Endokrin Hormon

advertisement
HORMONLAR
Prof. Dr. Ezel Uslu
1
Vücut fonksiyonlarının integrasyonu
3 sistemle sağlanır
(haberleşme, etkileşim)
•
Sinir sistemi
•
İmmun sistem
•
Endokrin sistem
2
Endokrin sistem
- Endokrin hormon salgılar
- Sirkülasyona verir
- Çevre doku fonksiyonları düzenlenir
Endokrin Hormon
Tiroksin
Ekzokrin doku
Ürünlerini vücut dışına veya sindirim kanalına
verir
3
Parakrin Hormon
Salındığı dokuya yakın bölgelere etkir
Somatostatin
Pankreas δ hücrelerinde üretilir,
α ve β hücrelerini etkiler
4
Otokrin Hormon
Sekrete edildiği hücreler üzerinde etkili
Somatostatin
Kendi salgılanmasına etkisi
5
İnsulin like growth factor-1 (IGF-1)
Endokrin
Parakrin
Otokrin
üç özellik gösterir
6
Diğer Sinyal iletenler
ƒ
Eikosanoidler
ƒ
Prostaglandinler
ƒ
Tromboksanlar
ƒ
Lökotrienler
9 Hormon gibi davranırlar
9 Öncelikle sekrete edildikleri yerde etkir
7
Mediatörler
9 Sinyal iletirler
9 Çok çeşitli hücrede sentezlenir
9 Salınım sonrası hormon etkisi gösterir
ƒ Feromonlar
ƒ Nörotransmitterler
ƒ Growth faktörler
8
Nörotransmitterler
ƒ Sinir hücrelerinde sentezlenir
“ nörosekresyon ”
1. Nörotransmitterler – Kısa aralıklı etki gösterir,
yakın bölgelerde etkili
2. Nörohormonlar – uzun aralıklı etkili, kana
verilirler
İki grup arasındaki sınır belirsizdir,
nörotransmitter nörohormon etki gösterebilir
9
Feromonlar
Böcekler ve birçok hayvan, birbirleriyle
salgıladıkları feromonların kokularına
dayalı bir yolla iletişim kurarlar
10
CH3(CH2)9CH3
(CH3)2CH(CH2)14CH3
Undekan
2-Metilheptadekan
(Hamam böceği toplanma
feromonu)
(Dişi kaplan güvesinin
cinsel çekicisi)
Muskalür
(Karasineğin cinsel çekicisi)
Böcek kontrolünde feromonlar kullanılır
11
Salınım
Hormon konsantrasyonu
(plazma + hücreler arası sıvı)
10-7 – 10-12 M
Zayıf sinyaller hücre üzerindeki reseptörler
tarafından algılanır
12
Peptit , protein
Tirozin türevi
Steroid
YAPILARI
Hipotalamus
Paratiroid
Pankreas
Hipofiz
Mide-barsak hormonları
Adrenal medulla hormonları
(katekolaminler)
Tiroid hormonları
Plasenta, adrenaller, gonadlar
13
ÖNCÜL MOLEKÜLLER
• İnsulin gibi bazı protein yapılı hormonlar
pürtüklü endoplazmik retikulumda
sentezlenir
• Steroid yapılı hormonlar kolesterolden
sentezlenir
• Katekolaminler serbest tirozinden
Tiroid hormonları ise Tg molekülü üzerindeki
tirozinden sentezlenir
14
Peptit - Protein Yapılı Hormonların
Depolanması
• Pürtüklü endoplazmik retikulumda (RER)
preprohormon veya prohormon olarak
sentezlenir
• Golgi’de membranöz veziküller halinde
depolanır
• Prohormon, proteolizden sonra aktif
hormon haline geçer
• Granüllerde en fazla 1gün’lük ihtiyacı
karşılayacak miktar hormon depolanır.
15
Tirozin Türevi Hormonların Depolanması
• Adrenal medulla ve sinir uçlarındaki
katekolaminler suda çözünür protein olan
kromograninler ve ATP ile bağlı olarak
granüller şeklinde depolanır.
• Depolarda birkaç günlük hormon vardır.
ƒ Tiroid bezinde tiroid hormonları
birkaç haftalık hormon depolanır.
16
Steroid Hormonların Depolanması
ƒ Sentez sonrası depolanmaz,
bekletilmeden salgılanır
ƒ Birkaç saatlik aktiviteye yetecek miktar
depolanır
17
SALGILANMA
Peptid/protein yapılı hormonlar, katekolaminler :
eksositoz ile hücre dışına taşınır, Ca2+ olayı
başlatır.
Steroid hormonlar ve tiroid hormonları :
basit diffüzyon ile hücreden salınır.
18
Salgılanma hızları
Farklı
Salgılanma negatif veya pozitif geriye beslenme
(feed-back, feed-forward) ile kontrol edilir.
Çoğu negatif feed-back ile kontrol edilir
19
İnsulin salgılanmasında önemli etkenler
9 Metabolik – arginin, lösin, ketoasitler
9 Endokrin – glukagon, somatostatin, epinefrin
9 Sinirsel – α ve β agonistler
Fakat başlıca fizyolojik düzenleyici glukozdur.
