bilimsel araştırma projesi sonuç raporu

ANKARA ÜNİVERSİTESİ
BİLİMSEL ARAŞTIRMA PROJESİ
SONUÇ RAPORU
Proje Başlığı
Pankreas ve Kolon Kanserinde Serum TGF-β, E-Cadherin Düzeylerinin Ölçülmesi
Proje Yürütücüsünün İsmi
Prof.Dr. Nevin ERK
Ankara Üniversitesi Eczacılık Fakültesi Analitik Kimya Ana Bilim Dalı
Yardımcı Araştırmacıların İsmi
Akın Oğul TARHAN
Dr. Aylin SOYAĞIR
Proje Numarası
12Ö3336002
Başlama Tarihi
02.01.2012
Bitiş Tarihi
02.01.2014
Rapor Tarihi
Şubat 2014
Ankara Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri
Ankara - 2011
I. PROJENİN ADI: “Pankreas ve Kolon Kanserinde Serum TGF-β, E-Cadherin
Düzeylerinin Ölçülmesi”
Özet:
Son zamanlarda yapılan çalışmalar kanser patogenezinde diğer etkilerin
yanında kimyasal mediyatörlerinde etkisine odaklanmıştır. Tümörlü dokuda Ekaderin ekspiresyonu azalmaktadır. Bu etki TGF-β ile kolaylaşmaktadır. TGF-β,
kanserde çift yönlü rol oynar. Hem tümör süpresor etki hem de tümör başlatıcı etki
göstermektedir. Normal hücrelerde TGF-β hücre büyümesini sınırlarken kanserli
hücrelerde hücre invazyonunu artırmaktadır. Yaklaşık 200 kanser türü vardır.
Kolorektal kanserler Amerika’da erkeklerde üçüncü kadınlarda ise dördüncü sırada
görülen kanser türüdür. Ülkemizde ise erkeklerde yedinci kadınlarda ise altıncı
sıradadır. Pankreatik kanserler Amerika’da kanser ilişkili hastalıklardan ölümlerde
dördüncü sıradadır. Prognozu çok kötüdür ve 1-5 yıllık hayatta kalım %6-25
civarındadır. Bu nedenle TGF-β ve E-kaderinin ekspresyonunun regülasyonu
önemlidir ve pankreas ve kolon kanserinden korunmada yarar sağlayıcı etki
gösterebilir. Biz bu nedenle pankreas ve kolon kanseri ile ilgili parametreler olan
TGF-β ve E-kaderinin serum düzeylerini elisa yöntemiyle çalışmayı amaçladık.
Title of Project:
Measurement Of TGF-Β, E-Cadherin Levels On Serum in Pancreas and
Colon Cancer.
Summary:
Cancer is the uncontrolled growth of abnormal cells in a body.
Recently, in addition to other effects, researches focused on effects of
chemical mediators on the pathogenesis of cancer. Expression of E-Cadherin
decreases in tumor tissue. This effect is facilitate by TGF-β. TGF-β plays dual role in
cancer. Both tumor supressor effect and tumor promoting effect. Expression of TGFβ prevents inhibition of growth in normal cells but in cancer expression of TGF-β
increases invasion of cell. There are over 200 types of cancer. Colorectal cancer is
the third leading cause of cancer in males and fourth in females in the United State.
Our country, Colorectal cancer is the seventh leading cause of cancer in males and
sixth in females. Pancreatic cancer is the fourth most common cause of cancerrelated deaths in the U.S and the eighth worldwide Pancreatic cancer has an
extremely poor prognosis: for all stages combined, the 1- and 5-year relative survival
rates are % 6-%25.
Therefore regulation TGF-β, E-Cadherin expression is important and may be
used protect from pancreas and colon cancer. We investigated TGF-β,E-Cadherin in
serum by Elisa which they are pancreas and colon cancer related parameters.
II. AMAÇ VE KAPSAM:
Bu projenin amacı pankreas ve kolon kanserinde serum E-Cadherin, TGF-β
düzeylerini
değerlendirmek
ve
kanser
gelişimindeki
etkilerini
araştırmaktır.
Çalışmamızda kolon ve pankreas kanserine sahip hastaların serum örneklerinde ECadherin ve TGF-β düzeylerinin ELISA yöntemiyle ölçülerek sağlıklı kontrollerle
karşılaştırılması ve sonuçların yorumlanması planlandı.
