RIDASCREEN® Cryptosporidium
advertisement
RIDASCREEN® Cryptosporidium Makale no: C 1201 R-Biopharm AG, Landwehrstr. 54, D-64293 Darmstadt, Germany Tel: +49 (0) 61 51 81 02-0 / Fax: +49 (0) 61 51 81 02-20 Χ 1. Kullanım amacı in vitro diyagnostik kullanım içindir.RIDASCREEN® Cryptosporidium testi ELISA testi olup gaitada Cryptosporidium parvum tespiti için kullanılır. 2. Özet ve testin açıklaması Cryptosporidium parvum hayvanlarda çok görülen bir parasit olup özellikle evcil hayvanlarda önemli patojen bir organizmadır ve calve hastalığında görülür. Çoğu ülkelerde, insanlarda enfastasyon gözlemlenir, bu günlerde eskiden olduğundan daha fazladır. Tropik bölgelerde olan gelişmekteki ülkelerde, parasitler sıklıkla endemik ve çocuklar arasında epidemik diareye sebep olur. İmmunokompetent hastalarda, hastalık kendi kendini gösterir, kendiliğinden gastroenterit iyileşmesi gibi. Diare 3-10 gün sürer ve ateş,gastrointestinal semptomlar örn. Kusma ve ağrı gibi,devam eder bu konuda Giardiasise benzerlik gösterir. Semptomlar ve etkiler aslında immunoinkompetent hastalarda daha daha ciddidir ve ısrarla dinmeyen isal görülür. İnfestasyon, hayvanlardan insanlara kontamine olmuş su ile ve insandan insana geçer. Komünal fasilitelerin üyeleri, anaokulu çocukları ve yüksek risk grupları, homoseksüel erkekler, HIV hastaları yüksek risk taşır. Geçmişte, cryptosporidiosis tespiti için kullanılan metot, Oocystin gaitaya ve ince bağırsaktan alınan biyopsiye mikroskobik incelemesiydi ve deneyimli eleman gerektiriyordu. Bu metoda alternatif metot, hızlı immunokromatogrif test tanımlandı. Bu test monoklonal antikorlar kullanır, mikroskobik prosedüre eşdeğer hassasiyet ve özgüllüktedir. Cryptosporidium ELISA antijen testi gaita numuneleri için mikroskopi kadar hassas bir metottur.Testi uygulamak için parasitoloji bilgisi olan deneyimli bir personel gerektirmez. Test hızlı ve basittir. Gaitada organizmanın tam organizmanın varlığına dayanmaz. 3. Test prensibi RIDASCREEN® Cryptosporidium testi, spesifik antikorları sandviç metodunda kullanılır. Cryptosporidium parvumantijenine karşı oluşan Cryptosporidium-spesifik antikorlar kuyucukların çeperine kaplanır.Gaita süspansiyonu ve kontroller kuyucuklara pipetlenir.Daha sonra peroksidaz bağlı Cryptosporidium parvum antijenine karşı konjugatlı antikorlar eklenir ve pleyt oda sıcaklığında (20 – 25 °C) inkübe edilir. Cryptosporidium antijenleri ve konjuge edilmiş antikorlarla ,Cryptosporidium antijeni varlığında sandviç kompleks oluşur ve harekesizlenmiş antikorlar içerir. Bağlanmayan enzim etiketli antikorlar yıkama basamağında uzaklaştırılır. Substrat eklendikten sonra , bağlanan enzimler daha önce renksiz olan solüsyonun rengini maviye dönüştürür , eğer test pozitif ise.Stop RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 2 solüsyonu eklendiğinde maviden sarıya dönüşür.Oluşan rengin şiddeti Cryptosporidium antijeni konsantarasyonu ile doğru orantılıdır. 