20
¾ Plazma glukozun artışı ile pankreas
langerhans adacıkları β-hücreleri insulin
salgılamasını arttırır,
¾ İnsulin dokunun glukozu alarak
kullanmasını artırır, plazma glukozu düşer
¾ Glukoz düzeylerinin düşmesiyle insülin
salgılanması azalır
21
Bazı hormon salgılanması ritmik özellik
gösterir.
Hipofiz hormonları
- 24 saat aralıkla
- karanlık / aydınlık
- uyku’ya eşzamanlı
Sirkadiyen salgılanır
Kortizol - Sabah uyandıktan hemen sonra pik
ACTH - Gün boyunca azalır
- Uykunun ilk saatlerinde en düşük
Kadınlarda gonadotropinler, östrojen ve
progestron 1 aylık dönemde ritmik salınım
22
TAŞINMA
Peptit/ protein yapılı (hidrofilik )
Katekolaminler
serbest
Steroidler
Tiroid hormonları ( hidrofobik)
spesifik
proteinlerle
23
Kortizol – kortikosteroid bağlayıcı globulin
transkortin
CBG
Tiroid hormonları- tiroksin bağlayıcı globulin
TBG
Seks hormonları - seks hormonları bağlayıcı
globulin
SHBG
24
Taşıyıcıya Bağlanmanın Özellikleri
¾ Bağlanma nonkovalan,
geriye dönüşlü
¾ Taşıyıcıya özgünlük
reseptörlere özgünlükten daha az
CGB kortizol yanısıra progesteron da taşır
¾ Taşıyıcıya bağlı hormonlar dolaşımda az
oranda da serbest bulunur
T4
%0.02-0.04’ü serbest
Serbest biyolojik etkinliğe sahip
25
Neden Bağlayıcı?
¾ Bağlanma ile suda çözünürlük birkaçyüz kat
artar
¾ Taşıyıcı küçük aa yapılı hormonların böbrek
glomerüllerinden geçişi önler
¾ Proteazlara karşı korur, kandaki yarı ömür
uzar
9 Serbest hormonların yarı ömürleri kısa
26
Serbest taşınan hormonların dolaşımdaki
miktarları kısa sürede hızla artar
Uyarı geldiğinde
Peptit yapılılar 5-100 kat
Katekolaminler 5-10 kat artar
Proteinlerle taşınanlar ise kısa sürede büyük
değişiklik göstermez.
27
YIKIM
• Peptid-protein yapılı hormonlar
İnsulin
- Hedef doku
- Karaciğer
- Böbrek
proteolize uğrar
• Hormon reseptör aracılı endositoz ile hücre
içine alınır ve lizozomlarda hidroliz edilir
• Reseptör sayısı azalırsa dolaşımdaki hormon
yaşam süresi artar.
28
Oksitosin ve angiotensin
küçük mol ağırlıklı, peptit yapılı
plazmada proteolize uğrar.
29
TSH, LH, FSH, hCG
Glikoprotein yapılı
Karbohidrat birimlerinin terminal komponenti
olan siyalik asit glikozidazlarla koparılır ,
galaktoz kalıntıları ortaya çıkar ve karaciğerde
reseptörler tarafından tanınarak plazmadan hızla
uzaklaştırılır
30
Katekolaminler , Steroidler, Tiroid hormonları
Enzimatik değişikliklerle inaktive edilir
Testosteron
dihidrotestosteron
T4
T3
Dönüştürülerek metabolize edilir
31
RESEPTÖRLER
Hücre dışı sıvıda:
Hormonlar
10-15–10-9 M
Steroller
Peptitler
Proteinler
10-5 – 10-3 M
Benzer yapılar
Hedef hücrenin çok düşük miktardaki hormonları
birbirinden veya diğer moleküllerden ayırması güç
Diğer moleküller / Hormon = 106 – 109 Mol/L
32
ƒ
Membran, sitoplazma, çekirdekte yer alır
ƒ
Ligant spesifisitesi gösterir
ƒ
Dokuya hedef doku olma özelliği verir
ƒ
Protein
ƒ Ligant-reseptör etkileşimi semienzimatik
reaksiyonu andırır
33
Reseptörler 3’e ayrılır
1. İntrinsik enzimatik aktivite gösterenler
- Tirozin kinaz: İnsülin, EGF
- Tirozin fosfataz: CD4 (cluster determinant -45)
- Guanilat siklaz : ANF
- Serin/treonin kinaz : Aktivin, TGF-β
34
2. G Proteinlere eşlenik Reseptörler
(GTP-binding and hydrolyzing protein)
- Adrenerjik reseptörler
- Koku reseptörleri
- Hormonlar
(Glukagon, angiotensin, ADH, bradikinin)
35
3. Hücre içi yerleşimli reseptörler
- Ligant bağlandıktan sonra nukleusa göç eder,
- Ligant-reseptör ikilisi gen transkripsiyonu
üzerinde etkili
36
Tirozin Kinaz Aktiviteli Reseptörler
Tirozin kinaz aktivitesi gösteren proteinlerin
