04. Burak Tangurek
advertisement
Türk Kardiyol Dern Arfl - Arch Turk Soc Cardiol 2005;33(8):467-472 467 Endotelyal nitrik oksit sentetaz (eNOS) gen polimorfizminin (T-786 C) koroner arter hastal›¤› ile iliflkisi The relationship between endothelial nitric oxide synthase gene polymorphism (T-786 C) and coronary artery disease in a Turkish population Dr. Burak Tangürek,1 Dr. Nihat Özer,1 Dr. Nurten Sayar,1 Dr. Sait Terzi,1 Dr. Hale Yaka Y›lmaz,1 Dr. Recep Asiltürk,1 Dr. Hüseyin Aksu,1 Dr. Figen Çilo¤lu,2 Dr. fiükrü Aksoy,1 Dr. Ayd›n Ça¤›l1 1 Dr. Siyami Ersek Gö¤üs Kalp ve Damar Cerrahisi Merkezi Kardiyoloji Bölümü, ‹stanbul; 2 Genlab Genetik Araflt›rma Laboratuvar›, ‹stanbul Amaç: Endotelyal nitrik oksit sentetaz (eNOS) genindeki mutasyonlar›n koroner arter hastal›¤› (KAH), miyokard infarktüsü ve hipertansiyon için risk faktörü olabilece¤i gösterilmifltir. Çal›flmam›zda eNOS gen polimorfizminin (T-786 C) koroner arter hastal›¤› ile iliflkisi araflt›r›ld›. Objectives: It has been shown that mutations in the endothelial nitric oxide synthase (eNOS) gene are associated with an increased risk for coronary artery disease (CAD), myocardial infarction, and hypertension. We investigated the association of eNOS gene polymorphism (T-786 C) with coronary artery disease in a Turkish population. Çal›flma plan›: Araflt›rmaya koroner anjiyografi yap›lan 211 hasta (144 erkek, 67 kad›n; ort. yafl 59; da¤›l›m 2785) al›nd›. Anjiyografide 159 olguda (%75.4) KAH saptand› (en az bir damarda %50 veya daha fazla daralma), 52’sinde (%24.6) KAH yoktu. Koroner arter hastalar›, tutulan damar say›s›na göre ayr›ld›. Genotipleme için polimeraz zincir reaksiyonu yöntemi kullan›ld›. Ba¤›ms›z risk faktörleri çokde¤iflkenli lojistik regresyon analiziyle araflt›r›ld›. Study design: The study included 211 patients (144 males, 67 females, mean age 59 years; range 27 to 85 years) who underwent coronary angiography. While 159 patients (75.4%) had angiographically shown CAD (≥50% stenosis at least in one vessel), 52 subjects (24.6%) were free of the disease. Those with CAD were classified according to the number of vessels affected. Polymerase chain reaction was used for genotyping. Risk factors for CAD were analyzed by a multivariate logistic regression analysis. Bulgular: Genotip ve allel da¤›l›m› iki grup aras›nda anlaml› farkl›l›k gösterdi (p<0.05). Üç damar hastalar›nda da CC genotipi daha fazlayd› (p<0.001). Koroner arter hastalar›nda (p<0.01) ve üç damar hastalar›nda (p<0.001) en az bir C alleli (TC+CC, C dominant model) tafl›yanlar TT homozigot bireylere göre daha fazlayd›. ‹ki grup allel da¤›l›m› (T ve C, aditif model) aç›s›ndan karfl›laflt›r›ld›¤›nda, C allelli (sitozin) T (timidin) alleline göre KAH’de daha s›k idi (p<0.05). Lojistik regresyon analizi, C dominant bireylerde KAH’nin 2.9 kat fazla oldu¤unu gösterdi (odds oran› 2.902, %95 güven aral›¤› 1.272-6.622; p<0.05). Results: Genotypical and allelic distribution significantly differed between the two groups (p<0.05). The CC genotype was more prevalent in patients with three-vessel disease (p<0.001). Compared with TT homozygotes, the number of patients carrying at least one C allele (TC+CC, C dominant model) was significantly higher among CAD patients (p<0.01) and in those with three-vessel disease (p<0.001). With