b hücrelerinin toll-like reseptörler aracılıklı aktivasyonu

B HÜCRELERİNİN
TOLL-LİKE
RESEPTÖRLER
ARACILIKLI
AKTİVASYONU
Şule Yavuz
MÜTF Romatoloji BD
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
B HÜCRESİNİN GÖREVLERİ
Karanlık yüz
Aydınlık yüz
v
ü
ü
Antikor üreten hücreler
Enfeksiyonlara karşı
1.basamak
Aşılama
v
Otoantikor üretimi ve
otoimmunite gelişimi
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
B hücre gelişimi
Cytoplasmic IgM Surface IgM
Stem
cell
Pro-B cell
Pre-B cell
Immature
B cell
Surface IgM, IgD
Mature
B cell
Kemik iligi
(Roitt et al, 2002; Silverman & Weisman, 2003)
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
B hücre gelişimi
1.
1.
1.
1.
Cytoplasmic IgM
Surface IgM, IgD
Surface IgM
1. ANTIG
EN
1. Mature
Stem1.
cell
1.
Pro-B cell
1. Pre-B cell
1. Immature
2. B cell
1.
Bone marrow
1. Activated B cells
(germinal centre cells)
1.
1.
2. B cell
1. IgM + IgE
IgM 1. IgM + IgD
1. IgM + IgA
IgM 1.
1. IgM + IgE
IgM + IgD
1. IgM + IgA
Memory B cells
1.
1.
IgM
1.
IgG
1.
IgA
1.
IgE
Plasma cells
1.
Peripheral lymphoid tissue
(Roitt et al, 2002; Silverman & Weisman, 2003)
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
FIGURE 7-15
%55 kayıp
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
B Hücre Aktivasyonu ve Germinal Merkez
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
ATAK VEYA TOLERANS???
Reseptör düzenleme (editing)
¢ Silinme (deletion)
¢
Edinsel immun sistem doğal immun sistem reseptörleri
tarafından kontrol edilir !
Janeway,1989
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TOLL-BENZERİ
RESEPTÖRLER
Mikrobiyal ürünler için doğal
immun istemi uyarma yeteneği
olan reseptörler olarak
tanımlanmıştır
¢ 10 > tanımlanmış üye
¢ TLR2 veya TLR4 DNA- hücre
membranı
(LTA, LPS …)
¢ TLR7 ve TLR9- endozomal
kompartman
(tek sarmal RNA ve CpG içeren )
¢
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TOLL SİNYAL YOLLARI
TLR4
TLR5,TLR7,TLR9
TLR1
TLR6
MyD88
MD2
TLR2
?
MyD88
MyD88
IRAK-4
IRF-3
TRAF-6
IкB
NF-кB
NF-кB
Enflamatuar sitokinler
IRF-3
INF
INF-ß (TRIF)
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
Dendritik Hücre Matürasyonu ve Adaptive T Hücre İndüksiyonu
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
NAİVE B HÜCRELERİ İÇİN
TOLL
Naive B hücrelerinde TLR ekspresyonu az
¢ LPS ve CpG’ye yanıt BCR uyarılması veya T
hücre yardımı olmadan yok
¢ BCR bağlanması ile TLR-9 ↑
¢ DC üretilen IL-6 ve IL-12 ; 3.sinyal
¢
Lanzavecchia A, 2005 Eur J Immunol
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
B hücre proliferasyonu
İzotip değişim (IgG-IgA)
Ab sekrete eden hücreye
farklılaşma
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
1.sinyal
2.sinyal
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
NAİVE B HÜCRESİ UYARILMASINDA
TLR-ARACILIĞI GEREKLİ Mİ?
CpG, BCR ve T hücresi varlığında
naive B hücre çoğalmasına potent
etki yaratır
Lanzavecchia, 2006 Eur J Immunol
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TLR UYARISI NAİVE B HÜCRESİ AKTİVASYONU İÇİN
3. SİNYAL ?
ABCB1+
CpG T hücre kaynağından
bağımsız olarak antikor
oluşturmada gerekli
naive (TN)CD4+CD45RO–CCR7+, central memory
(TCM) CD4+CD45RO+CCR7+CXCR5–, follicular help
(TFH) CD4+CD45RO+CCR7+CXCR5+, effector
memory (TEM) CD4+CD45RO+CCR7–, regulatory T
cells (TREG) CD4+CD45RO+CD25
Ruprech
Lanzavecchia
Eur Immunol 2006
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
Izotip değişme ve antikor sekresyonu CpG/BCR /T-hücre
kombinasyonu ile daha belirgin
anti-Ig and T cell help (open
triangles), anti-Ig and CpG
(open squares), anti-Ig, T
cell help, and CpG (filled
diamonds).
IgM, filled bars, IgG,
hatched bars, IgA, open bars
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TİMUS BAĞIMLI B HÜCRESİ VE
TLR
Hafıza (memory) B hücrelerinde
TLR2,TLR6,TLR7,TLR9 ve TLR10 ekprese
edilir
¢ CpGDNA veya R848 çoğalma ve antikor-üreten
hücreye dönüşümü stimüle eder
¢ CpG DNA ile uyarı sonrası IgM(+) hafıza B
hücresinin isotip değişimi IL-2 ve IL-15
gerektirirken, çoğalması sitokin varlığı
olmadan gelişir
¢
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TOLL UYARISININ KAYNAĞI FARK
EDER Mİ???