4. Sağlanan Reaktifler Bir pakette 96 teste yetecek kadar reaktif içerir. Pleyt 96 test Mikrokuyucuklu pleyt, 12 mik rokuyucuklu strip (kırılabilir) strip tutucu; Cryptosporidium karşı monoklonal antikor (fare) ile kaplı Diluent ⎮1 100 ml Numune-dilüsyon buffer, protein-buffer NaCl solüsyonu;% 0.1 Kathon; kulanıma hazırdır; mavi renkli Yıkama 100 ml Yıkama bufer, fosfat bufer NaCl solüsyonu (10-kat konsantre); %0.1 Thimerosal içerir Kontrol ⎮+ 1.8 ml İnaktive edilmiş Cryptosporidium antijenleri, kullanıma hazırdır; Konjugat 10 ml Peroksidaz -konjugat antikor , stabilize edilmiş protein solüsyonunun içinde ; %0.1 Kathon içerir; kullanıma hazır,mavi renkli Substrat 10 ml Üre peroksidaz/TMB; kullanıma hazır Stop reaktifi, 1 N sülfürik asit kullanıma hazır 6 ml Stop 5. Saklama gereklilikleri Tüm reaktifler 2 – 8 °C de saklanabilir ve etiketin üzerinde basılı tarih kadar kullanılabilir. Dilüe edilen yıkama solüsyonu 2 – 8 °C de saklanır. Maksimum 4 hafta kullanılabilir.Mikrobiyal kontaminasyona mutlaka önlenmelidir. Miadı geçtikten sonra kalite garantisi geçerli değildir. Alüminyum çanta kilidinden açılmalı , kilit yırtılmamalı. Kullanılmayan kuyucular çantanın içine geri konulmalıdır ve 2 – 8 °C’de inkübe edilmelidir. Renksiz substrat, bozulmasını engellemek ya da okside olarak mavi renge dönüşmesinin önüne geçmek için , direk olarak gün ışığından korunarak saklanmalıdır. Açılan substrat mavi renge dönerse kullanılmamalıdır 6. Ek olarak gerekli reaktifler ve ekipmanlar 6.1. Reaktifler - Distile ya da deiyonize su 6.2. Aksesuarlar RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 3 - Test tüpleri Tek kullanımlık pipetler (Makale no: Z 0001) Vorteks mikser (opsiyonel, Bölüm9.3. bakınız) Mikropipet 50 -100 µl ve 1 ml hacim çekebilen Mezür (1000 ml) Saat Mikropleyt yıkayıcı (300 µl) Mikropleyt okuyucu (450 nm ve referans filtre ≥ 600 nm ) Filtre kağıdı (laboratuvar havlusu) %0.5 hipoklorit solüsyonu içeren atık kabı 7. Kullanıcılar için önlemler Sadece in vitro diyagnostik kullanım içindir. Mutlaka eğitimli bir personel tarafından kullanılmalıdır.Medikal laboratuvar çalışanları için olan rehber takip edilmeli ve oradaki direktiflere tamamen uyulmalıdır. Kitte bulunan pozitif kontroller inaktive edilmiş maymun Cryptosporidium içerir. Buna rağmen kontroller ve numuneler mutlaka enfekte materyal gibi, ulusal güvenlik kurallarına göre muamele görmelidir. Numuneler ya da reaktifler ağız ile pipetlememeli ve yaralı deriyle, mukoz membran ile teması önlemelidir. Numuneler , eldiven giyilerek çalışılmalı ve test bittiği zaman eller yıkanmalıdır. Numuneler veya reaktifler ile çalışırken sigara içmeyiniz, yemek yiyip içmeyiniz. Numune dilüsyon buffer, konjugat ve koruyucu olarak % 0.1 Kathon içerir. Bu madde deri veya mukoz membran ile temas edilmesine müsaade edilmemelidir. Yıkama buferı koruyucu olarak, %0.1 Thrimesorol içerir. Deri ve mukoz membran bu madde ile temas ettirilmemelidir. Üre peroksidaz yanmaya sebep olur.Dikkatli kullanınız. Stop reaktifi 1 N sülfirik asit içerir. Deri ve elbiselerinizi koruyunuz. Eğer deriye temas ederse bol su ile yıkayınız. Tüm reaktiflere ve materyallere, enfeksiyon kapma riski olan numuneler gibi davranılmalı ve uygun bir dezenfektan veya otoklav ile 121 °C’de en az 1 saat dezenfekte edilmelidir. RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 4 DİKKAT: Zehirli gazların oluşumunu önlemek için ,stop reaktifi içeren her atık sıvı hipoklorit solüsyonu eklemeden önce nötralize edilmelidir. 