respect to allelic distribution (T vs C, additive model), the frequency of the C (cytosine) allele was higher in CAD (p<0.05). Multivariate logistic regression showed that Cdominant individuals had a 2.9-fold likelihood for CAD (odds ratio 2.902, 95% confidence interval 1.272-6.622; p<0.05). Sonuç: Bulgular›m›z, eNOS T-786 C gen polimorfizminin ülkemizde KAH varl›¤› ve yayg›nl›¤› için bir risk faktörü olarak de¤erlendirilebilece¤ini göstermektedir. Conclusion: Our data suggest that the T-786 C polymorphism of the eNOS gene may be involved as a risk factor in the prevalence of CAD in Turkish patients. Anahtar sözcükler: Allel; koroner hastal›k/genetik; DNA/analiz; genetik predispozisyon; genotip; mutasyon; nitrik oksit sentaz/genetik; polimorfizm, genetik; risk faktörü. Key words: Alleles; coronary disease/genetics; DNA/analysis; genetic predisposition to disease; genotype; mutation; nitric oxide synthase/genetics; polymorphism, genetic; risk factors. Gelifl tarihi: 07.07.2005 Kabul tarihi: 22.11.2005 Yaz›flma adresi: Dr. Burak Tangürek. K›s›kl› Mah., Alemda¤ Cad., Yanyol R›fat Bey Sok., Ayd›n Apt., No: 29/25, 34668 Üsküdar, ‹stanbul. Tel: 0216 - 418 96 20 Faks: 0216 - 418 96 49 e-posta: [email protected] 468 Türk Kardiyol Dern Arfl Nitrik oksit (NO), vasküler endotelde endotelyal nitrik oksit sentetaz (eNOS) enzimi taraf›ndan L-argininden sentezlenen vazoaktif bir maddedir ve vasküler düz kas gevfletici etkisi ile endotel ba¤›ml› vazodilatasyonun ana mediyatörüdür.[1] Nitrik oksit difüzyonla vasküler düz kas hücrelerine geçer, guanil siklaz› stimüle ederek cGMP (cyclic guanosine 3',5'monophosphate) sentezini art›r›r. Artan cGMP vasküler düz kas relaksasyonu ve vazodilatasyonuna neden olur.[1] Bazal NO sal›n›m›n›n bazal vasküler tonusun sa¤lanmas›nda ve kan bas›nc›n›n düzenlenmesindeki rolü çeflitli çal›flmalarla gösterilmifltir.[2,3] Bu aç›dan NO anahtar rol oynar.[4,5] Nitrik oksidin vasküler endotelde ateroskleroz geliflimini önleyici çeflitli etkilerinin oldu¤u gösterilmifltir. Trombosit ve lökositlerin endotele yap›flmas›n› önler, vasküler düz kas hücrelerinin migrasyonunu ve proliferasyonunu azalt›r; LDL oksidasyonunu k›s›tlayarak LDL’nin aterojenik LDL’ye dönüflümünü engeller.[6] Endotelyal nitrik oksit sentetaz enziminin kronik inhibisyonunun aterosklerozu h›zland›rd›¤›[7,8] ve kan bas›nc›nda yükselmeye neden oldu¤u hayvan deneyleriyle ortaya konmufltur.[4,8] Vazospastik anginal› hastalar›n koroner arterlerinde NO aktivitesinin düflük oldu¤u gösterilmifltir.[9] Bu bulgular, azalm›fl NO sal›n›m›n›n ateroskleroz geliflimi üzerindeki etkisini desteklemektedir. Son y›llarda eNOS enzimini kodlayan gende çeflitli mutasyonlar saptanm›fl, bu mutasyonlar›n bozulmufl NO sal›n›m›na, sonuç olarak da koroner arter hastal›¤› (KAH) ve hipertansiyona neden olabilece¤i bildirilmifltir. Endotelyal nitrik oksit sentetaz geninde belirlenen mutasyonlardan biri 5’ flanking bölgesinde, nükleotid 786’da timidin ile sitozinin yer de¤ifltirmesi sonucu ortaya ç›kar. Bu polimorfik genin koroner arter spazm›,[10] KAH ve yayg›nl›¤›,[11,12] miyokard infarktüsü[13] ve hipertansiyon[14] ile iliflkisi çeflitli çal›flmalarda ortaya konmufltur. Bu çal›flmada, anjiyografik olarak KAH saptanan hastalarda T-786 C gen polimorfizminin KAH ile olan iliflkisi