KimyaKongreleri.org

advertisement
AP-TR-011
Polifenolik Bileşiklerin Antioksidan Kapasitelerinin Belirlenmesinde Fiber Optik Sensör Esaslı CUPRAC
Yönteminin Geliştirilmesi
Esin Kondakçı, Mustafa Bener, Mustafa Özyürek, Kubilay Güçlü, Reşat Apak
İstanbul Üniversitesi Mühendislik Fakültesi Kimya Bölümü Analitik Kimya Anabilim Dalı
Antioksidanlar oksidatif stres koşulları altında hücreleri ve diğer makro molekülleri ROS türlerinin saldırısına
karşı koruyan ve insan sağlığına faydalı olan bileşiklerdir. Organizmadaki antioksidan ve pro- oksidan
dengenin bozulması, Alzheimer ve Parkinson gibi çeşitli hastalıkları tetikleyen reaktif oksijen türlerinin (ROS)
oluşumuna neden olur. Oluşan reaktif türlerin birikimi canlı hücrelerdeki biyolojik makro moleküllerde (yağ
asidleri, lipidler, proteinler ve DNA) onarılamayan hasarlara sebep olurlar [1]. Bu çalışmada gıda örneklerinde
toplam antioksidan kapasite tayini için düşük maliyetli ve geniş kullanım alanı bulabilecek reflektans
ölçümüne dayanan sensör esaslı- spektrofotometrik yöntem (fiber optik sensör esaslı - CUPRAC (bakır (II)
iyonu indirgeme antioksidan kapasite) yöntemi) geliştirilmiştir. Kromojenik oksidasyon aracı olan bakır (II )neokuproin (Cu (II )- Nc) kompleksi katyon değiştirici polimerik bir membran olan nafyon film üzerinde
tutturulduktan sonra antioksidan varlığında redoks reaksiyonu sonucunda oluşan Cu (I ) - Nc kelatının
reflektans değerlerindeki değişmeler 530 nm’de ölçülmüştür.
Çeşitli antioksidan bileşiklerin (bazı flavonoidler, hidroksisinnamik ve hidroksibenzoik asitleri içeren gıda
polifenolleri) troloks eşdeğeri antioksidan kapasite (TEAC) değerleri reflektans ölçümüne dayanan fiber optik
sensör esaslı- CUPRAC yöntemi ile belirlenerek optik sensör esaslı - CUPRAC yöntemi [2] bulgularıyla
karşılaştırılmıştır. Önerilen yöntem için lineerlik, toplamsallık, kesinlik ve geri kazanım parametreleri test
edilerek yöntem validasyonu yapılmıştır. Standart antioksidan bileşikler için geliştirilen yöntem bunların
sentetik karışım çözeltilerine ve meyve suları gibi daha kompleks matrikslere uygulanmıştır.
Morin bileşiğinin molar absorplama katsayısı troloks, kuersetin, kateşin, rutin, kafeik asit ve fisetin
bileşiklerinden daha yüksek bulunmuştur. Morin bileşiğinin molar absorplama ka tsayısı, lineer doğru
denklemine göre 5.97 x 10 5 L mol-1 cm-1 iken Kubelka- munk doğru denklemine göre 2.96 x 10 5 L mol -1 cm1
’dir. Çalışılan bileşiklerin TEAC değerleri sırasıyla; morin > kuersetin > rutin > troloks > kafeik asit > fisetin >
kateşin şeklindedir.
KAYNAKLAR
[1] Halliwell, B., Archives of Biochemistry and Biophysics, 476, 107 -112, 2008.
[2] Bener, M., Özyürek, M., Güçlü, K., Apak, R., Analytical Chemistry, 82 (10 ), 4252-4258, 2010.
80
KimyaKongreleri.org
AP-EN-011
Development of the Fiber Optic Sensor- Based CUPRAC Assay for Determination of Antioxidant Capacity of
Polyphenolic Compounds
Esin Kondakçı, Mustafa Bener, Mustafa Özyürek, Kubilay Güçlü, Reşat Apak
Istanbul University Faculty of Engineering Department of Chemistry Division of Analytical Chemistry
Antioxidants are human health beneficial compounds that can protect cells and other macromolecules from
the damage of the reactive oxygen species (ROS) under oxidative stress conditions. The imbalance of
antioxidant and pro- oxidant in the organism causes ROS species which are induced to various diseases like
Alzheimer and Parkinson. Accumulation of reactive species causes irreversible damage on biological
macromolecules (e.g., fats, lipids, proteins, and DNA) [1]. In this study, a low - cost and widely applicable
sensor- based spectrophotometric method (fiber optic sensor- based ‘cupric reducing antioxidant capacity’
(CUPRAC) method) by measuring reflectance was developed for the total assay of antioxidants in foodstuffs.
The chromogenic oxidizing reagent, copper (II )- neocuproine (Cu (II )- Nc) complex, was immobilized onto a
cation- exchanger film of Nafion, and the reflectance changes associated with the formation of the highlycoloured Cu (I )- Nc chelate as a result of reaction with antioxidants was measured at 530 nm.
The trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) values of various antioxidants (dietary polyphenols
including flavonoids, hydroxycinnamic and hydroxybenzoic acids) using the fiber optic sensor- based CUPRAC
assay was compared to those of the optic sensor based - CUPRAC assay [2]. The proposed assay were
validated through linearity, additivity, precision and recovery. The test developed for single standard
compounds was applied to their synthetic mixtures, then to more complex matrixes.
Morin had higher molar absorption coefficient than trolox, quercetin, catechin, rutin, caffeic acid, and
fisetin. The molar absorption coefficients of morin were 5,97 x 105 L mol -1 cm-1 to linear equation while 2,96
x 10 5 L mol -1 cm-1 to Kubelka-munk equation. The TEAC values of antioxidants were morin > quercetin > rutin
> trolox > caffeic acid > fisetin > catechin, respectively.
REFERENCES
[1] Halliwell, B., Archives of Biochemistry and Biophysics, 476, 107 -112, 2008.
[2] Bener, M., Özyürek, M., Güçlü, K., Apak, R., Analytical Chemistry, 82 (10 ), 4252-4258, 2010.
81
KimyaKongreleri.org
Download