8. Numune toplama ve saklama Gaita numuneleri hiçbir katkı maddesi olmayan temiz bir kaba konmalıdır ve test başlamadan önce 2 – 8 °C de bekletilmelidir.Eğer 3 günden fazla saklamak gerekiyorsa,numuneler –20 °C’de saklanmalıdır. Bu durumda da numuneler test edilmeden önce oda ısısında tamamen çözülmelidir. Tekrar tekrar çözüp dondurmaktan kaçınılmalıdır. Gaita numunesi ve rektal swap taşıma konteynır ile toplanmalıdır, bu transport medyanın içinde koruyucular, hayvan serumu, metal iyonları, oksitleme ajanı ya da deterjan içerir bunlarda RIDASCREEN® Cryptosporidium testine olumsuz etki yapabilir. Eğer rektal swap kullanıldıysa, test için , yeteri kadar gaita (yaklaşık 100 mg) alındığından emin olunuz. 9. Test prosedürü 9.1. Genel bilgi Tüm reaktifler ve mikropleyt Pleyt kullanmadan önce oda sıcaklığına getirilmeli (20 – 25 °C) Kuyucuklar oda sıcaklığına gelene kadar alüminyum çantadan çıkarılmamalıdır.Reaktifler kullanılmadan önce karıştırılmalıdır.Kullanılmayan kuyucuklar ve reaktifler 2 – 8 °C ‘de saklanmalıdır.Kullanılan kuyucuklar tekrar kullanılmamalıdır.Zarar görmüş paketteki malzemeler kullanılmamalıdır. Çapraz reaksiyonu önlemek için, numunelerin kit komponentleri ile temasından sakınılmalıdır.Test direk olarak gün ışığına maruz kalmamalıdır. Kuyucuğun üzerini kapatmanızı ya da üzerine film geçirerek sarmanızı ve böylece buharlaşma kayıplarını engellemenizi tavsiye ederiz. 9.2. Yıkama buferı hazırlama 1 hacim yıkama konsantre bufer ile Yıkama 9 hacim distile suyu karıştırın. Yıkama bufer içinde olan herhangi bir kristalleşme varsa kullanmadan önce 37 °C’de su banyosunda çözülerek kullanılmalıdır. 9.3. Numune hazırlama 1 ml RIDASCREEN® numune dilüsyon buferı Diluent | 1 etiketlediğiniz test tüpüne koyunuz. Tek kullanımlık pipet ile gaitayı çekiniz.(Makale no: Z 0001) yaklaşık olarak 100 µl ikinci işareti RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 5 geçene kadar.Numune dilüsyon bufer içine koyunuz.Katı gaitalar için , yaklaşık olarak 50 - 100 mg kadar spatül ile alınır ve numune dilüenti bufer içine bırakılır.Gaita süspansiyonunu pipetle çekip bırakarak ya da alternatif olarak mikser veya Vorteks ile karıştırınız.Kısa bir süre partiküllerin çökmesi için bekletilir. Temiz süpernatant kullanılır.Eğer test prosedürü ELISA cihazında çalışılacaksa mutlaka süpernatantın temiz olması gerekir.Bu durumda ,numuneyi 5000 rpm’ de (yaklaşık olarak. 2300 - 2500 g) 5 dakika boyunca santrifüj edilmelidir. 9.4. İlk İnkübasyon Yeteri kadar kuyucuk çalışma çerçevesine yerleştirildikten sonra 2 damla (100 µl) pozitif kontrol Kontrol ⎮+, numune dilüsyon buferı Diluent ⎮1 (= negatif kontrol) ve numune süspansiyonu kuyucuklara konur.Sonra üzerine, 2 damla (100 µl) enzim-konjugat antikor Konjugat konur ve karıştırılır, oda sıcaklığında (20 – 25 °C) de 60 dakika inkübasyona bırakılır. 9.5. Yıkama Yıkamada tamamen direktiflere uymak doğru sonuç elde etmek için çok önemlidir. Kuyucuklarda inkübe edilen madde mutlaka dezenfeksiyon için hipoklorit içeren atık kabına atılmalıdır. Bundan sonra , kalan damlaları için emici bir kağıt üzerinde vurarak alınız.Bundan sonra her seferinde 300 µl olmak üzere , yıkama bufer ile 5 defa yıkayınız.Her yıkamadan sonra her yıkamadan sonra, emici kağıda vurarak kalan damlalar emdirilir. ELISA yıkayıcı kullanıyorsanız, cihazın mikropleyt tipine uygun olduğu kontrol edin.Daha da ötesi partiküle sahip olan numune süspansiyonu pipetlenmiş ise ilk yıkama manuel olarak yapılmalıdır, yoksa yıkayıcının uçlarını tıkayabilir. Aynı zamanda yıkama işleminde tüm sıvının emildiğinden emin olunuz.Her yıkamadan sonra kalan damlaları absorbe edecek bir kağıda veya havluya emdiriniz.Optimum yıkama sonucunu elde etmek için kuyucuk başına en az 600 μl yıkama buffer kullanılması önerilir.Yıkama sayısı daha iyi sonuç elde etmek için 5 den fazla yapılabilir. 