araflt›r›ld›. HASTALAR VE YÖNTEMLER Dr. Siyami Ersek Gö¤üs Kalp ve Damar Cerrahisi Merkezi'nde koroner anjiyografi yap›lan 211 hasta (144 erkek, 67 kad›n; ort. yafl 59; da¤›l›m 27-85) rastgele yöntemle çal›flmaya al›nd›. Hastalara koroner anjiyografi, akut koroner sendrom ya da stabil angina pektoris tan›lar› nedeniyle uygulanm›flt›. Koroner anjiyografisi normal bulunan bireylerin bir bölümüne kapak replasman› nedeniyle anjiyografi yap›ld›. Bir bölümü ise, tipik gö¤üs a¤r›s› ya da pozitif efor testi olmas›na karfl›n anjiyografide ciddi koroner arter lezyonu bulunmayan olgulardan oluflmaktayd›. Tüm hastalar çal›flma hakk›nda bilgilendirildi, kat›lmak istemeyenler çal›flma d›fl› b›rak›ld›. Çal›flma protokolü kurumumuz etik kurulu taraf›ndan onayland›. Koroner anjiyografiler Phillips Integris (Phillips, Hollanda) cihaz›yla yap›ld›. Hastalar, en az bir damarda %50 veya daha fazla darl›¤› olanlar ve normal bulunanlar olmak üzere iki gruba ayr›ld›. Koroner arter lezyonu saptananlar ise bir, iki ve üç damar hastalar› olarak s›n›fland›r›ld›. Sistolik kan bas›nc› 140 mmHg’nin, diyastolik kan bas›nc› 90 mmHg’nin üzerinde olanlar ya da antihipertansif ilaç kullananlar hipertansif kabul edildi. Açl›k LDL düzeyi 130 mg/dl’nin üzerinde olanlar ya da statin kullananlar hiperkolesterolemik; açl›k trigliserid düzeyi 150 mg/dl’nin üzerinde olanlar ya da antilipidemik ilaç kullananlar hipertrigliseridemik olarak belirlendi. Açl›k kan flekeri 126 mg/dl’nin üzerinde olanlar veya diyabetes mellitus tan›s›yla tedavi görenler diyabetik kabul edildi. Olgular sigara içenler ve hiç içmemifl olanlar fleklinde ayr›ld›. Birinci derece yak›nlar›nda KAH olanlar için aile öyküsü pozitif kabul edildi. Genetik analiz. Hastalar›n kan örnekleri EDTA’l› (ethylenediaminetetraacetic acid) tüplere topland›. Elde edilen örneklerden standart DNA izolasyon yöntemleriyle (fenol kloroform) genomik DNA elde edildi. DNA üzerinde mutasyonlar› içeren ilgili gen bölgesi ENOS IF 5’TGG AGA GTG CTG GTG TAC CCC A 3’ ve ENOS IR 5’ GCC TCC ACC CCC ACC CTG TC 3’ primerleri[11] kullan›larak polimeraz zincir reaksiyonuyla ço¤alt›ld›. Mutasyon noktas›n› tan›yan restriksiyon enzimi (Msp I) yard›m›yla ço¤alt›lan parçan›n kesilmesinin ard›ndan, agaroz jeli üzerinde elektroforezle parçalar›n birbirinden ayr›lmas› sa¤land› ve ultraviyole ›fl›¤› alt›nda etidyum bromürle boyanan DNA parçalar› görüntülenip foto¤rafland› (restriksiyon parça uzunluk polimorfizm analizi). ‹statistiksel analiz. Sürekli de¤iflkenler ortalama ± standart sapma fleklinde ifade edildi. Sürekli de¤iflkenlerin grup karfl›laflt›r›lmas›nda two-tailed Student t-testi kullan›ld›. Normal da¤›l›m göstermeyen sürekli de¤iflkenlerin grup karfl›laflt›r›lmas›nda nonparametrik Mann-Whitney U-testi; kategorik de¤iflkenlerin karfl›laflt›r›lmas›nda ise ki-kare testi kullan›ld›. ‹kiden fazla grup ortalamalar› tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ile, normal da¤›l›m göstermeyen ikiden fazla grup ortamalar› ise Kruskal-Wallis testiyle karfl›laflt›r›ld›. Koroner arter hastal›¤› için ba¤›ms›z risk faktörlerinin belirlenmesinde çokde¤iflkenli lojistik regresyon analizi uyguland›. P de¤erinin 0.05’in alt›nda bulunmas› istatistiksel olarak anlaml› kabul edildi. Endotelyal nitrik oksit sentetaz (eNOS) gen polimorfizminin (T-786 