Bu kapsamda, Ankara Üniversitesi Tıbbi Onkoloji Kliniği pankreas ve kolon
kanserine sahip hastalarından ve sağlıklı gönüllülerden alınan kan örneklerinden
kanser gelişiminde etkili olduğu düşünülen E-Cadherin, TGF-β düzeylerinin serum
değerleri ELİSA yöntemi ile analitik kimya laboratuvarında çalışıldı.
III. GİRİŞ:
Kanser:
Kanser, hücrelerde DNA hasarı sonucu hücrelerin kontrolsüz veya anormal
bir şekilde büyümesi ve çoğalmasıdır ve dünyada kalp hastalıklarından sonra
2.sırada ölüm nedenidir. Hücre siklusu G1, DNA sentez fazı olan S, G2, Mitotik faz
M fazlarından oluşur. Hücre büyümesi esnasında rejenerasyon düzenli olarak her
siklusta olmaktadır.
DNA'da bir günde yaklaşık olarak 10.000 mutasyon olmakta ve immun
sistem kanserli hücreleri yok eder ve mutasyona uğrayan hücrelerin ancak çok az bir
kısmı kansere yol açar. Mutasyon sonrası oluşan hasar genin yapısında değişime
neden olmuşsa hücre üzerindeki bölünme kontrolü ortadan kalkar ve malignite
meydana gelir.1
Normal hücreler tamir edilemeyecek şekilde hasarlandığında apoptozise
uğrarlar ve yok edilirler. Kanser hücreleri apoptozis'ten kaçarak kontrolsüz
çoğalmalarına devam ederler.2
Kadınlarda en sık meme, rahim ve 3.sırada kolon kanseri; erkeklerde ise en
sık akciğer, prostat, mide ve kolon kanserleri görülmektedir. Kolon, kalın barsağın ilk
150-200 cm’lik kısmına verilen isimdir. Kolon kanseri Avrupa’da 2.sırada ölüm
nedenidir. Kolon kanseri genellikle polip zemininde gelişirler. Zamanla genetik ve
çevresel etmenlerin etkisiyle bu adenomatöz polipler kansere yol açabilirler. Ayrıca
40 yas üzeri olmak, ailesinde, over ve meme, kolon kanseri hikayesi olması, ülseratif
kolit ve crohn hastalığı olması, ailesel adenomatöz polipozis hikayesi kolon kanseri
gelişiminde etkilidir. Dünyada pankreas kanseri ölüme yol açan dördüncü kanserdir,
ülkemizde de tüm kanserlerin yüzde 3’ünü oluşturuyor. Pankreas kanseri erken
dönemde metastaz yapan ve genellikle bu dönemde operasyon şansını kaçırmış
olan bir kanser türüdür.3 Pankreas ekzokrin ve endokrin glandları ile vücudumuzdaki
homeostatik bazı süreçleri kontrol eden komplex bir organdır. Diabet, pankretit ve
pankreatik kanser pankreas disfonksiyonu ile meydana gelir ve TGF-β pankeas
fonksiyonları için anahtar regülatördür.4 Pankreas kanserinin nedenleri kesin
bilinmediğinden ve erken evrede herhangi bir belirti vermediğinden önlem almak
zordur ancak bulgu vermeye başladıktan sonra tarama testleriyle teşhis edilebilir. Bu
nedenle pankreas kanseri erken dönemde yakalanması gereken bir kanserdir.
TGF- β ve E-Cadherin:
Moleküler onkoloji alanında yapılan araştırmalar kanser patogenezinin daha
iyi anlaşılmasına yardımcı olmaktadır.
Bu süreçte hücre yüzeyi kaynaklı genler, büyümeyi inhibe eden faktörlerden
sinyal yollarında Transforme edici faktör beta (TGF-beta)’nın ve ayrıca epitel hücre
adezyonunda görevli molekül E-Cadherin ‘in majör katkısı olduğu düşünülmektedir.
Adezyon molekülleri, hücre büyümesi ,hücrelerin doku spesifikliği ve tanıma,
embriyojenez, hücre proliferasyon ve inflamasyonun regülasyonunda görev alırlar.5
Bu moleküller hücre büyümesini kontrol eden hücre yüzeyi kaynaklı
moleküllerdir. TGF beta büyümeyi inhibe edici faktördür. TGF-β,immun sistemin
anahtar moleküllerindendir ve hücre proliferasyonu ve diferansiyasyonunda görev
alır.