MyD88 (myeloid differentiation primary
response gene 88) – adaptör protein
¢ MyD88 KO- Th aktivasyonu ve INF-γ eksik
¢
MyD88 B hücrelerinde (-)
q MyD88 CD11c + DC (+)
q
Medzhitov, Nature 2005
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
T aktivasyonu yeterli değil
Defektif Ab oluşumu B bağımlı
T hücre bağımlı antijen spesifik
antikor yanıtı Th dışında TLR
aktivasyonu gerektirir.
Medzhitov, Nature 2005
TD ve TI Ag için farklı TLR aktivasyonu mMT
SONUÇ
q
q
q
q
Protein antijen yanıtında B hücresinden
kaynaklı TLR direk etkili
TLR fonksiyonu IgG2 >IgM>IgG1
IgA ve IgE TLR’den bağımsız
CR2 varlığı da önemli
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TLR VE SINIF DEĞİŞTİRME
REKOMBİNASYON
MyD88 –TLR sinyal
adaptor protein
¢ TLR ve MyD88 IgG2a
ve IgG2b için gerekli
IgM otoantikorlar Φ
¢ CpG, T-bet
ekspresyonunu ↑ ve
IgG2a ↑
¢ TLR-9 ve IL-10 –Cγ1-23 gen transkripsiyonu
¢
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TLR VE SINIF DEĞİŞTİRME
REKOMBİNASYON
Aktive pDC aracılıklı
INF-α ve IL-6
BAFF
APRIL
CD-40 bağımsız
class-switch recombination
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
ANTİJEN GEREKLİ Mİ?
Hafıza B hücreleri antijen bağımsız çoğalıp
farklılaşabilir.
- Mikrobiyal ürünler
- By-stander T hücresi
¢ Plasma hücre havuzunun devamı ve serum antikor
seviyesinin korunması
¢
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TLR UYARISI :
•DC matürasyonu ve Th
aktivasyonu
•B hücresinde eksprese olan TLR
ile direk B hücre aktivasyonu ve
Ab oluşumu
•Serolojik hafıza için gerekli
(IgM, IgG1 ve IgG2)
Medzhitov, Nature 2005
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
İKİLİ BCR-TLR BAĞLANMA MODELİ
Fizyolojik önemi ne?
Virüslere hızlı antikor
yanıtı oluşturmada
¢ TLR’nin rolü net değil
¢
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TI ANTİJEN YANITI
Polisakkarid antijenler
(Strep.pneumonie)
¢ Multivalan BCR bağlanması
¢ Aşılamada TLR agonist
içerenler Ab oluşturma
potansiyelinde önemli
¢ Sitokinlerin önemi var
¢
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
SİSTEMİK OTOİMMUN HASTALIKTA
ENDOSOMAL TLR’LER
¢
TLR7 ve TLR9 - B hücresi (BCR) ve pDC (FcγRIIA)
Endojen orijinli Ag
¢
Endosomal kompartman
DNA-kromatin-IgG- otoreaktif B hücrelerini aktive
ederek IgG-RF sebep olur.
BCR-TLR9 bağlanması
(Leadbetter EA , Nature 2005)
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TLR VE SLE
KORUYUCU? PATOJENİK?
¢
¢
¢
¢
¢
lpr/lpr fare DNA ve RNA Ab
MyD88-/-lpr/lpr TLR7 ve TL9 sinyali Φ
TLR9 eksik lpr/lpr farede anti-DNA Ab
yapılamaz ancak anti-RNA Ab
TLR9-/- (MRL /lpr farede) ↑anti-dsDNA
TLR7 knock-out fare çalışmalarında TLR7
koruyucu görünüyor
( Pawar ve ark,J Am Soc Nephrol.2006)
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
ØTLR-9 anti-kromatin antikorların
sekresyonunu arttırıyor
ØTLR otoimmunitede değişik
fonksiyonları var ve tek başlarına
otoimmuniteyi tetiklemiyorlar (??)
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TLR-7 VE OTOANTİKOR GELİŞİMİ
Ø
Ø
Y-kromozom ilişkili
otoimmunite hızlandırıcı
lokus (yaa) TLR-7
lokusunda duplikasyon ve
translokasyon
TLR-7 gen doz ve
ekspresyonu SLE
patogenezine katkıda
bulunur
Subramanian, PNAS 2006
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
TLR VE OTOİMMUNİTE
TLR sinyal ileti sisteminin blokajı tedavide
kullanılabilir mi?
¢ Klorokin endosomal asidifikasyonu arttırır
(TLR7 ve TLR9 blokajı)
¢ BCR-TLR stimulasyonu otoantikor için
yeterli mi?
¢ DC ve T hücreleri de işin içinde ne ölçüde
bloke edilmeli?
¢
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
Polisakkarit ve
Protein ag karşı Ab
Φ
-
Nükleik asit
Ab Φ
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
SON SÖZ
Değişik yollar aktivasyon ve
farklılaşmada gerekli
¢ Antijen türü, BH nin
lokalizasyonu ve
farklılaşmadaki basamak
¢ TLR, BCR uyarısı ve /veya
TH yardımı sınırlı ise 3.
sinyal
¢ İzotip değiştirmede
düzenleyici
¢
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara
ANKARA ROMATOLOJİ SEMPOZYUMU “Sağlıkta ve Romatizmal Hastalıklarda B Hücreleri”
25 Nisan 2008 Ambassadore Otel , Ankara