C) koroner arter hastal›¤› ile iliflkisi 469 Tablo 1. Koroner arter hastalar› ile normal bireylerin klinik ve demografik özelliklerinin karfl›laflt›r›lmas› Koroner arter hastalar› (n=159) Ort±SS Yafl Beden kütle indeksi (kg/m2) Cinsiyet (erkek) Dislipidemi Hipertansiyon Sigara Diyabet Sistolik kan bas›nc› (mmHg) Diyastolik kan bas›nc› (mmHg) Total kolesterol (mg/dl) Trigliserid (mg/dl) HDL (mg/dl) LDL (mg/dl) Say› Yüzde 59.6±11.0 28.3±2.8 Normal (n=52) Ort±SS Say› Yüzde p 56.8±9.5 27.7±2.7 121 88 109 115 56 76.1 55.4 68.6 72.3 35.2 138.8±9.1 87.1±8.3 213.3±54.6 133.3±75.4 43.4±10.2 143.1±51.3 23 13 20 20 7 0.079 0.145 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.002 0.0001 0.028 0.029 0.039 0.034 0.043 44.2 25.0 38.5 38.5 13.5 136.1±6.4 84.4±7.4 195.2±41.6 114.0±51.0 47.3±11.5 126.5±37.6 BULGULAR Koroner arter hastalar› (n=159, %75.4) ile normal bireylerin (n=52, %24.6) demografik ve klinik özelliklerinin karfl›laflt›r›lmas› Tablo 1’de gösterildi. Aterosklerotik risk faktörleri (dislipidemi, diyabet, hipertansiyon, sigara, erkek cinsiyet) KAH grubunda belirgin olarak daha fazlayd›. Üç damar hastalar›nda diyabet (p<0.05) ve dislipidemi (p<0.001) anlaml› olarak daha yüksek bulundu. Koroner arter hastas› ve normal bireyler aras›nda T-786 C mutasyonu için genotip da¤›l›m› Tablo 2’de, tutulan damar say›s›na göre genotip da¤›l›m› ise Tablo 3’te gösterildi. Koroner arter hastalar›nda CC genotipi normal bireylere göre anlaml› derecede fazlayd› (p<0.05); CC genotipi üç damar hastalar›nda da anlaml› olarak daha yüksek oranda saptand› (p<0.001). En az bir C alleli (TC+CC, dominat mo- del) tafl›yan bireyler ile TT homozigot bireyler karfl›laflt›r›ld›¤›nda, KAH grubunda (p<0.01) ve üç damar hastalar›nda (p<0.001) en az bir C alleli tafl›yanlar anlaml› olarak daha fazlayd›. Koroner arter hastal›¤›n›n gelifliminde ba¤›ms›z risk faktörlerinin belirlenmesi için uygulanan çokde¤iflkenli lojistik regresyon analizi sonuçlar› Tablo 4’te gösterildi. C dominant bireylerde KAH’nin 2.9 kat fazla oldu¤u belirlendi (odds oran› 2.902, %95 güven aral›¤› 1.272-6.622; p=0.011). TARTIfiMA Son y›llarda eNOS enzimini kodlayan gende çeflitli mutasyonlar saptanm›fl, bu mutasyonlar›n NO sal›n›m›n›n bozulmas›na, sonuç olarak da KAH riskinde art›fla ve hipertansiyona neden olabilece¤i bildirilmifltir. Bu çal›flmada, eNOS genindeki T-786 C mutasyonunun KAH üzerine olan etkisi araflt›r›ld›. Tablo 2. Koroner arter hastalar› ile normal bireylerin (T-786 C) genotip ve allel da¤›l›m› KAH (n=159) T-786 C mutasyonu genotipleri CC TC TT Dominant model CC+TC TT Resesif model TT+TC CC Allel da¤›l›m oran› (Aditif model) T C KAH: Koroner arter hastal›¤›. Normal (n=52) Say› Yüzde Say› Yüzde p 23 73 63 14.5 45.9 39.6 6 15 31 11.5 28.9 59.6 0.040 96 63 60.4 39.6 21 31 40.4 59.6 0.009 136 23 85.5 14.5 46 6 88.5 11.5 0.393 0.625 0.375 0.740 0.260 0.032 470 Türk Kardiyol Dern Arfl Tablo 3. Damar tutulum say›s›na göre (T-786 C) genotip da¤›l›m› T-786 C genotipleri CC TC TT Dominant model CC+TC TT Resesif model TC+TT CC Kontrol (n=52) 1 damar (n=58) 2 damar (n=49) 3 damar (n=52) Say› Yüzde Say› Yüzde Say› Yüzde Say› Yüzde 6 15 31 11.5 28.9 59.6 4 25 29 6.9 43.1 50.0 6 25 18 12.2 51.0 36.7 13 23 16 25.0 44.2 30.8 0.001 21 31 40.4 59.6 29 29 50.0 50.0 31 18 63.3 36.7 36 16 69.2 30.8 0.001 46 6 88.5 11.5 54 4 93.1 6.9 43 6 87.8 12.2 39 13 75.0 25.0 0.030 Endotelyal nitrik oksit sentetaz genindeki varyantlardan biri Glu298Asp polimorfizmidir ve glutamat ile aspartat›n exon 7’de yer de¤ifltirmesi sonucu ortaya ç›kar. Glu298Asp polimorfizminin koroner arter spazm›,[15] aterosklerotik KAH,[16] miyokard infarktüsü,[17,18] koroner ateroskleroz yayg›nl›¤›[11,19] ve hipertansiyon[20] ile olan iliflkisi çeflitli çal›flmalarla belirlenmifltir. Berdeli ve ark.