Kadherin ise epitelyal dokularda hücre-hücre adezyonunu sağlayan
kalsiyum bağlı bir transmembran glikoproteinidir ve diferansiye epitelin korunması ve
formasyonunda anahtar rolü oynar.6
Hücre
değişiklikler,
proliferasyonu
sinyal
yollarında
ve
farklılaşması
görevli
sırasında
TGF-beta’nın
ekspresyon düzeyindeki değişiklikleri etkiler.7
mutajenlere
m-RNA
seviyeleri
bağlı
gen
İnaktivasyon veya mutasyonlarla TGF-B reseptörleri büyümeyi önleyici rolü
ortadan kalktığında ve E-Cadherin’nin mutasyon, delesyon ve promoter metilasyonla
ekspresyon kaybıyla kolon ve pankreas kanseri meydana gelmektedir. TGF- β süper
ailesi hücre büyümesi ve diferansiyasyonu, hücre motilitesi, apoptozis ve erken
embriyonik gelişimi içeren hücresel proçeslerde temel rol oynar.8
İnsan kanserlerinde TGF- β rezistansı olduğu insan kolon kanserlerinde
gösterilmiştir ve TGF- β mutasyonu inaktif RII somatik mutasyonu şeklindedir.9 TGFβ
25-kDa
ağırlığında
fibrozis,
angiojenezis,
karsinogenezis
ve
hücre
diferansiasyonunda rol oynayan bir sitokindir.
TGF-beta’nın 5 izoformu vardır: TGF-b1, TGF-b2, TGF-b3 memelilerde
bulunur ve TGF-b4,TGF-b5, aktivin, inhibin, kemik morfogenetik proteinler (BMPs)
ve miyostatinlerini de içeren geniş bir süper aileye aittir.
BMPs yani kemik morfogenetik proteinler, diferansiasyon, proliferasyon,
motilite, adezyon, apoptozis regülasyonunu yapan komplex sinyal hücre ağından
oluşur. TGF-β sinyalleri tip1, tip 2 ve tip 3 reseptörleri ile taşınır ilk iki tip reseptör
sinyalleri transmembran serin/treonin kinazlarla taşır ve SMAD proteinleri olarak
bilinen spesifik intraselluler mediyatörlerdir.10 TGF-β sinyalleri serin/treonin kinazları
gen ekspresyonunu düzenlerler. Fosforlanan kinazlar SMAD proteinlerine dönüşür.
SMAD'lar, intranükleer sinyal taşır ve DNA'ya bağlanır. Reseptör aracılı (R-SMADs),
ko-mediyatör ve inhibitör etkili (I-SMADs) olmak üzere 9 adet SMAD proteini vardır.
ELF, SARA (SMAD anchor for receptor activation), filamin gibi adaptör proteinler
TGF β’nin fonksiyonunu kolaylaştırır.11 TGF β SMAD yolundaki sinyal iletisinin sona
ermesi TGF -β reseptörlerinden ayrılınca, R- SMAD proteinleri hızla defosforile
edilerek inaktive olur.12 TGF-β ve TGF-β reseptörleri büyük damarların ve perisit
kapillerlerindeki mural düz kas hücrelerinden ve endotel hücrelerinden sentezlenir.13
Tip 3 reseptörleri hem SMAD hem de non-SMAD bağımsız sinyal yollarında
görev alır ve betaglikan olarak bilinir. TGF- βRIII ekspresyon kaybı ve bu reseptörün
direkt etkisi ile migrasyon, invazyon, proliferasyon, anjiojenezis gibi proçesler kanser
progresyonu lehine rol oynar.14 Normal biyolojik süreçlerde TGF- β embriyonik
gelişim ve doku hasar onarımında, adult yara iyileşmesi ve doku homeostazisinde
önemlidir. Bunu hücre göçü, anjiojenez, Epitelyal-mezenkimal tranzisyon, apoptozis
extrasellular matrix (ECM) üretimi ve ECM yeniden yapılanmasının regulasyonu ile
yapar. Tümör gelişim sürecinde ise bir hipoteze göre artmış TGF- β ekspresyonu
tümör hasarına karşı gelişmiş protektif doku cevabı ile ilgili olabilir.15
TGF-beta, hem tumor suppressor hemde tümor promoteri olarak paradoksal
rol oynar. TGF-β, tümörün büyümesini inhibe ederken diğer taraftan tümör
progresyonunaneden olur.16 Bir yandan karsinogenezisin premalign fazında
büyümekte olan hücreleri ve apoptozis indüksiyonu ve diferansiyasyonu inhibe eder
diğer yandan ise TGF –β’nın modüle ettiği invazyon, anjiojenezis gibi proçeslerde bu
inhibisyonun kaybıyla kanser gelişimi görülür.17
TGF -β epitelyal hücrelerin bölünmesini baskılayarak tümör supresif etkisini
göstermektedir.
