Gen Klonlama

Gen Klonlama
mRNA
Gen Klonlamanın Ana Basamakları
1. Klonlanacak DNA doku ve hücrelerden izole
edilir
2. Özgül DNA parçaları oluşturmak için
restriksiyon enzimleri denilen proteinler
kullanılır. Enzim DNA moleküllerini özgül
nükleotid dizilerinden tanır ve keser
Gen Klonlamanın Ana Basamakları
3. Restriksiyon enzimleri ile oluşturulan DNA
parçaları vektör veya taşıyıcı molekül denilen
DNA molekülü ile birleştirilir. Bir DNA parçası ile
birleştirilmiş olan vektör bir Rekombinant DNA
molekülüdür.
Gen Klonlamanın Ana Basamakları
4. Rekombinant DNA bir molekülü bir konak
hücreye aktarılır. Konak içerisinde rekombinant
DNA kendini eşler ve böylece düzünelerce
kopyası yani klonu oluşur.
5. Hücreler çoğaldıkça içlerindeki rekombinant
DNA da çoğalmış olur.
6. Klonlanmış DNA konak hücrelerden izole
edilir.
Plazmit DNA
Plazmit DNA
Bazı Restriksiyon Enzimleri
Klonlamanın Basamakları
• Hücreden mRNA’ları izole et
• mRNA’lardan DNA sentezle
• DNA’ları ve plazmid DNA’ları uygun
restriksiyon enzimleri ile kes
• DNA’yı plazmide kaynaştır
• Yeni plazmidi bakteriye transfer et
• İstediğin DNA içeren plazmidi içeren bakteriyi
saflaştır.