PCR master miks, SYBR® Green I boyası içeren real-time
•
Tavsiye edilen PCR programı ile çalıştırılır.
PCR çalışmalarına uygun olarak hazırlanmış, kullanıma hazır bir
karışımdır. Tüm Real Time PCR cihazları ile kullanıma uygundur.
(*) Sistem içeriğine dahil değildir.
MĐKS PRENSĐBĐ
SYBR Green I boyası çift sarmal DNA’ nın küçük girintisine
UYARILAR
bağlanmaktadır. Bağlanmamış olan boya az miktarda fluoresans
yayarak, daha sonraki bilgisayar analizlerinden çıkartılan, minimum
arka fon fluoresans sinyalini oluşturmaktadır. Çoğaltılmış hedef DNA’ya
bağlanan SYBR Green I boyası ile elde edilen erime eğrisi sayesinde
•
Saklama koşullarına uygun olarak saklanmalıdır.
•
Oda sıcaklığında unutulmuş PCR master miskler kullanılmamalıdır.
•
PCR master miksi oda sıcaklığında tamamen eritilip, baş aşağı
edilerek hafifçe karıştırıldıktan sonra tüplere bölünmelidir.
spesifik hedef DNA’nın olup olmadığı analiz edilmektedir.
•
Master miksler tüplere bölündükten sonra Hot Start Taq DNA
Polimeraz ve DNA eklenerek hemen PCR işlemine geçilmelidir.
ÜRÜN ĐÇERĐĞĐ
Bileşen
• SYBR Green Master Miks (2X)
• Enzim
• PCR Grade Su
10 Test
150 µl
6 µl
500 µl
•
Belirtilenden fazla Hot Start Taq DNA Polimeraz koyulmamalıdır.
•
PCR master miksleri vücut içinde kullanıma uygun değildir. Sadece
In vitro kullanım içindir.
•
PCR master mikslerin raf ömrü etiket üzerinde belirtilmiştir.
Kullanmadan önce üretim tarihine dikkat edilmelidir.
SAKLAMA KOŞULLARI
•
Tüm bileşenler – 20°C de ve karanlıkta saklanmalıdır.
•
Tüm bileşenler, ürün kutusunun üzerinde belirtilen son kullanma
tarihine kadar kullanılabilir.
•
Sürekli eritip çözdürmek, ürünün hassasiyetinde azalmalara neden
olabilir.
TAVSĐYE EDĐLEN PCR PROGRAMI(*)
95 °C
10 dk.
95 °C
15 sn.
60 °C
1 dk.
35-45 döngü
(*) Çalışmaya göre değişebilir
NOT: Testi, “Melting Curve analizi” protokolünde çalışıp, pikleri analiz
edebilirsiniz.
Düzenlenme Tarihi: 12.03.2012
Download