Tümöral
(epitelyal-mezenkimal
dokularda
geçiş)
EMT,
ise
kontrolsüz
invazyon
ve
proliferasyon,
metastaz
gibi
metaplazi,
olayların
gerçekleşmesine aracılık etmektedir.12 TGF-β tarafından regüle edilen tümör
süpresyonu veya progresyonunun immun sistem tarafından dengede tutulması
önemlidir.18
TGF-β sinyal kaybı kanserlerde tespit edilmiştir ve metastaz gelişiminde bu
sinyal kaybının rolü vardır.19 TGF- β epitelyal hücre kanseri progresyonunda
epitelyal mezenkimal tranzisyon gelişiminde regülasyonu sağlamaktadır. Bazı
tümörler hızlı büyür ve immun yanıt zayıf kalır. Bazı tümörler immun saldırının hedefi
olan antijenlerin ekspresyonunu durdururlar.20
Bazı tümörler ise transforme edici büyüme faktörü (TGF-β) gibi immun
yanıtları baskılayan moleküller üretebilirler ya da büyüme inhibisyonu yapan genlerin
transkripsiyonunu regüle eder.21 Her bir TGF-β farklı genlerce kodlanmasına karşın
hepsi aynı reseptör sinyal kaskadını aktive eder.11 TGF-beta, normal epitelyal
hücrelerde ve erken evre kanser gelişiminde antiproliferatif faktör gibi davranır.
Normal hücrelerde TGF-beta sinyal yolunun aktivasyonu hücre siklusunu G1
evresinde durdurur. Bu ise proliferasyon, diferensiyasyon artışı ve apoptozisi
durdurur.22
Kanser gelişiminde ise TGF-beta’nın hücre siklusu üzerindeki kontrolü azalır
ve kanser hücreleri ve fibroblast hücreleri prolifere olur. TGF-beta apoptozisi
indükler İmmun hücreler, fibroblast hücreleri,düz kas hücreleri ve endotel
hücrelerinde TGF-beta artar. İmmun süpresyon, anjiojenez ve invazyon başlar.23 ECadherin epitelyal hücrelerdeki önemli adezyon molekülüdür ve hücreler arasındaki
moleküler bağlantıyı, yapışma kavşaklarında fermuara benzer yapılar oluşturarak
sağlarlar. E-Cadherin’in hücre membran reseptörleri reseptör tirozin kinazlardır
(RTKs). RTKs‘ların aktivasyonutla E-Cadherin’in regülasyonu olur. RTKs’lar epitelyal
mezenkimal transisyon denilen (EMT) yapısal geçişi indüklerinde bu regülasyon
bozulur.24 E-Cadherin’in Epitelyal (E), Nöral (N), Plasental (P), Endotel hücreleri (V),
Kalp kasında (H), Desmozomal, Protocadherin tipleri vardır.25
Ekstrasellüler,
transmembran
ve
intrasellüler
domainleri
vardır.
Ekstrasellüler domain bakır benzeri yapılarla kalsiyumu ve intrasellüler sitoplazmik
kuyruk kateninleri bağlar. Böylece katenin ailesi iskelet sistemindeki aktinle köprüler
yapar ve böylelikle hücre grupları ve dokular arasındaki koordinasyon bu
transsellüler ağ ile sağlanmış olur.6 E-cadherin kateninler aracılığıyla hücre-hücre
adezyon proçesini kolaylaştırırlar ve E-cadherin seviyelerinin kaybı hücre–hücre
ilişkisinin kesilmesi, tümör grade, invazyon ve metastazıyla ilişkilidir.26 Kanserlerde
ekspresyon kaybıyla E-kaderindeki sitoplazmik kuyruğun fosforilasyon bozukluğu
epitel hücreleri hareketlilik artışı yaparak yayılımı başlatır.27
Tümör
hücrelerinde
E-Cadherin
ekspresyonunun
azaldığı
ve
epitel
hücrelerinin göç kabiliyetlerinin arttığı belirlenmiştir. Yapılan bazı çalışmalarda
metastatik pankreas kanserlerinde epitelyal-mezenkimal tranzisyonun (EMT) arttığı,
E-cadherin expresyonunun TGF-beta etkisiyle azaldığı gösterilmiş.28