[21] Türk toplumunda Glu298Asp polimorfizminin prematür KAH için bir risk faktörü olabilece¤ini ortaya koymufllard›r. Afrasyap ve ark.[22] ise Türk toplumunda nitrik oksit seviyeleri ve Glu298Asp polimorfizmi ile KAH aras›nda iliflki bulamam›fllard›r. Cine ve ark.[23] da, eNOS genindeki di¤er bir mutasyon olan 4a/4b polimorfizminin özellikle ikincil risk faktörü olmayan miyokard infarktüslü hastalarda daha s›k görüldü¤ünü bildirmifllerdir. Endotelyal nitrik oksit sentetaz geninde belirlenen bir di¤er polimorfizm ise 5’ flanking bölgesinde, nükleotid 786’da timidin ile sitozinin yer de¤ifltirmesi (T-786 C) sonucu ortaya ç›kar. Glu298Asp gibi, bu mutasyonun da koroner arter spazm›,[10] KAH ve yayg›nl›¤›,[11,12] miyokard infarktüsü[13] ve hipertansiyonla[14] iliflkisi ortaya konmufltur. Casas ve ark.[24] 26 çal›flma üzerinde yapt›klar› meta-analizde (23028 hasta), eNOS geninde Glu298Asp (odds oran› 1.31, güven aral›¤› 1.13-1.51) ve 4a/4b (odds oran› 1.34, Tablo 4. Koroner arter hastal›¤›nda ba¤›ms›z risk faktörlerinin belirlenmesi için uygulanan çokde¤iflkenli lojistik regresyon analizi sonuçlar› Odds oran› %95 güven aral›¤› Cinsiyet (erkek) Dislipidemi Hipertansiyon Sigara Diyabet CC+TC ile TT (Dominant model) 4.065 3.677 3.202 3.546 3.891 2.902 1.739 1.572 1.463 1.495 1.391 - 9.504 8.600 7.009 7.992 10.883 1.272-6.622 p .001 .003 .004 .004 .010 .011 p güven aral›¤› 1.03-1.75) mutasyonu görülen bireylerde orta derecede artm›fl KAH riski oldu¤unu, ancak T-786 C mutasyonu ile KAH aras›nda önemli bir iliflki olmad›¤›n› bildirmifllerdir (odds oran› 1.06, güven aral›¤› 0.89-1.25). T-786 C mutasyonunun Türk toplumunda KAH’deki rolü ise henüz araflt›r›lmam›flt›r. Çal›flmam›zdaki hastalar normal kontrollere göre daha yafll›, beden kütle indeksleri daha yüksekti; ancak, bu farklar istatistiksel olarak anlaml› bulunmad›. Di¤er koroner risk faktörleri (dislipidemi, hipertansiyon, diyabet, sigara, erkek cinsiyet) hasta grubunda anlaml› olarak daha fazlayd›. Öte yandan, üç damar hastalar›nda diyabet ve dislipidemi daha yüksek oranda saptand›. Colombo ve ark.[11] eNOS genindeki T-786 C mutasyonunun ‹talyan nüfusunda KAH ve yayg›nl›¤› ile olan iliflkisini incelemifller ve CC homozigot bireylerin TT homozigotlara göre 2.5 kat daha fazla KAH’ye yakalanma riski gösterdiklerini ve koroner ateroskleroz yayg›nl›¤›n›n da bu bireylerde artm›fl oldu¤unu bildirmifllerdir. Rossi ve ark.[12] da benzer sonuçlar elde etmifller ve GENICA çal›flmas›na dahil edilen koroner arter hastalar› bir, iki ve üç damar hastas› fleklinde s›n›fland›r›ld›¤›nda, T-786 C mutasyonu ile istatistiksel olarak anlaml›l›k s›n›r›nda bir iliflki saptam›fllard›r. Ayn› yazarlar, koroner anjiyografileri normal olan bireyler ve %50’nin alt›nda darl›¤› olan bireyleri, iki veya üç damar hastalar› ile karfl›laflt›rd›klar›nda, C alleli tafl›yan homozigot veya heterozigot bireylerde çokdamar hastal›¤› riskini daha yüksek (%69) bulmufllard›r. C allelinin di¤er koroner risk faktörleriyle birlikte de¤erlendirildi¤i çokde¤iflkenli lojistik regresyon analizinde, C alleli tafl›yan bireylerde KAH riski 3.6 kat fazla görülmüfltür.