tirozinleri fosforile olduktan sonra
SH2 bölgesi içeren proteinleri ile etkileşir
ƒ SH2 ilk kes Src proto onkogen’de görüldü
Src homology domain 2 = SH2
ƒ RTK ve SH2 içeren protein etkileşimi ile
proteinin tirozinleri fosforillenir, ve enzimatik
aktivitesi değişir
37
SH2 İçeren Proteinler
ƒ Phospholipase C γ (PLCγ)
ƒ Proto-oncogen c-Ras associated GTPase
activating protein (ras GAP)
ƒ Phosphatidylinositol-3-kinase (PI-3K)
ƒ Protein phosphatase-1C (PTP1C)
38
Reseptör Olmayan Protein Tirozin
Kinazlar
- Hücre büyümesi
- Proliferasyonla ilişkili olaylarda raslanır
İki aile:
1. Archetypal ailesi : Src ile akraba
2. Janus Kinazlar
9 Kendisi tirozin kinaz aktivitesi göstermeyen
reseptörler , tirozin kinaz aktivitesi gösteren
proteinlere bağlanır
39
Örnek :
- Sitokin reseptörleri IL2
- T Hücreleri CD4, CD8 yüzey glikoproteinleri
- T Hücreleri antijen reseptörleri
40
Reseptör- Protein Etkileşimine Örnek :
İnsülin Reseptörleri
- İntrinsik tirozin kinaz aktivitesine sahip , fakat
direkt etki edemez
- Otofosforilasyon sonrası:
enzimatik aktif SH2 grubu içeren proteinlerle
eşleşir (PI-3K, PLC-γ)
41
IRS 1
İnsülin Reseptör Substrat 1
- SH2 bölgesine benzer motifler içerir
- PI-3K ile kompleks yapar
Bu nedenle docking= adaptör protein
Grb2 growth factor receptor-binding protein 2
Adaptör protein !
42
Serin/Treonin Kinaz Reseptörleri
- TGF-β reseptörleri intrinsik serin/treonin kinaz
aktivitesi gösterir
-TGF-β ailesinde 30’dan fazla protein
• Aktivin
• İnhibin
• Kemik morfojenik proteinler
9 Hücresel çoğalma,başkalaşım, hareket,
adezyon işlemlerinde görülür
43
Reseptör Olmayan Serin/Treonin
Kinazlar
ƒ cAMP bağımlı protein kinaz (PKA)
ƒ Protein Kinaz C (PKC)
ƒ Mitogen aktive protein kinaz (MAP kinaz)
44
PKC
ƒ Serin/Treonin kinaz
ƒ DAG (diacilgliserol) ve Ca iyonu varlığında
maksimum aktif
9 PKC’nin EGF reseptörlerini fosforillemesi ile
tirozin kinaz aktivitesi down regüle olur
45
MAP Kinazlar
ƒ Hücre büyümesi ile ilgili (Mitogen activated kinase)
ƒ MAPK ; RTK veya reseptör olmayan tirozin
kinazların substratı değil,
MAPKK, MAPKKK üzerinden aktiflenir
Raf = MAPK Kinaz protoonkogen
46
Fosfolipazlar ve Fosfolipitler
ƒ Hormonun reseptöre bağlanması ile PLC-γ
aktive olur.
- PLC-γ SH2 içerir, RTK ile etkileşir
- PLC-γ aktiflenmesi PIP2
DAG + IP3
hidrolizi yapar,
IP3, depo Ca çıkışına neden olur,
DAG ve Ca PKC’yi aktifler
47
Fosfolipaz D ve A2 membran fosfatidil
kolinleri hidroliz eder
PLD
PC
Fosfatidik asit
DAG
PLA2
PC
FFA + Lizofosfatidil kolin
Yağ asitleri ve LizoPC DAG’ın stimule ettiği
PKC yolunu açar
48
Fosfatidilinozitol-3-Kinaz (PI-3K)
ƒ RTK veya reseptör ilişkili PK’lar tarafından
tirozinleri fosforillendiğinde aktifleşir
ƒ SH2 içerir, reseptörlerle veya PK’larla bu bölge
ile bağlanır
ƒ Fosfatidil inozitolleri fosforiller, PLC-γ için
substratlar ortaya çıkar, DAG ve IP3’ün
yarattığı kaskad açılır
49
G-Proteinlere Eşlenik Reseptörler (GPCR)
1. Adenilsiklazı aktifler, cAMP artar
- β-Adrenerjikler
- Glukagon
- Koku reseptörleri
2. PLC-γ yolunu aktifler
- Angiotensin
- Bradikinin
- Vazopressin
3. Fotoreseptörler
Transducin adı verilen G proteinlere eşlenir
50
Asetil Kolin Reseptörleri
yüzey reseptör
asetilkolin
P
P
PI-PLCβ
G protein
P
P
PIP2
Kas kasılması
DAG ( membranda kalır)
aktif
IP3
artmış [Ca++]
Protein Kinaz C
kas kasılmasında
artış
IP3 reseptör ( ligand-gated chanel)
düz endoplasmik retikulum
51
Tirozin Kinaz Aktiviteli Reseptörler
52
Reseptörlerin internalizasyonu
Birçok H-R kompleksi membrandan
endositoz ile hücre içine alınır.