9.6. İkinci İnkübasyon Her kuyucuğa 2 damla (100 μl) substrat Substrat eklenir.Daha sonra karanlıkta oda sıcaklığında (20 - 25 °C) 15 dakika inkübe edilir.Her kuyucuğa, bir damla (50 µl) stop reaktifi Stop eklenerek reaksiyon bitirilir.Dikkatlice karıştırılır.(yavaşça pleytin kenarını çarparak karıştırınız.) Oluşan rengi 450 nm ‘de okuyunuz.Referans filtre olarak ≥ 600 nm (opsiyonel) kullanılır. Sonra mikropleyt olmadan havaya karşı kalibre ediniz. Not: Yüksek pozitif numuneler,substratı siyah sediment olarak çöktürebilir. RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 6 10. Kalite Kontrol – reaktifin miadı Kalite kontrol amacı için, negatif ve pozitif numune çalışılır; testin doğru çalıştığından ve reaktiflerin stabilitesinden emin olunur.Negatif kontrol (O.D.) 450 nm’de < 0.2 ise ve pozitif kontrol > 0.8 at 450 nm doğru çalışılmıştır. Eğer negatif kontrol >0.2 ise yıkamanın yetersiz olduğunu ifade eder.Eğer bulunan değerler beklenenlerden farklı ise ve substratta bulanıklık varsa ya da maviye dönüşmüş ise reaktifin eskidiğini gösterebilir. Şart koşulan değerlerle sonuçlar çakışmazsa , test tekrar edilmeden önce aşağıdaki noktalar kontrol edilmelidir: − Kullanılan reaktiflerin miadı − Kullanılan ekipmanların fonksiyonları(örn:kalibrasyon) − Test prosedürünü kontrol edin − Kit kontaminasyonuna yönelik akma veya herhangi bir gözle görülen bir bozulma – substrat maviye dönmüş olmamalıdır. Bunlardan emin olduktan sonra, yeni kaset ile testi tekrar ettiğinizde , eğer kontrol bandı görünür değilse, lütfen üretici ya da R-Biopharm distirübitör ile kontak kurunuz. 11. Değerlendirme ve yorumlama 11.1. cut-off hesaplama Cut-off oluşturmak için, 0.15 O.D. negatif kontrolün O.D. sine eklenir. Cut-off = negatif kontrol O:D: + 0.15 11.2. Test sonucu Cut off değerinden % 10 da yüksek O.D. ye sahip numuneler pozitif olarak değerlendirilir. Eğer sonuç Cut -fof değerinin % ± 10 arasında ise şüpheli olarak değerlendirilir.Eğer testin tekrarı da gri zonda çıkarsa numune negatif olarak değerlendirilmelidir. Cut off değerinin %10 altında çıkan değerler ise negatif olarak değerlendirilir. RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 7 12. Metot Limitleri RIDASCREEN® Cryptosporidium testi gaitadaki Cryptosporidium parvum antijenlerini tespit eder. Testin şiddeti, klinik semptomların şiddetini ortaya çıkarmak için kullanılamaz. Sonuçlar klinik tablo ile birlikte yorumlanmalıdır. Test spesifik görünür bantların şiddeti ile klinik semptomların şiddetini ortaya çıkarmak için kullanılamaz. Sonuçlar klinik tablo ile birlikte yorumlanmalıdır. Pozitif sonuçlar, diğer enfekte patojenlerin varlığını dışlamaz. Negatif sonuçlar Cryptosporidium enfeksiyonu olmadığını göstermez Bu enfeksiyon aralıklı olarak salgılanan patojenler ya da numune olan çok küçük miktardaki patojenler tarafından olabilir.Eğer hasta anemik ya da aran patojen tarafından enfekte olduğu şüphesi varsa bir başka gaita numunesi alınarak test tekrar edilmelidir. Şüpheli sonuçlara sebep gaitada virüslerin homojen dağılımında olmamasından kaynaklanabilir. Eğer bu olursa, aynı numuneden ikinci bir süspansiyon hazırlanıp test edilmelidir. 