Pankreatik kanserlerde TGF-β sinyal yolunun regulasyonu EMT gelişimi ile
bozulur ve EMT proçesinde adheren epitelyal hücreler motil ve invaziv olmaya
başlar ardından E-cadherin expresyonunun kaybı ve kanser progresyonu görülür.29
İnvaziv kanserlerde TGF-β sinyal yolunun karsinoma hücreleri üzerinde
EMT etkisiyle meydana gelen migrasyon ve invazyon immun etkilerle önlenebilir.18
Malignitelerde epitel hücrelerinde, E kaderinekspresyonu azalır hücre-hücre ilişkisi
bozulur düzensiz tavır sergiler, diferansiyasyonun azalır ve hareketsizliği sağlayan E
kaderinin azalması hücrelerde göç kabiliyetini arttırır.30
Pankreatik kanserlerde E-Cadherin ekspresyonunun azalmasının TGF-β ile
indüklendiğini gösteren araştırmalar mevcuttur. TGF-beta ve SMAD proteinlerindeki
mutasyon pankreas ve kolorektal kanserlerin TGF-β’nın tümör süpresör etkisinden
kaçmasını sağlar ve bu kanserlerin gelişimine yol açar.31
Kolon kanserleri intestinal epitel hücrelerdeki değişimlerden meydana gelir
ve bundaki temel neden TGF-β sinyal yolundaki TGF-β reseptörlerini kodlayan genin
mutasyonun neden olduğu TGF-β inaktivasyonudur.32
Dolayısıyla TGF-β sinyal yolunda görevli genlerdeki ve tip 2 reseptör
mutasyonları pankreas ve kolorektal kanserlerin gelişimine yol açar.19 Yine pankreas
tümörlerinin yarısında ve kolon kanserlerini %10’unda SMAD4 geni mutasyonu
vardır.33 Kolorektal kanserlerde plazma TGF-β düzeyleri rezeksiyon öncesi yüksek
iken opresyon sonrası düşük olarak tespit edilmiştir.34 Kanserde TGF-beta
hücre/hücre adezyon reseptörü olan E-cadherin etkileşimi üzerindeki kontrol
mekanizması
bozularak
onkogen
gibi
davranmaya
başlar.12
E-cadherin’in
downregülasyonu ile tümör invazyonu ve andiferansiyasyonu arasında pozitif bir
ilişki vardır.6
Adenomatöz polipozis kolide katenin seviyeleri düşer.26 Sonuç olarak
intestinal kanserlerde katenin tümör süpresor protein olarak hücre-hücre homotipik
kontaktında pozitif etki göstermektedir. Bu rolüyle katenin, E-cadherin expresyonunu
indükleyerek, epitelyal–mezenkimal tranzisyonu önlemekte ve metastazları tersine
döndürecek
gelecekteki
tedavi
planını
oluşuracaktır.35
Özellikle
pankreatik
kanserlerde TGF-βRIII ekspresyon kaybı tümör grade’nin ve progresyonunun artışı
ile sonuçlanır.36
TGF- βRIII ekspresyon kaybı EMT gelişimi ve kanser progresyon artışı ile
birliktelik gösterir. Kolorektal epitelde E-cadherin dengesini bozan ve TGF beta
reseptör bozuklukluklarına neden olan mutasyonlar kolon kanseri oluşumuna neden
olur.7 E-cadherin baskılanması hücrenin motilite ve invaziv özellik kazanmasına
yardım edebilir.37
Bu proje araştırması ile TGF-β ve E-cadherin’in kolon ve pankreas kanser
gelişim sürecindeki etkileri açısından yeni bir değerlendirme yapmak çalışmada
esastır.
IV. MATERYAL VE YÖNTEM:
Çalışma Populasyonu:
Proje kapsamında incelenecek olan hastalar, Ankara Üniversitesi Tıp
Fakültesine onkoloji kliniğine başvuranlar arasından seçilmiştir. Yaşları 40-75
arasında değişen 53 kanser (27 erkek 26 kadın) hastası çalışmaya dahil edilmiştir.
Kontrol grubu örnekleri ise kendisinde ve ailesinde hastalık bulunmayan, gönüllü
olarak çalışmaya atılmak isteyen 29 kişiden (19 erkek, 10 kadın) oluşmuştur.
