SYBR GREEN PCR MASTER MĐKS - 2X KATALOG NUMARALARI TEST PROSEDÜRÜ SNPSYBRS-2X (10 TEST) • 12,5 µl Master miks SNPSYBR1-2X (100 TEST) • Primerler (Forward ve revers primerin her birinden 10 pmol) (*) SNPSYBR5-2X (500 TEST) • 0,2 µl Enzim • Toplam DNA 1 – 5 µl DNA (1 – 100 ng) (*) • Toplam Hacim 25 µl olacak şekilde PCR Grade su ilave edilir. GĐRĐŞ • Hafifçe pipetlenerek karıştırılır. SYBR green PCR master miks, SYBR® Green I boyası içeren real-time • Tavsiye edilen PCR programı ile çalıştırılır. PCR çalışmalarına uygun olarak hazırlanmış, kullanıma hazır bir karışımdır. Tüm Real Time PCR cihazları ile kullanıma uygundur. (*) Sistem içeriğine dahil değildir. MĐKS PRENSĐBĐ SYBR Green I boyası çift sarmal DNA’ nın küçük girintisine UYARILAR bağlanmaktadır. Bağlanmamış olan boya az miktarda fluoresans yayarak, daha sonraki bilgisayar analizlerinden çıkartılan, minimum arka fon fluoresans sinyalini oluşturmaktadır. Çoğaltılmış hedef DNA’ya bağlanan SYBR Green I boyası ile elde edilen erime eğrisi sayesinde • Saklama koşullarına uygun olarak saklanmalıdır. • Oda sıcaklığında unutulmuş PCR master miskler kullanılmamalıdır. • PCR master miksi oda sıcaklığında tamamen eritilip, baş aşağı edilerek hafifçe karıştırıldıktan sonra tüplere bölünmelidir. spesifik hedef DNA’nın olup olmadığı analiz edilmektedir. • Master miksler tüplere bölündükten sonra Hot Start Taq DNA Polimeraz ve DNA eklenerek hemen PCR işlemine geçilmelidir. ÜRÜN ĐÇERĐĞĐ Bileşen • SYBR Green Master Miks (2X) • Enzim • PCR Grade Su 10 Test 150 µl 6 µl 500 µl • Belirtilenden fazla Hot Start Taq DNA Polimeraz koyulmamalıdır. • PCR master miksleri vücut içinde kullanıma uygun değildir. Sadece In vitro kullanım içindir. • PCR master mikslerin raf ömrü etiket üzerinde belirtilmiştir. Kullanmadan önce üretim tarihine dikkat edilmelidir. SAKLAMA KOŞULLARI • Tüm bileşenler – 20°C de ve karanlıkta saklanmalıdır. • Tüm bileşenler, ürün kutusunun üzerinde belirtilen son kullanma tarihine kadar kullanılabilir. • Sürekli eritip çözdürmek, ürünün hassasiyetinde azalmalara neden olabilir. TAVSĐYE EDĐLEN PCR PROGRAMI(*) 95 °C 10 dk. 95 °C 15 sn. 60 °C 1 dk. 35-45 döngü (*) Çalışmaya göre değişebilir NOT: Testi, “Melting Curve analizi” protokolünde çalışıp, pikleri analiz edebilirsiniz. Düzenlenme Tarihi: 12.03.2012