13. Performans karakterleri 13.1. Test kalitesi Klinik çalışmada , RIDASCREEN® Cryptosporidium testi toplam 276 gaita numunesi ile çalışıldı. Munih, Almanya’da 1999-2000 yılları arasında yurt dışı seyahatten dönen ve çeşitli şikayetleri olan Alman uyruklu poliklinik hastaları test edildi.Tüm numuneler mikroskop( demir hemaoksilin ve SAF zenginleştirme) altında yumurtalar ve parasitler iki deneyimli mikrobiyolojist tarafından 10 ar dakika incelendi. Numuneler gelir gelmez donduruldu ve çözüldükten sonra ELISA kiti ile üreticinin direktiflerine göre çalışıldı.Test diğer intestinal parasitlere karşı çapraz bir reaksiyon vermedi. Sonuçlar Tablo 1 de listelendi. RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 8 Tablo 1: RIDASCREEN® Mikroskopi sonuçları Cryptosporidium ELISA testi sonuçları ve Mikroskopi ® RIDASCREEN Cryptosporidium Hassasiyet Özgüllük PPW NPW pozitif negatif pozitif 9 7 negatif 0 260 100,0 97.3 56.2 100.0 % % % % 13.2. Çapraz Reaksiyon İntestinal yolun diğer patojenik organizmaları RIDASCREEN® Cryptosporidium testi ile test edildi ve çapraz bir reaksiyon görülmedi.Araştırmalar bakteri süpansiyonu ile yapıldı. Bu süspansiyon BHI da bir gece bekletilip çift olarak çalışıldı. Süspansiyonun konsantrasyonu 106 108 patojen/ml. 450 nm’de okutuldu. Sonuçlar Tablo 2’dedir. Tablo 2: Patojenik mikro-organizmalar ile çapraz reaksiyon Jerm Testi Orijin Acinetobacter lwoffii DSM 2403 Aeromonas hydrophilia anaerogenes DSM 30022 Sonuç pozitif Süspansiyon 0.196 Aeromonas hydrophilia hydrophilia DSM 30016 negatif negatif Citrobacter freundii DSM 30047 negatif -0.009 Citrobacter freundii DSM 30039 negatif -0.007 Enterobacter cloacae DSM 30054 negatif -0.007 Enterococcus faecalis DSM 2570 negatif -0.003 Enterococcus faecium DSM 20477 negatif 0.113 Escherichia coli negatif -0.004 Escherichia coli izole izole negatif -0.009 Escherichia coli izole negatif -0.008 Escherichia hermannii DSM 4560 negatif -0.007 Lactococcus lactis DSM 20481 negatif -0.007 Listeria innocua SLCC 5639 negatif -0.010 Proteus mirabilis DSM 788 negatif -0.006 Proteus mirabilis DSM 4479 negatif -0.003 Proteus vulgaris DSM 30119 negatif -0.006 Providencia stuartii DSM 6676 negatif -0.008 DSM 939 negatif -0.001 Pseudomonas arruginosa RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 -0.009 -0.007 9 Pseudomonas fluorescens DSM 4358 negatif -0.009 Pseudomonas fluorescens DSM 50124 negatif -0.006 Pseudomonas putida DSM 291 negatif -0.009 Salmonella agona izole negatif -0.005 Salmonella cholerasuis DSM 4224 negatif -0.005 -0.006 Salmonella Ohio izole izole negatif negatif -0.009 Salmonella typhimurium izole negatif -0.008 Serratia proteamaculans DSM 4487 negatif -0.007 Shigella flexneri DSM 4782 negatif -0.008 Shigella sonnei DSM 5570 negatif -0.01 Staphylococcus aureus negatif negatif -0.005 Streptococcus agalactiae DSM 20372 izole -0.005 Streptococcus dysgalactiae izole negatif -0.003 Streptococcus uberis izole negatif 0.134 Escherichia coli (O157:H-) izole negatif -0.010 Escherichia coli (O116:H21) izole negatif -0.009 Escherichia coli (O111:H-) izole negatif -0.007 Escherichia coli (O26:H8) izole negatif -0.007 Salmonella