Analizler:
Çalışmamızda pankreas ve kolon kanserine sahip hastalar ve sağlıklı
gönüllülerden alınan periferik kanın serum örneklerinden E-Cadherin ve TGF-β
düzeylerinin ölçümü ELISA yöntemiyle yapılmıştır. Serum örnekleri Boster
immunoleader human TGF-β ELISA kiti ve Aviscera bioscience E-Cadherin kiti ile
kitlerin kullanım kılavuzuna uygun şekilde çalışıldı. E-Cadherin için ELISA
okuyucuda 450 nm’ de absorbanslar ölçüldü. Konsantrasyon değerlerine karşılık
gelen absorbans değerlerinden kalibrasyon grafiği elde edildi. Absorbansı
bilinmeyen numunelerin konsantrasyonları bu kalibrasyon grafiğinden belirlendi.
İstatistiksel Analiz:
Elde edilen verilerin istatistiksel olarak değerlendirilmesi için SPSS version 10.0
programı kullanılmıştır. Parametrelerin gruplar arasında karşılaştırılması student-t testi (iki
grup arasında) kullanılarak yapılmıştır.
V. ANALİZ VE BULGULAR:
Tablo1: Çalışma Grubunun Karakteristik Özellikleri ve Lipid Profili
Kuatelet indeksi (kg/m )
Total
hasta
grubu
(N=53)
60.43±
1.26
26.67±
0.50
55.90±1.4
9
27.12±0.6
8
Erkek/Kadın
27/26
19/10
Hastalık öyküsü
(var/yok)
22/31
15/14
Aile öyküsü (var/yok)
29/24
16/13
Sigara (içen/içmeyen)
23/30
13/16
İlaç
(kullanan/kullanmayan)
32/21
17/12
183.28
±5.45
134.98
±3.36
44.77±
0.70
151.57
±7.47
199.76±6.
29
138.72±5.
52
40.93±2.1
6
182.59±14
.12
Yaş (yıl)
2
Total kolesterol
LDL kolesterol
HDL kolesterol
Trigliserit
Kontrol
grubu
(N=29)
Tablo 2: Hasta ve Kontrol Grubunun TGF-β ve E-Cadherin Düzeyleri
TGF-β
(pg/mL)
Total hasta (N=53)
Pankreas Kanseri grubu
(N=23)
Kolon Kanseri grubu
(N=30)
Kontrol grubu (N=29)
a
635.68±1
a
87.88
616.15±2
b
87.68
650.65±2
a
52.32
123.16±2
2.04
Kontrol grubuna göre anlamlı farklılık (p<0.01),
ECadherin
(ng/mL)
34.27±1.7
b
4
34.23±3.3
7
34.29±1.7
b
2
28.32±1.4
2
b
Kontrol grubuna göre anlamlı farklılık (p<0.05).
VI. SONUÇ VE ÖNERİLER:
Pankreas ve kolon kanserinde serum TGF-β ve E-Cadherin düzeylerini
araştırmak amacı ile gerçekleştirilen bu öğrenci odaklı bilimsel araştırma projesi
çerçevesinde elde edilen sonuçlar ve öneriler aşağıda sunulmaktadır. Total hasta
grubunda serum TGF-β düzeyleri kontrol grubununa göre anlamlı derecede yüksek
bulunmuştur. Total hasta grubunda serum E-Cadherin düzeyleri kontrol grubununa
göre b düzeyinde yüksek bulunmuştur. Pankreas kanseri grubunda serum TGF-β
düzeyi kontrol grubununa göre b düzeyinde yüksek bulunmuştur. Kolon kanseri
grubunda serum TGF-β düzeyi kontrol grubununa göre a düzeyinde yüksek
bulunmuştur. Yine kolon kanseri grubunda serum E-Cadherin düzeyleri kontrol
grubununa göre b düzeyinde yüksek bulunmuştur. Ancak pankreas kanseri
grubunda serum E-Cadherin düzeyleri kontrol grubuyla arasında anlamlı farklılık
saptanmamıştır. Hem total hasta grubunda hemde her iki kanser grubunda serum
TGF-β düzeylerinin yüksek bulunuşu karsinogenezisin TGF-β sinyal yoluyla ilişkili
olduğu ve bu sitokinin kanser başlangıç ve progresyonunda rol aldığı söylenebilir.
Ancak çalışmamızdaki kısıtlılıklara bağlı olarak elde edilen bu sonuçların genele
yayılması için daha kapsamlı çalışmalara ihtiyaç vardır.
VII. KAYNAKLAR:
1. Andre M. Oliveira,Jeffrey S. Ross, Jonathan A. Fletcher Tumor Suppressor Genes in
Breast Cancer Clinical Pathology124: 16-28: 2005.
2. Sierra A, Castellsague X, Escobedo A, Lloveras B, Garcia-Ramirez M. Bcl-2 with
loss of apoptosis allows accumulation of genetic alteration: a pathway to metastatik
progression in human breast cancer. Int J Cancer 89:142-147, 2000.
