AMİNO ASİT SPESİFİK İNHİBİTÖRLER VARLIĞINDA Esherichia coli

XIII. Ulusal Kimya Kongresi, Samsun, 1999
S-0303
AMİNO ASİT SPESİFİK İNHİBİTÖRLER VARLIĞINDA Esherichia coli
ATCC 11105 den ELDE EDİLEN PENİSİLİN G ASİLAZIN
İNAKTİVASYON KİNETİĞİNİN İNCELENMESİ
KAZAN , D.‘ andERARSLAN., Aw
1TÜBİTAK, Marmara Araştırma Merkezi, Gen Mühendisliği ve Biyoteknoîoji Araştırma Enstitüsü,
P.K: 21,41470 Gebze-Kocaeli,
^Kocaeli Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Kimya Bölümü,
41300 Îzmit-Kocaeli
(\JJU
f î '/JC
l TjT
jl
Penisilin G asilaz, penisilin G ve sefalosporin G‘nin hidroliz reaksiyonunu
katalizleyen endüstriyel bir enzimdir. Hidroliz reaksiyonunda oluşan 6-amino penisilİanik
asit (6-APA) ve 7-amino-3-deasetoksisefalosporanik asit sentetik penisilinlerin
üretiminde kullanılan önemli ara ürünlerdir. Bu çalışmada Esherichia coli ATCC 11105
den türetilen bir mutant suştan elde edilen penisilin G asilaz (PGA) amino asit spesifik
inhibitörler ile modifiye edilmiştir. PGA, inhibitörlerin değişik konsantrasyonlarında ve
değişik sürelerde 40°C sabit sıcaklıkta ve pH 8.0 inkübe edildiğinde, birinci dereceden
kinetiğe uygun olacak şekilde irreversibl olarak inaktive olmuştur. Kullanılan inhibitörler
sırası ile serin spesifik fenilmetansulfonilflorid, aıjinİn spesifik fenilglioksal ve 2-3
butandion, histidin spesifik tosil-L-lizin kîorometil keton, tosil-L-fenilalaninklorometil
keton, triptofan spesifik N-bromo süksinimid ve lİzin spesifik etil asetamiddir. Enzimin
inhibitörler varlığında inaktivasyon hız sabitleri, onların pH’dan olan etkileşimleri,
optimal pH değerleri, Km, Vmve k ^ değerleri belirlenmiştir.