[12] Çal›flma bulgular›m›z her iki araflt›rma sonuçlar›yla benzer özellikler gösterdi. CC genotipi koroner arter hastalar›nda ve üç damar hastalar›nda anlaml› derecede daha fazlayd›. Ayr›ca, en az bir C alleli tafl›yan (TC+CC, dominant model) bireyler, Endotelyal nitrik oksit sentetaz (eNOS) gen polimorfizminin (T-786 C) koroner arter hastal›¤› ile iliflkisi KAH grubunda ve üç damar hastalar›nda, TT homozigot bireylere göre anlaml› olarak daha yüksek oranda idi. Koroner arter hastal›¤› grubu ve normal kontroller karfl›laflt›r›ld›¤›nda, KAH grubunda gen polimorfizmine paralel olarak di¤er koroner risk faktörlerinin de anlaml› derecede fazla oldu¤u görüldü. Koroner arter hastal›¤› için di¤er risk faktörleriyle C allelinin (TC+CC) birlikte de¤erlendirildi¤i çokde¤iflkenli lojistik regresyon analizi sonuçlar›, T-786 C mutasyonunun hastalar›m›zda KAH için bir risk faktörü olabilece¤ini ortaya koydu. Nakayama ve ark.[10,13] ise T-786 C mutasyonunu, koroner arter spazm› olanlarda ve özellikle miyokard infarktüsü sonras› anjiyografik olarak koroner arter lezyonu saptanmayan olgularda anlaml› olarak daha yüksek bulmufllard›r. Yazarlar, koroner arter lezyonu bulunmayan ve T-786 C mutasyonu olan olgularda koroner arter spazm›n› intrakoroner asetilkolin injeksiyonuyla göstermifllerdir.[13] Çal›flmam›z›n kontrol grubu miyokard infarktüsü geçirmemifl bireylerden oluflmaktayd›; bu grupta T786 C mutasyonu daha düflük oranda bulundu. Bu durum, kontrol grubunda miyokard infarktüsü olmamas›yla uyumlu olabilir; ancak, normal olgulara asetilkolin provokasyon testi uygulanmad›¤› için, bu grupta T-786 C mutasyonun varl›¤›n›n koroner arter spazm›yla iliflkisini aç›klayam›yoruz. Göz önünde bulundurulmas› gereken di¤er bir konu ise, çal›flmadaki koroner arter hastalar›nda gen polimorfizmine paralel olarak di¤er koroner risk faktörlerinin de fazla oldu¤udur. Bu durum, gen mutasyonuna neden olabilecek risk faktörlerinin ve çevresel faktörlerin olup olmad›¤› sorusunu akla getirebilir. Bu konuyla ilgili yeterli veri bulunmamaktad›r. Sigara kullan›m› ile T-786 C mutasyonunun birlikte oldu¤u durumlarda KAH riskinin artt›¤› bildirilmifltir. Wang ve ark.[25] sigara kullan›m›yla, 4a/4b polimorfizminde 4a alleline sahip bireylerde ve CYP1A1 geninde CC genotipinde olanlarda koroner ateroskleroz ciddiyetinin artm›fl oldu¤unu belirlemifllerdir.[26] Jo ve ark.,[27] sigara içen Korelilerde miyokard infarktüsü s›kl›¤›n› 786TC, -922AG, -1468TA mutasyonu olanlarda daha fazla bulmufllard›r. Nasreen ve ark.[28] T-786 C mutasyonu olan ve CC genotipinde olan sigara içicilerde serebral kan ak›m›n›n azalm›fl ve serebrovasküler direncin artm›fl oldu¤unu saptam›fllard›r. Barbera ve ark.