infantis Negatif kontrol BHI -0.006 Pozitif kontrol test kit 1.524 Cut-off 0.144 Orijin Candida albicans Sonuç Süspansiyon 0.003 Salmonella enteritidis ATCC 10231 negatif negatif DSM 9898 Campylobacter jejuni DSM 4688 negatif 0.001 Campylobacter coli DSM 4689 negatif 0.002 DSM 5361 DSM 6675 negatif 0.001 negatif 0.0 Campylobacter fetus Morganella morganii 0.002 Pozitif kontrol 3.517 Negatif kontrol 0.001 Cut-off 0.151 RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 10 13.3. Solcan yumurtası ve parazitleri ile çapraz reaksiyon Farklı gaita numuneleri (1/10 dilüsyon) mikroskobik olarak ve ELISA ile test edildi.Sonuçlar Tablo 3 deki listededir. Tablo 3: Solcan yumurtaları ve parazitlerle çapraz reaksiyon Mikroskopta bulunanlar RIDASCREEN® Cryptosporidium Eggs of Schistosoma mansoni Eggs of Taenia solium negatif negatif Eggs of Trichuris trichiura negatif Eggs of Ascaris lumbricoides negatif Eggs of Enterobius vermicularis negatif Eggs of Hymenolepis nana negatif Eggs of Ankylostoma duodenale negatif Cysts of Entamoeba coli negatif Cysts of Entamoeba hartmanni negatif Cysts of Entamoeba histolytica negatif Cysts of Iodamoeba bütschlii negatif Cysts of Blastocystis hominis negatif Cysts of Giardia lamblia negatif 13.4. Presizyon Intra-test 22 parti kit kontrolü ile (pozitif kontroller ve negatif kontroller) ve bir yüksek (HPR) orta (MPR) ve düşük pozitif (LPR) Cryptosporidium parvum gaita numunesi test edildi.Sonuçlar Tablo 4’de listelendi. Tablo4: Intra-test HPR MPR LPR Negatif kontrol MW (OD) 1.968 1.089 0.481 0.045 SD 0.132 0.065 0.025 0.002 CV % 6.7 5.9 5.1 4.9 RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 11 The inter-test, 6 parti kontroller ve numuneler belirlenen 5 günde , aynı tek bir lottan 5 farklı kit ile çalışıldı. Sonuçlar Tablo 5’de dir. Tablo 5: Inter-test HPR MPR LPR Negatif kontrol MW (OD) 2.208 1.222 0.570 0.066 SD 0.068 0.067 0.039 0.005 CV % 3.08 5.49 6.89 7.75 RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 12 Referanslar 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Clavel, A.: Evaluation of the optimal number of fecal specimens in the diagnosis of cryptosporidiosis in AIDS and immunocompetent patients. Eur. Journal Clin. Microbiol. Infect. Dis. 14, 46-49 (1995). Current, W. L., Garcia, L. S.: Cryptosporidiosis. Clinics in Laboratory Medicine 11 (No. 4), 873 - 895 (1991). Current, W. L., Garcia, L. S.: Cryptosporidiosis. Clin. Microbiol. Rev. 4 (No. 3), 325 - 358 (1991). Flanigan, T. P.: Human immunodifeciency virus infection and cryptosporidiosis: Protective immune responses. Am. J. Trop. Med. Hyg. 50 (5) Suppl., 29 - 35 (1994). Guarino, A. et al.: Human intestinal cryptosporidiosis: secretory diarrhea and enterotoxic activity in Caco-2 cells. J. Infect. Dis. 171, 976 - 983 (1995). Hayes, E. B. et al.: Large community outbreak of cryptosporidiosis due to contamination of a filtered public water supply. New. Engl. J. Med. 320 (No. 21), 1372 - 1376 (1989). Le Chevallier, M. W. et al.: Giardia and Cryptosporidium spp. in filtered drinking water supplies. Appl. Environ. Microbiol. 57 (No. 9), 2617 - 2621 (1991). Mc. Anulty, J. M. et al.: A community wide outbreak of cryptosporidiosis associated with swimming at a wave pool. Jama 272 (No. 20), 1597 - 1600 (1994). RIDASCREEN® Cryptosporidium 04-11-26 13