3. Moosa AR. Surgical treatment of pancreatic cancer. J Med; 326:455-65: 1992.
4. Sushil G. Rane, Ji-Hyeon Lee, Huei-Min Lin Transforming growth factor-b pathway:
Role in pancreas development and pancreatic disease Cytokine17:107-19: 2006.
5. Steinberg MS: Does differential adhesion govern self-assembly process in
histogenesis? Equilibrium configurations and the emergence of ahierarchy among
populations of embrionic cells, J Exp Zool 173:395-434: 1970.
6. E-cadherin mutations and cell motility A genotype–phenotype correlation Ana Rita
Mateusa,b,⁎, Joana Simões-Correiaa, Joana Figueiredoa, Stefan Heindlb,Catarina
Castro Alvesa,b, Gianpaolo Surianoa,c, Birgit Luberb, Raquel Serucaa,c,⁎
Experımental Cell Research 315 : 1393-1402; 2009.
7. Tsamandas AC, Kardamakis D, Ravazoula P, Zolota V, Salakou S, et al. The
potential role of TGF beta1, TGF beta2 and TGF beta3 protein expression in
colorectal car cinomas. Correlation with classic histopathologic factors and patient
survival. Strahlenther Onkol 180:201-8: 2004.
8. Transforming growth factor-b signal transduction in epithelial cells Jianbo Yue,
Kathleen M. Mulder* Pharmacology & Therapeutics 91 20011-34: 2001.
9. Kokudo T, Suzuki Y, Yoshimatsu Y, Yamazaki T, Watabe T Miyazono K: Snail is
required for TGFb-induced endothelial–mesenchymal transition of embryonic stem
cell-derivedendothelial cells. J Cell Sci 121:3317-3324: 2008.
10. Adaptor proteins and ubiquinators in TGF-b signaling.
11. . Pavlos Lampropoulos Adamantia Zizi-Sermpetzoglou, Spyros Rizos, Alkiviadis
Kostakis, Nikolaos Nikiteas, Athanasios G. Papavassiliou TGF-beta signalling in
colon carcinogenesis Cancer Letters 314 :1–7: 2012.
12. Türk Klinik Biyokimya Derg - TGF -β "nın Kanserde Baskılayıcı Rolü 8:35: 2010.
13. Qing Lu Transforming growth factor-β1 protects against pulmonary artery endothelial
cell apoptosis via ALK5 American Journal of Physiology - Lung Cellular and
Molecular Physiology 295:123-133: 2008.
14. E. Gatza, Sun Young Oh, Gerard C. Blobe Roles for the type III TGF-β receptor in
human cancer Catherine Cellular Signalling 22:1163–1174: 2010.
15. H.G. Laverty, L.M. Wakefield, N.L. Occleston, S. O’Kane, M.W.J. Ferguson TGF- β
3 and cancer Cytogfr 20:305-17: 2009.
16. Hill Rp, Rodemann HP, Hendry JH, Roberts SA, Anscher MS. Normal tissue
radiobiology: from the laboratory to the clinic. Int J Radiat Oncol Biol Phys 49:35365: 2001.
17. Bernabeu C., Lopez-Novoa J. M., Quintanilla M. The emerging role of TGF-β
superfamily coreceptors in cancer Biochim Biophys Acta. 1792:954-73: 2009.
18. Bierie B., Moses H.L. Transforming growth factor beta (TGF- β) and inflammation in
cancer Cytogfr 21: 49–59: 2010.
19. Levy L, Hill CS. Alterations in components of the TGF-beta superfamily signaling
pathways in human cancer. Cytokine Growth Factor 17:41–58: 2006.
20. Angenete E, Langenskiöld M, Palmgren I, Falk P, Öresland T, Ivarsson ML.
Transforming growth factor beta-1 in rectal tumor, mucosa and plasma in relation to
radiotherapy and clinical outcome in rectal cancer patients. Int J Colorectal Dis;
22:1331-8: 2007.
21. M.J. Truty,Urritia R.Basics of TGF-beta and pancreatic cancer. Pancreatology 7:
423–435:2007.
22. Lawrance DA. Latent-TGF-beta: an overview. Mol Cell Biochem 219:163-70: 2001.
23. N. Momi, S. Kaur, S. R. Krishn, S. K. Batra Discovering the route from inflammation
to pancreatic cancer PMC 58: 283–297:2012.