[29] ise sigara içiminin pulmoner arter endotelyumunda eNOS sal›n›m›n›, akci¤er dokusunda ise eNOS protein miktar›n› azaltt›¤›n› bildirmifllerdir. Bütün bu çal›flmalar, sigara tüketimi ve eNOS genindeki mutasyonlar›n birlikteli¤inin endotel disfonksi- 471 yonu ve aterosklerozu h›zland›rd›¤›n› gösterebilir; ancak, sigaran›n bu mutasyonlara neden olabilece¤i konusuna aç›kl›k getirmemektedir. Çal›flmam›z›n bulgular›, endotelyal nitrik oksit sentetaz geni T-786 C mutasyonunun toplumumuzda koroner arter hastal›¤›n›n varl›¤› ve yayg›nl›¤› için bir risk faktörü olarak de¤erlendirilebilece¤i yönündedir. Ancak, olgu say›m›z›n, özellikle kontrol grubunun say›ca az olmas› çal›flmam›z aç›s›ndan bir k›s›tl›l›kt›r. Daha ileri popülasyon çal›flmalar›yla, bu mutasyonun Türk toplumunda koroner arter spazm› ile olan iliflkisi ortaya konabilir. KAYNAKLAR 1. Moncada S, Higgs A. The L-arginine-nitric oxide pathway. N Engl J Med 1993;329:2002-12. 2. Vallance P, Collier J, Moncada S. Effects of endothelium-derived nitric oxide on peripheral arteriolar tone in man. Lancet 1989;2:997-1000. 3. Quyyumi AA, Dakak N, Andrews NP, Husain S, Arora S, Gilligan DM, et al. Nitric oxide activity in the human coronary circulation. Impact of risk factors for coronary atherosclerosis. J Clin Invest 1995;95:1747-55. 4. Huang PL, Huang Z, Mashimo H, Bloch KD, Moskowitz MA, Bevan JA, et al. Hypertension in mice lacking the gene for endothelial nitric oxide synthase. Nature 1995;377:239-42. 5. Ohashi Y, Kawashima S, Hirata K, Yamashita T, Ishida T, Inoue N, et al. Hypotension and reduced nitric oxideelicited vasorelaxation in transgenic mice overexpressing endothelial nitric oxide synthase. J Clin Invest 1998; 102:2061-71. 6. Schmidt HH, Walter U. NO at work. Cell 1994;78:91925. 7. Cayatte AJ, Palacino JJ, Horten K, Cohen RA. Chronic inhibition of nitric oxide production accelerates neointima formation and impairs endothelial function in hypercholesterolemic rabbits. Arterioscler Thromb 1994; 14:753-9. 8. Shesely EG, Maeda N, Kim HS, Desai KM, Krege JH, Laubach VE, et al. Elevated blood pressures in mice lacking endothelial nitric oxide synthase. Proc Natl Acad Sci U S A 1996;93:13176-81. 9. Kugiyama K, Yasue H, Okumura K, Ogawa H, Fujimoto K, Nakao K, et al. Nitric oxide activity is deficient in spasm arteries of patients with coronary spastic angina. Circulation 1996;94:266-71. 10. Nakayama M, Yasue H, Yoshimura M, Shimasaki Y, Kugiyama K, Ogawa H, et al. T-786 C mutation in the 5’flanking region of the endothelial nitric oxide synthase gene is associated with coronary spasm. Circulation 1999;99:2864-70. 11. Colombo MG, Paradossi U, Andreassi MG, Botto N, Manfredi S, Masetti S, et al. Endothelial nitric oxide 472 synthase gene polymorphisms and risk of coronary artery disease. Clin Chem 2003;49:389-95. 12. Rossi GP, Cesari M, Zanchetta M, Colonna S, Maiolino G, Pedon L, et al. The T-786C endothelial nitric oxide synthase genotype is a novel risk factor for coronary artery disease in Caucasian patients of the GENICA study. J Am Coll Cardiol 2003;41:930-7. 13. Nakayama M, Yasue H, Yoshimura M, Shimasaki Y, Ogawa H, Kugiyama K, et al. T(-786) C mutation in the 5’-flanking region of the endothelial nitric oxide synthase gene is associated with myocardial infarction, especially without coronary organic stenosis. Am J Cardiol 2000;86:628-34. 14. Hyndman ME, Parsons HG, Verma S, Bridge PJ, Edworthy S, Jones C, et al. The T-786- C mutation in endothelial nitric oxide synthase is associated with hypertension. Hypertension 2002;39:919-22. 