İnternalizasyon X eksositoz
- Hormon - Reseptör kompleksi klatrin kaplı
çukurcuklara (coated pits) bağlanır
- Kaplı veziküller halinde sitoplazmaya girer
- Kılıf yırtılır, birbirleri ile birleşerek
reseptozomları oluştururlar.
53
İnternalizasyon sonrası
¾
- Golgi cisimciği ile birleşir veya
- Veziküller lizozomlarla birleşerek
reseptör ve hormon yıkılabilir
¾
H-R lizozomda ayrılır
hormon yıkılır, reseptör membrana döner
¾
Eksojen ligant olmadığı zaman reseptör
kaplı kuyucuklarda saklanır.
54
55
Sinyalin Sonlanması
1. G proteinin α subünitini GTPaz aktivitesi ile,
Bu sistem GTP az Activating Protein (GAP)
gerektirir
2. Ligant konsantrasyonunun azalması
56
3. Reseptör desensitizasyonu
Ligant uzun süreli mevcutsa:
G-protein receptor kinase (GPRK), reseptörü
fosforiller
Fosforillenmiş reseptöre arrestin bağlanması
reseptörü inaktive eder
57
Etki Mekanizmalarına Göre
Hormonların Sınıflandırılması
1. Hücre içi reseptörlere bağlanan
hormonlar
Androjenler
Glukokortikoidler
Kalsitriyol (1.25[OH]2-D3)
Mineralokortikoidler
Östrojenler
Progestinler
Retinoik asit
Tiroid hormonları (T3 veya T4)
58
2. Hücre yüzey reseptörlerine bağlanan
hormonlar
A. İkinci haberci cAMP
α2 - Adrenerjik katekolaminler
β - Adrenerjik katekolaminler
Adrenokortikotropik hormon (ACTH)
Anjiyotensin II
Antidiüretik hormon (ADH)
Follikül uyarıcı hormon (FSH)
Glukagon
Kalsitonin
59
Koriyonik gonadotropin, insan (hCG)
Kortikotropin salıcı hormon (CRH)
Lipotropin (LPH)
Lüteinleştirici hormon (LH)
Melanosit uyarıcı hormon (MSH)
Paratiroid hormonu (PTH)
Somatostanin
Tiroid uyarıcı hormon (TSH)
60
B. İkinci haberci cGMP
Atriyal natriüretik faktör (ANF)
Nitrik oksit (NO)
61
C. İkinci haberci kalsiyum veya
fosfatidilinositol (veya her ikisi) olan
hormonlar
α1 – Adrenerjik katekolaminler
Anjiyotensin II
Antidiüretik hormon (ADH, vazopressin)
Asetilkolin (müskarinik)
Gastrin
Gonadotropid salıcı hormon (GnRH)
Kolesistokinin
Oksitosin
P maddesi
Tirotropin salıcı hormon (TRH)
Trombositten türeyen büyüme faktörü (PDGF)
62
D. İkinci haberci bir kinaz veya fosfataz
şelalesi olan hormonlar
Büyüme hormonu (GH)
Epidermal büyüme faktörü (EGF)
Eritropoietin
İnsülin
İnsüline benzer büyüme faktörleri (IGF-I, IGF-II)
Prolaktin (PRL)
Koriyonik somatomammotropin (CS)
Sinir büyüme faktörü (NGF)
Trombositten türeyen büyüme faktörü (PDGF)
63
Tip
Grup 1
Grup 2
Steroidler
Polipeptitler
İyodotironinler
Proteinler
Kalsitriyol
Glikoproteinler
Retinoidler
Katekolaminler
Çözünürlük
Lipofil
Hidrofil
Taşıyıcı
Var
Yok
Plazma yarı ömrü
Saatler-günler
Dakikalar
Reseptör
Hücre içi
Membran
Aracı
Horm-res ikilisi
cAMP, cGMP,
Ca2+, DAG, IP3,
kinaz şelalesi
64
I. Grup. Hücre içi reseptörlere bağlanan
hormonlar
• Lipofil olduklarından membrandan geçerler.
• Kendilerine spesifik reseptörlere bağlanırlar.
• Hormon-reseptör ikilisi ortam sıcaklık ve
tuzuna bağlı olarak aktivasyona uğrar
• Sonuçta çekirdekteki kromatine
bağlanabilecek şekilde boy, konformasyon,
yüzey yükünde değişiklik olur
65
• Bazı durumlarda aktivasyon reseptörden
ısı şok proteini Hsp 90 - kopması ile olabilir
Bu birleşmenin sitoplazma mı yoksa nukleusta
mı olduğu şüphelidir
Sonuçta
H-R çifti DNA üzerinde spesifik HRE’e bağlanır
spesifik genler aktiflenir veya inaktiflenir
66
Gen üzerinde transkripsiyonel olarak ‘’etkin‘’
kromatin bölgeleri vardır.
Genlerin 5’ tarafında en az iki tane düzenleyici
eleman yer alır.