24. J.P. Thiery, Epithelial–mesenchymal transitions in tumour progression, Nat. Rev.
Cancer 2: 442–454:2002.
25. Lee SW: H-cadherin, a novel growth inhibitory function and diminished expression in
human breast cancer, Nature Med 2:776-782:1996.
26. Dılek F.H., Topak N., Tokyol Ç., Akbulut G., Dilek O.N .β-Catenin and its relation
to VEGF and cyclin D1 expression in pT3 rectosigmoid cancers" ,Turk J
Gastroenterol:21:365-71 2010 .
27. Dickson RB, Lippman ME Evidence that transforming growth factor-β is a
hormonally regulated negative growth factor in human breast cancer cells Cell 48:
417–428: 1987.
28. Johannes Von Burstin, Stefan Eser, Mariel C Paul, Barbara Seidler, Martina Brandl
E-Cadherin Regulates Metastasis of Pancreatic Cancer In Vivo and Is Suppressed
by a SNAIL/HDAC1/HDAC2 Gastroenterology 137: 361-371: 2009.
29. Roles for the type III TGF-β receptor in human cancer Gatza C. E., Oh S.Y. , Gerard
C. Cellular Signalling 22: 1163–1174: 2010.
30. Ozawa M, Ringwald M, Kemler R: Uvomorilin Catenin complex formation is
regulated by a specificdomain in the cytoplasmic region of the cell adhesion
molecule, Proc Natl Acad Sci, 87: 4246-4250: 1990.
31. Taylor, M. A.; Lee Y.H. Schiemann, WilliamP.Role of TGF-β and the Tumor
Microenvironment During Mammary Tumorigenesis Gene Expression 15:117-132:
2011.
32. Trobridge P., Knoblaugh S., Washington M. K., Munoz N.M., TSsuchia K.D., Rojas
A., Song X., Ulrich, C. M. , Sasazuki T., Shirasawa S. , Grady W. M. TGF- β
Receptor Inactivation and Mutant Kras Induce Intestina Neoplasms in Mice via a _Catenin-Independent Pathway Gastrenterology 136:1680–1688: 2009.
33. Sjoblom T, Jones S, wood LD, Parsons DW, Lin J, Barber TD, Mandelker D, Leary
RJ, Ptak J, SillimanN. The concensus coding sequences of humanbreast and
colorectal cancers. Science 314:268-74: 2006.
34. TGF-â and cancer Reis M. Microbes and Infection, 1;1327−1347: 1999.
35. Roura S. , Dominguez Inducible expression of p120Cas1B isoform corroborates
the role for p120-catenin as a positive regulator of E-cadherin function in intestinal
cancer cells Biochemical and Biophysical Research Communications 320:435–441:
2004.
36. K.J. Gordon, M. Dong, E.M. Chislock, T.A. Fields, G.C. BlobeType III Transforming
Growth Factor-β (TGF-β) Receptor Mediates Apoptosis in Renal Cell Carcinoma
Independent of the Canonical TGF-β Signaling Pathway, Carcinogenesis 29; 252:
2008.
37. Edwards DC, Sanders LC, Bokoch GM, Gill GN: Activation of LIM-kinase by Pak1
couples Rac/Cdc42 GTPase signalling to actin cytoskeletal dynamics. Nat Cell Biol,
1:253-259: 1999.
VIII. EKLER:
a) Mali Bilanço ve Açıklamaları
Bu çalışma için, 12Ö3336002 nolu BAP projesi kapsamında alımı gerçeklesen sarf
malzeme kullanılmıştır.
b) Makine ve Teçhizatın Konumu ve Gereçlerdeki Kullanımına Dair Açıklamalar:
Proje kapsamında herhangi bir demirbaş alımı yapılmamıştır.
c) Teknik ve Bilimsel Ayrıntılar: Bu projede kullanılan test tekniği Elisa yöntemidir.
Elisa yöntemi: Antijen antikor reaksiyonlarını gösterebilmek için enzim kullanılan
tüm tekniklere ve tahlil yöntemlerine genel olarak enzim immunotest denmektedir.
Enzimle işaretli immuno reaktiflere dayalı bu testler, antijen antikor reaksiyonu tespiti
ile özellikle Mikrobiyoloji Laboratuvarlarında sıkça çeşitli enfeksiyonlar, antijen ve
antikorların tanısında kullanılmaktadır.
d) Sunumlar, Poster sunumu olarak hazırlanmaktadır.
e) Yayınlar (hakemli bilimsel dergiler) ve tezler yayına hazırlanmaktadır.