15. Yoshimura M, Yasue H, Nakayama M, Shimasaki Y, Sumida H, Sugiyama S, et al. A missense Glu298Asp variant in the endothelial nitric oxide synthase gene is associated with coronary spasm in the Japanese. Hum Genet 1998;103:65-9. 16. Hingorani AD, Liang CF, Fatibene J, Lyon A, Monteith S, Parsons A, et al. A common variant of the endothelial nitric oxide synthase (Glu298Asp) is a major risk factor for coronary artery disease in the UK. Circulation 1999;100:1515-20. 17. Shimasaki Y, Yasue H, Yoshimura M, Nakayama M, Kugiyama K, Ogawa H, et al. Association of the missense Glu298Asp variant of the endothelial nitric oxide synthase gene with myocardial infarction. J Am Coll Cardiol 1998;31:1506-10. 18. Hibi K, Ishigami T, Tamura K, Mizushima S, Nyui N, Fujita T, et al. Endothelial nitric oxide synthase gene polymorphism and acute myocardial infarction. Hypertension 1998;32:521-6. 19. Colombo MG, Andreassi MG, Paradossi U, Botto N, Manfredi S, Masetti S, et al. Evidence for association of a common variant of the endothelial nitric oxide synthase gene (Glu298Asp polymorphism) to the presence, extent, and severity of coronary artery disease. Heart 2002;87:525-8. 20. Miyamoto Y, Saito Y, Kajiyama N, Yoshimura M, Türk Kardiyol Dern Arfl Shimasaki Y, Nakayama M, et al. Endothelial nitric oxide synthase gene is positively associated with essential hypertension. Hypertension 1998;32:3-8. 21. Berdeli A, Sekuri C, Sirri Cam F, Ercan E, Sagcan A, Tengiz I, et al. Association between the eNOS (Glu298Asp) and the RAS genes polymorphisms and premature coronary artery disease in a Turkish population. Clin Chim Acta 2005;351:87-94. 22. Afrasyap L, Ozturk G. NO level and endothelial NO synthase gene polymorphism (Glu298Asp) in the patients with coronary artery disease from the Turkish population. Acta Biochim Biophys Sin 2004;36:661-6. 23. Cine N, Hatemi AC, Erginel-Unaltuna N. Association of a polymorphism of the ecNOS gene with myocardial infarction in a subgroup of Turkish MI patients. Clin Genet 2002;61:66-70. 24. Casas JP, Bautista LE, Humphries SE, Hingorani AD. Endothelial nitric oxide synthase genotype and ischemic heart disease: meta-analysis of 26 studies involving 23028 subjects. Circulation 2004;109:1359-65. 25. Wang XL, Sim AS, Badenhop RF, McCredie RM, Wilcken DE. A smoking-dependent risk of coronary artery disease associated with a polymorphism of the endothelial nitric oxide synthase gene. Nat Med 1996; 2:41-5. 26. Wang XL, Wang J. Smoking-gene interaction and disease development: relevance to pancreatic cancer and atherosclerosis. World J Surg 2005;29:344-53. 27. Jo I, Moon J, Yoon S, Kim HT, Kim E, Park HY, et al. Interaction between -786TC polymorphism in the endothelial nitric oxide synthase gene and smoking for myocardial infarction in Korean population. Clin Chim Acta Epub 2005, Sep 9. 28. Nasreen S, Nabika T, Shibata H, Moriyama H, Yamashita K, Masuda J, et al. T-786C polymorphism in endothelial NO synthase gene affects cerebral circulation in smokers: possible gene-environmental interaction. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2002;22: 605-10. 29. Barbera JA, Peinado VI, Santos S, Ramirez J, Roca J, Rodriguez-Roisin R. Reduced expression of endothelial nitric oxide synthase in pulmonary arteries of smokers. Am J Respir Crit Care Med 2001;164:709-13.