1. Promotor eleman (PE)
2. Hormon yanıt elemanları (HRE)
67
Promotor Eleman (PE)
RNA polimeraz II’nin DNA’ya bağlanma noktasını
belirler,
Dolayısı ile:
Transkripsiyonun doğru başlamasını sağlar
68
Hormon Yanıt Elemanları (HRE)
Transkripsiyonun başlama sıklığını değiştirir
9 Her hormonun kendine ait HRE’i vardır.
9 Çok sayıdadır, HRE sayısı reseptör
sayısından fazladır
9 HRE’lerin birer ortak dizilimi vardır
69
Farklı yapılar ?
ƒ Peptid yapılı hormonlar da etkilerini HRE
üzerinden gösterir
ƒ 2. Habercisi cAMP olan birçok hormon
transkripsiyonu etkiler
70
71
72
Lipofilik hormon reseptörleri:
9 Steroid hormon
9 Tiroid hormonları
9 D Vitamini
9 Retinoik asit
“ Çinko parmak yapı ”
Reseptörlerin merkezinde, 66-68 aa’lik bir
bölge, DNA molekülüne bağlanan bölge
İki Zn2+ iyonunu, 8 sistein bağlar
73
Zn- Parmak yapı:
Steroid hormon reseptörleri haricinde
- Dioxin (toksin)
- Onkogen erb-A protein ürünü
bağlayan reseptörlerde de görülür
74
™ Hormon agonisti
Hormon reseptörüne bağlanır ve hormon
etkisini başlatır
Oral kontraseptivler
™ Hormon antagonisti
Reseptöre bağlanır, hormon etkisini başlatmaz,
Etkiyi bloke eder
75
II Grup, Peptid yapılı ,
membran reseptörleri olan hormonlar
• Suda çözünürler
• Taşıyıcıları yoktur , kısa ömürlüdür
• Reseptörleri integral membran proteinleridir
• Hücre içi haberciler kullanırlar
76
İkinci Haberciler
cAMP
Adenil Siklaz Sistemi
ƒ Aktif bölgesi membran iç yüzünde enzim
Adenil siklaz
ATP
cAMP
Mg 2+
77
cAMP Yolu
ƒ cAMP üzerine etki dokudan dokuya değişir
Adrenalin
kasta
cAMP
çok artar
karaciğerde
daha az artar
kasta
az artar
karaciğerde
çok artar
Glukagon
78
ƒ Birçok hormon hücre içi cAMP düzeyini
arttırır, bir kısmı da azaltır
ƒ cAMP yoluyla çalışan hormonlar etkilerini
tek bir adenil siklaz molekülü üzerinden özgün
reseptörleriyle gösterir
Adipoz hücrede
adrenalin, ACTH, glukagon, MSH ve ADH
adenil siklazı uyarır ve cAMP’yi arttırır
ƒ Bir reseptör tahrip olursa diğerlerinin etkisini
değiştirmez veya etki additif değildir
79
ƒ Hormon - reseptör etkileşmesiyle adenil
siklaz veya diğer efektör moleküller etkinleşir
ƒ Reseptörler efektörlere GTP bağlayıcı
protein (G proteini) vasıtasıyla bağlanır
Efektörler
- Adenil siklaz (αs),
- K+ kanalı (αi, αo)
- Fosfolipaz Cβ1 (αq)
80
Adenil Siklaz
ƒ Membranının iç yüzünde yer alır
ATP ‘den cAMP oluşturur
ƒ Bazı hormonlar cAMP üretimini uyarır (s)
Bazısı inhibe eder (i)
81
Adenil Siklazı Uyaran Hormonlar
ACTH
Kalsitonin
ADH
LH
β-Adrenerjikler
LPH
CRH
MSH
FSH
PTH
Glukagon
TSH
hCG
82
Adenil Siklazı İnhibe Eden Hormonlar
α2- Adrenerjikler
Anjiotensin II
Asetilkolin
Somatostatin
83
G Proteinleri
ƒ Membranın sitozolik yüzeyine bağlıdır
ƒ Gs (uyarıcı) veya Gi (inhibe edici)
ƒ α, β, γ altbirimlerinden oluşan trimer
ƒ β, γ daima beraber bulunur
.
84
ƒ Hormon-reseptör bağlanması ile
reseptörde konformasyonel değişim olur
ƒ GDP bağlamış olan α altbirim ayrılır,
GTP bağlar ve adenil siklaza bağlanarak
enzimi aktifler
αβγ
GTP
α GTP + βγ
GTPaz
85
Gs
ƒ αs GTPaz etkinliğine sahip
ƒ αs - GTP
GTP
GDP’ye hidrolizi ile etkisizleşir
ƒ αs-GDP tekrar βγ dimerine bağlanarak
inaktifleşir
αsβγ -GDP = Trimerik Gs meydana gelir
86
Gi
ƒ Gs proteininden daha fazla Gi bulunur
ƒ Hi ‘nun Ri’ye bağlanması ile, Gi aktiflenir
ƒ αi – GTP bağlar ve β γ ayrılır
ƒ βγ , αs ‘e bağlanarak αβγ rejenere edilir,
adenilsiklaz aktivitesi ortadan kalkar.
