Taq DNA Polimeraz

TAQ DNA POLĐMERAZ
Kat. No.
Unite
SNP 10X
A Buffer
SNP 10X
B Buffer
MgCl2 25 mM
SNPTQ-S
100
0,3 ml
0,3 ml
0,3 ml
SNPTQ-25
250
0,75 ml
0,75 ml
0,75 ml
SNPTQ-5
500
1,5 ml
1,5 ml
1,5 ml
SNPTQ-10
1000
2x 1,5 ml
2x 1,5 ml
2x 1,5 ml
SNPTQ-50
5000
15 ml
15 ml
15 ml
GĐRĐŞ
Notlar;
SNP Taq DNA Polimeraz, PCR ve diğer moleküler biyoloji uygulamalarında
•
oldukça yüksek aktivite gösteren, ısıya dayanıklı rekombinant bir Taq DNA
Polimerazdır. Enzim Thermus aquaticus’tan izole edilmiştir ve yaklaşık
bölümünden ayrı bir alanda hazırlanmalıdır.
•
olarak 94 kDa moleküler ağırlığa sahiptir. SNP Taq DNA polimeraz, 5’-3’
DNA polimeraz ve 5’-3’ exonuclease aktivitesine sahiptir.
PCR reaksiyon karışımı, DNA izolasyon ve PCR ürünlerinin analiz
SNP 10X Buffer B içerisinde 25 mM MgCl2 bulunmaktadır, 1X MgCl2
konsantrasyonu 2.5 mM dır.
•
Bazı çalışmalarda, en uygun sonuç için daha fazla miktarda MgCl2’e
ihtiyaç duyulmaktadır. Bu nedenle Buffer’lara ek olarak 25 mM MgCl2
ÜNĐTE TANIMI
verilmektedir.
Bir ünite; standart deneme koşullarında 10 nmol dNTP’yi 72ºC’de 30 dk’da
asit çöktürülebilir forma dönüştürecek şekilde kullanmayı tanımlamaktadır.
Konsantrasyonu 5000 unite / ml’ dir.
•
Aktivitesi 72 °C’ de 60 Nükleotid / Saniye uzamadır.
Enzim – 20 °C de ve karanlıkta saklanmalıdır.
•
Tavsiye edilen MgCl2 konsantrasyonu 1,5 mM - 6 mM arasıdır.
Bufferlar ve MgCl2 +4°C de ve/veya –20°C de karanlıkta saklanmalıdır.
•
Enzim 10 mM K-Phosphate (pH: 7.4) , 0.1 mM EDTA, % 50 Gliserol, %
SAKLAMA KOŞULLARI
•
•
ÜRÜN ÖZELLĐKLERĐ
•
0.1 Triton X-100, % 0.1 Tween 20 içerir.
•
ÖRNEK KULLANIM PROTOKOLÜ
SDS Elektroforezi saflık testi sonucu saflık oranı >% 95’ dir.
Bu protokol PCR çalışmalarının ilk denemelerinde yol gösterici olarak
kullanılabilir. Fakat inkübasyon süreleri, sıcaklık, kullanılacak DNA miktarı
gibi uygun reaksiyon koşulları, her çalışma için değişmekte ve çalışılan
SNP 10X A Buffer
MgCl2 içermeyen Amonyum Buffer.
bölgeye bağlı olarak farklı optimizasyonlar gerektirebilmektedir. Standart bir
PCR çalışması için gereken bileşenler, aşağıda belirtilen miktarlara uygun
SNP 10X B Buffer
25 mM MgCl2 içeren Amonyum Buffer.
olarak hazırlanmalıdır.
Sorularınız için, lütfen Ar-Ge bölümü ile temasa geçiniz. [email protected]
Bileşen
10X Buffer (A
veya B)
dNTP miks
MgCl2 *
Primer A
Primer B
Taq DNA
Polimeraz
Distile Su
DNA
Toplam Hacim
Hacim/Reaksiyon
5 µl
0.8 µl
Son
Konsantrasyon
1X
UYARILAR
0.2 mM her bir
dNTP için
1,5 mM – 6 mM
0.1-1 µM
0.1-1 µM
1-5 ünite
Oda sıcaklığında unutulmuş bileşenler kullanılmamalıdır.
•
Bileşenler eğer dondurulmuşsa, oda sıcaklığında tamamen eritilip, baş aşağı
•
Belirtilenden fazla Taq DNA Polimeraz kullanımı sorunlara yol açabilir.
•
Taq DNA Polimeraz vücut içinde kullanıma uygun değildir. Sadece in vitro
laboratuar kullanımı içindir.
•
50 µl
eritiniz.
Belirli
bölgelerde
yoğunlaşan
tuz
konsantrasyonlarının eşit şekilde dağılması için solüsyonların çözünmesi ve
karıştırılması önem taşımaktadır.
Taq DNA Polimerazın raf ömrü etikette belirtilmiştir. Tarihi geçen ürün
kullanılmamalıdır.
Kullanılacak 10X Buffer A veya 10X Buffer B, 25 mM MgCl2, dNTP, ve
solüsyonlarını
Saklama koşullarına uygun olarak saklanmalıdır.
•
edilerek hafifçe karıştırıldıktan sonra kullanılmalıdır.
(*) Kullanılan buffer 10X Buffer B ise, MgCl2 gerekmeyebilir.
primer
•
Düzenleme Tarihi: 12.03.2012