87
Adenil siklaz aktivatörleri
Kolera toksini
G protein αs arginin aminoasidiniADP
ribozilasyonu ile αs’in GTPaz aktivitesini
bloke eder ,
GTP sürekli aktif formda kalır, adenil siklaz
sürekli uyarılı, cAMP artar,
Lümene su ve Na atılır
diyare
88
Boğmaca toksini
Gi ,αi’nın sistein aminoasidi ADP ribozilasyonu ile
inaktif GDP-bağlı durumda tutar,αβγ ayrılamaz,
Gi adenil siklazı inhibe edemez,
Adenil siklaz sürekli etkinleşir,
Öksürük,solunum yolu epitel hücrelerinde
mukus sekresyonu artar
89
ADP ribozilasyon
NAD+ yapısından ADP-riboz birimini
α subunitin arginin/sistein aminoasidine taşıyan
enzimatik aktivite
90
G protein 1. adım
ligant
reseptor
αγ
GDP β
91
G protein 2. adım
αγ
GTP β
GDP
92
G protein 3. adım
efektör
γ
β
α
GTP
İkinci haberci
93
G protein 4. adım
GDP
2 ATP
GRK
2 ADP
P P
Arrestin
γ
β
α
GDP
Pi
stops
GTPase activating protein (GAP)
95
Protein Kinaz A
ƒ İki düzenleyici (R ), iki katalitik (C) altbirim
ƒ 4cAMP bağlar
4 cAMP + R2C2
R2 . (4 cAMP) + 2C
96
ƒ Bağlanma ile katalitik altbirimler serbestleşir
ƒ Aktif C altbirimi Mg2+ varlığında ATP’nin γ
fosfatını çeşitli proteinlerdeki serin veya
treonin kalıntısına aktarılmasını katalizler
97
98
Fosfodiesterazlar
cAMP’yi arttırarak etkiyen hormonların bu
etkileri cAMP’nin fosfodiesterazlarla hidrolizi
ile ortadan kalkar.
fosfodiesteraz
cAMP
5’AMP
Kafein gibi metillenmiş ksantin türevleri
fosfodiesteraz inhibitörleridir, cAMP düzeyini
arttır, hormon etkilerini taklit eder veya bu
etkileri uzatır
99
Reseptörlerin Desensitizasyonu
Örnek:
Epinefrin düzeyi kanda uzun süreli yüksekse :
ƒ β-adrenerjik reseptör kinaz (β-ARK)
reseptörü fosforilleyerek β-arrestin
molekülünün bağlanabileceği bölge oluşturur.
ƒ β-arrestin bağlanması reseptör ile G
proteinleri arasındaki etkileşmeyi engeller
.
100
Hormon bağlanmamış reseptör fosforillenmez!
ƒ Arrestin bağlamış reseptörler endositoz ile
veziküllere alınır,
Burada defosforillenir ve membrana döner
Hücre tekrar hormona duyarlı hale gelir.
101
İkinci habercisi cGMP olan hormonlar
Guanil siklaz
GTP
cGMP
İki tip guanil siklaz :
1. Suda çözünür (sitozolde)
2. Membran bağlı
102
Atriyopeptinler
ƒ Atriyumdan salgılanır
- Natriürez
- Diürez
- Vazodilatasyon
- Aldosteron salgılanmasının inhibisyonu
ƒ Atriyalnatriüretik faktör (ANF)
membrana bağlı guanilsiklaza bağlanarak
muhtemelen cGMP artışına neden olur
•
103
cGMP etkilerini cGMP’ye bağımlı
protein kinaz (PKG) ile yapar
Aktif PKG , PKA ya benzer yapıya sahip,
Substratlarındaki serin ve treoninleri fosforiller
104
NO cGMP artırır
NO damar endotel hücresinde sentezlendikten
sonra difüze olur,
kalp kası ve damar düz kas hücreleri
sitozolünde guanil siklazın ‘’Hem’’ yapısına
bağlanır, cGMP artar
105
cGMP’nin etkileri
¾ PKG, miyozin hafif zincir proteinlerini
fosforilleyerek düz kas gevşemesine ve
vazodilatasyona neden olur
¾ Ca2+ iyonlarının sitozolden hücre dışına
taşınmasını uyarır
106
‰
cGMP , cGMP fosfodiesteraz ile yıkılır
‰
Viagra
cGMP fosfodiesteraz’ı inhibe eden
sildenafil içerir
107
Guanil siklaz
108
C. İkinci Haberci olarak Kalsiyum Veya
Fosfoinositoller
İyonize Kalsiyum‘un ilgili olduğu olaylar
- Kas kasılması
- Uyarı salgılama
- Kan pıhtılaşması
- Enzimatik aktivite
- Membran uyarılması
- Hücre içi ikinci haberci
109
Sitozolik Ca2+ düzeyi 3 yolla değişebilir
1. 2-C sınıfı hormonlar , Ca2+’nın membrandan
geçişini artırır
Bu işlem Ca2+ için yüksek kapasite fakat
düşük affinite gösteren Na+- Ca 2+ değişim
mekanizması ile yapılır
α1 – Adrenerjik katekolaminler
Anjiyotensin II
Antidiüretik hormon (ADH, vazopressin)
Asetilkolin (müskarinik)
Gastrin
Gonadotropid salıcı hormon (GnRH)
110
2. Ca2+ - 2H+ ATP’az pompası :
Ca2+ hücre dışına atar.
Bu pompanın Ca2+’ya affinitesi yüksek,
kapasitesi düşüktür
Muhtemelen hücre içi düzeyin ince
ayarından sorumlu
3. Ca 2+ mitokondride ve ER’daki havuzlarda
depo edilir veya buradan çıkarılır
111
Kalmodulin
• 4 Ca2+ Bağlama bölgesine sahip, protein
• Bölgelerin dördünün de Ca2+ ile dolmasıyla
konformasyonel değişiklik olur
Molekül α-sarmal yapı kazanır
• Yapı değişikliği kalmoduline bağlanan
enzimleri aktif veya inaktif yapar
• İşlem c AMP’nin protein kinazA’ya
bağlanmasına benzer
112
Aktif
Kalmodulin
İnaktif
113
Kalmodülin ve Ca 2+ tarafından düzenlenen
enzimler
Adenil siklaz
Ca2+’ya bağımlı protein kinaz
Ca2+ - Mg 2+ ATPaz
Ca 2+ - Fosfolipide bağımlı protein kinaz
Siklik nükleotid fosfodiesteraz
Gliserol-3-fosfat dehidrogenaz
Glikojen sentaz
Guanilil siklaz
114
Miyozin kinaz
NAD kinaz
Fosfolipaz A2
Fosforilaz kinaz
Fosfoprotein fosfataz 2B
Piruvat karboksilaz
Piruvat dehidrogenaz
Piruvat kinaz
115
Kalmodulinin katıldığı olaylar
• Enzim aktivasyonu
• İyon taşınması
• Birçok çatı elemanı etkinliğini düzenler.
β-adrenerjik denetim altındaki
- Hücrede konformasyon değişikliği
- Hücre hareketliliği
- Mitozis
- Granül salınması ve endositoz
116
Kalsiyum hormon etkisinin aracısıdır
Vazopressin ve α1-agonistler
Karaciğer hücrelerine bağlandığında sitozolik
Ca2+ düzeyi ve fosforilaz a aktivitesi artar
117
fosforilaz b kinaz
Fosforilaz b
İnaktif
fosforilaz a
aktif
dönüşümü ile fosforilaz enzimi aktifleşir. Bu
kinazın δ altbirimi kalmodülin içerir
Etkinliği ile hücre içi Ca2+ düzeyi artar
118
Hücreye Kalsiyum Sağlanması
ƒ İlk kaynak hücre içi organellerdeki depolar
Erken etki için kullanılır!
ƒ Uzun süreli etki için
- Hücre içine Ca2+ taşınması
- Ca2+’nın dışa atılımının inhibisyonu gerekir
Bu cAMP’ye bağımlı bir olaydır
119
120
Fosfatidilinozitol ürünleri ve Ca 2+ Yoluyla
Etkiyen Hormonlar Hormonlar
Asetil kolin
α1-Katekolaminler
ADH
121
IP3 and Protein kinaz C farklı hücrelerde
farklı etki gösterir
IP3
1. Damar düz kas
2. Düz kas
3. İskelet kası
4. Platelet
kasılma
kasılma
kasılma
kasılma
122
Protein Kinaz C
Hücre büyümesi, farklılaşma (differentiation)
1. Platelets
2. mast hücresi
3. düz kas
4. Sinir hücresi
5. adipos doku
6. karaciğer
serotonin salınması
histamin salınması
kasılma
nörotransmitter salınımı
yağ sentezi
glikojen sentezi
123
D. İkinci haberci olarak Tirozin Kinaz
Aktivitesi
•
•
•
•
•
İnsülin
EGF
IGF-I
FGF
PDGF
Epidermal growth faktör
İnsülin benzeri büyüme faktörü I
Fibroblast büyüme faktörü
Trombosit kaynaklı büyüme faktörü
reseptörleri tirozin kinaz etkinliğine sahiptir.
124
ƒ Büyüme hormonu
ƒ Prolaktin
ƒ Eritropoetin
ƒ Sitokinler
Reseptörleri tirozin kinaz aktivitesi göstermez
Fakat :
Hormonlar reseptörlerine bağlandıkları zaman
sitoplazmik tirozin kinaz aktiviteli enzim
aktivasyonuna neden olur
125
• Büyümenin kontrolü
• Farklılaşma
• inflamasyon
Olaylarına katılan ligantları bağlayan
reseptörlerin tirozin kinaz aktivitesine sahip
olduğu,
veya
Tirozin kinaz aktivitesine sahip proteinlerle
birlikte oldukları görülmüştür
126
Tirozin kinazlar tirozin kalıntılarını fosforillerler
ƒ Tirozin kinaz etkinleşmesi
Fosforilasyon - defosforilasyon şelalesini
Başlatır
ƒ Memelilerde tirozin fosforilasyonu nadir
görülür.
Tüm aminoasidlerin fosforilasyonunun
% 0.03’den azını oluştururlar.
127
Tirozin kinaz aktivitesi 2 yoldan yürür
1. Ras Aktivasyonu
2. JAK aktivasyonu
128
RAS AKTİVASYONU
4 Tip reseptör mevcut
EGF, PDGF, FGF reseptörleri monomerik,
İnsülin reseptörleri tetramerik yapıdadır.
N terminal ligant bağlama, C terminal ise
enzimatik aktivite bölgesidir.
129
EGF İnsülin PDGF FGF
130
İNSÜLİN RESEPTÖRÜ
Heterotetramerik , glikoprotein yapısında
α-altbirimi
Sistein zengin bölgeler hormon bağlar
β altbirimi
Tirozinkinaz aktivitesi ve otofosforilasyon
özelliği taşır
Burada yer alan lizin tirozin kinaz
aktivitesinden sorumludur, başka aa gelmesi
ile tirozin kinaz aktivitesi kaybolur
131
132
133
ƒ Reseptörlerin fosforillenmiş tirozinlerine
SH2 bölgesi taşıyan proteinler bağlanır
SH2 bölgesi ilk kez sarkoma oluşumuna
sebep olan , Rous sarkoma virüs onkogeni
tarafından kodlanan src proteininde
bulunmuştur
SH2 ve SH3 Sinyal ileti proteinlerinde
bulunur
134
Grb-2 Büyüme faktörü reseptörüne bağlanan
proteindir, SH2 ve SH3 bölgelerine
sahip
Grb-2 SH2 ile fosforillenmiş tirozinlere,
SH3 ile mSOS proteinine bağlanır
mSOS G proteinidir, p21 Ras proteinine
bağlanır, GDP-GTP değişimini
katalizler
135
Ras Proteinleri
GTPaz aktivitesine sahip aile
M= 20kDa-35kDa
p21 Ras GTP bağlı aktif şekli hücre
büyümesi ve farklılaşmasını uyarır
p21Ras MAPKKK (Raf1)
MAPKK
MAPK kinaz aktivasyon yolunu açar
136
MAPKKK
MAPK
MAPKK
serin
treonin ve tirozin
fosforiller
137
MAPK
Çekirdeğe girerek :
transkripsiyon faktörlerini (TF) fosforiller
Sonuçta :
Gen
transkripsiyonu
translasyonu
artar
İnsülin ve büyüme faktörlerine cevap oluşur
138
Ras aktivasyonunda
• Doku duyarlığını arttıran amplifikasyon olur
• Diğer sinyal mekanizmaları ile etkileşim
içinde
139
Mutant p21 Ras
• Glisin yerine valin yer alır
• Çok düşük GTPaz aktivitesi
• Akciğer, kolon ve pankreas kanserleri ile
mutant Ras 21arasında ilişki var
GAP proteini
• Ras proteininin GTPaz aktivitesini artırır
• Mutant p21 Ras proteinini etkilemez
140
141
(IRS) Insulin Receptor Substrate
IRS-1
Ras aktivasyonuna katılır
IRS-2
• Lipit kinaz aktivasyonuna katılır
• Fosforillenmiş IRS-2’ye SH2 bölgesi ile
fosfatidil inozitol 3 kinaz (PI-3K) bağlanır
fosfatidil inozitol 4,5 bifosfatı (PIP2) fosfatidil
inozitol 3,4,5 tri fosfata çevirir (PIP3)
PIP2
PI-3K
PIP3
142
PIP3
• İkinci haberci
• İnsülin reseptörlerinin endositozu sağlanır
Bu şekilde hedef doku duyarlığı kontrol altında
tutulur
143
EGF Reseptörü
• Aktif reseptörün fosfatlanmış tirozinleri
Fosfolipaz C-γ1 (PLC-γ1) izoformunu SH2
bölgesinden bağlar
• Enzim SH3 bölgesi fosforillenerek aktiflenir,
membrana bağlanır
PIP2
Sonuç
PLC
IP3
+
DAG
Sitozolde Ca2+ artar
Protein kinaz C aktiflenir
144
Meme , Yumurtalık , Mide Kanserleri
ErbB Proteini
• Viral onkogen tarafından kodlanır
• EGF reseptörüne benzer, EGF bağlamaz
• Sürekli tirozin kinaz aktivitesi gösterir
• Kontrolsüz büyümeye yol açar
145
2. JAK Aktivasyonu
Büyüme hormonu
Prolaktin
Eritropoetin
Sitokinler
Reseptörleri :
• Tirozin kinaz aktivitesi göstermez
• Tirozin kinaz aktiviteli sitoplazmik proteinlere
bağlanırlar
JAK1
JAK2
TYK
146
• Hormonun reseptöre bağlanması ile JAK kinaz
fosforillenerek aktifleşir
• Aktif JAK-P reseptörün tirozinlerini fosforiller
• Fosforillenmiş bölgelere SH2 bölgesi bulunan
proteinlere bağlanır
-STAT ; GRB 2 ; PLC-γ ; Pl-3K ; GAP
• Reseptöre bağlanan STAT, fosforilenir,
dimerize olur, çekirdeğe girerek
transkripsiyonu düzenler.
147
Download