ece 2- 3-

advertisement
2-
ece
klif
3-
4-
HAcErrEpE iiNivEJ;?Esi
nexronlUGti
Bilimsel Aragttrma
Projeleri Koordinasyon
burundugum FHD-2016_e727
r
Menke)
Filoco$rafiaJr"^tasrrk]r-;;;'i:oJ"''
^]::T::r*
nususunda gere$ini
arz
ederim.
ve 'Ak
Bi'mi Koordinat6rrtigrine
Kavaqritri nrin
(Noccaea iberidea (Boiss)
"-'-amtnda aga$rdaki sitrnarma/h.i""il"isr"';r"rinin
..
Ar9.Gdr. ennrg OzUoOGnU
l_pNfu
#Nnuoo,
6P%
Arshehbaz
gerg*kregtirirmesi
28.07.2016
TAQ DNA POLYMERASE TEKNIK
$ARTNAMESI
1'Enzim standart Taq,DNA polimeraza g6re 2
kat dahafazla iiriin verebilmeli ve hedef
amplikon uzunlugu <6kb olmahdrr.
2.Enzim, hem
3' ,hemde
5' exonuclease aktivitesi gdstermelidir.
5')
3')
3. Urun 200 reaksiyonluk olmahdrr.
4.Master mix igeripinde agagrdaki soltisyonlar burunmahdrr:
Taq DNA polimerase (15 U/pl)
2x green buffer
.
o
o
o
0,4,er mM dATp, dCTp, dTTp, dGTp
4 mM MgCl2
5' Green buffer sayesinde elde edilen PCR iiriinleri 6x loading
dye ile mix yapmaya gerek
kalmadan direk j ele ytiklenebilmelidir.
6' Kaliteli PCR iiriinii elde etmek igin green buffer'm pcR
igin optimize edilmig
tescilli
formtlasyonu olmahdrr.
entleri yiiriimeli ve yellow dye ile
r
ytiriimelidir.
m ve 615 nm olmahdrr.
syon sUresi yeterli olmahdrr.
e 3-4 dakika uzatrlabilmelidir.
astndan 5oc daha dtigiik olmahdrr ve baslanma
igin 30 saniye yeterri olmahdrr.
l2'Enzim igin optimumuzatmasrcakhsr 70-75"Colmahdrr.
Onerilen uzatmaadrmr 2 kb
PCR i.iriinti igin72"C, de 1 dakika olma-hdrr.
13: Kahp DNA'dan 10 pg- 1pg, pcR master mix'den
25 pr ,F-primer,den 0.1- 1 pM, Rprimer'den 0.1- I pM kullanrlarak total hacim : o pr
oracak irtito. pcR mix,i
hazrrlanmahdr.
11 DNA fragmentlerinin rutin PCR amplifikasyonu genomik DNA,dan 6kb, viral DNA,dan
20 kb kadar olmaldrr.
Jl'f'T-ncr, genotipleme ve TA klonlama igin PCR tiriinlerinin iiretiminde kullanrlabilnnelidir.
l6'Enzim ambalajr tizerinde son kullanmaiarihigoriilebilir
olmal, ve bu stire l(bir) yrl<tan
fazla olmahdrr.
lT.Teslimatl
l zincir ortammda yaprlmahdrr.
l8.i.stenildiS
rgr green buffer ahnabilmelidir.
l9.Uriin 200
tOOl reaksiyonluk olarak ahnabilmelidir.
Arag.Gtir. Dr. Barrg Oziidofru
28.0'7.2016
1' Kit bitki
2.
3.
4'
5.
doku ve bitki hiicrelerinden veya mantar orneklerinden
total
hiicresel DNA izolasyonu yapabilmelidir.
Kit
protokolti organik ektiaksiyona ve alkol prespitasyonuna gerek
duymamahdrr.
Protokol bir saatten daha krsa bir siirede tamamlanmahdrr.
Protokole baqlama materyalinin maksimum hacmi rslak alrrhkla
100m61
veya kuru alrrhkla 20mg olmahdrr.
Elusyon oraruna balh olarak 3 pg-30 pg konsantrasyonda DNA
elde
edebilmelidir.
Kit silika membran bazh spin kolon prosedtirti ile gahgmahdrr.
6.
7. Kitin saklama kogullarr oda srcakhgrnda muh'afaza edilmeye uygurr
olmahdrr.
8.
Kit
kolonlar ve elAshredder Mini spin
rektirdigi miktarda 2 mI lik toplama
kol
tup
9' Kit igerisinde test miktarr kadar bulunan spin kolanlar tek tek steril
amb alaj i geris inde
o
lmah drr.
10.Kit RNase A igermelidir"
ll.Izolasyon ile 40 kb kadar elde edilen DNA, PCR, Real-time PCR ve
multipleks PCR uygulamalannda, RAPD ve mikrosatellit analizi
gahqmalarrnda, RFLP, AFLP ve Southern blotting gahgmalarrnda
kullanrlmaya uygun olmahdrr.
12'Teklif veren firmalar tiretici firmanm tek yetkiti temsilcisi olmahdrr veya
Ti'irkiye' de tek yetkili distribritdrii tarafindan yetkilendirilmig olmaldrr.
l3.Teklif verecek firmalarrn tiriine ait ISo134g5 ve TURKAK onayh
belgeleri olmahdrr.
l4,Kit, laboratuvar ortamrnda demosu yaprhp,onayr verildikten sonra
de$erlendirmeye almacaktr.
Arag.Giir. Dr. Bang Oziidolru
28.07.2016
Mikropipet ucu filtresiz 10 pl teknik gartnamesi
o
o
o
1000'lik pogeflerde filtresiz olmalrdrr.
0'2-2ltl, 0.5-1Opr,
BUtun ana pipetlerle mUkemmel uyum gostermeli ozellikle
Finnpipet uzun
ve
'
'
1-1Opr ararrkrarda gekim yapabirmeridir.
dijital formlardaki pipetlerle ve Pipetman pipetiyle uyumlu olmalrdrr.
DNAase, RNAase, pyrogen, RNA, DNA'dan yoksun ormarrdrr.
De5erlendirme numuneler laboratuva nmtza teslim edilecektir,
UrUnler test
edild ikten sonra laboratuvart m tz tarafr ndan de$erlendirmeye
al
r
nacaktr r.
Arag.Gdr. Dr. Barrg OzUdogru
28.07.2016
Mikropipet ucu filtresiz 1000 pl teknik gartnamesi
1.
1000'lik pogeflerde filtresiz olmalrdrr.
2. 100-1000 trrt aralrklarda gekim yapabilmelidir.
3'
Butun ana pipetlerle mukemmel uyum gostermeli ozellikle
Finnpipet uzun ve
dijital formlardaki pipeilerle ve pipetman pipetiyle uyumru olmalrdrr.
4.
DNAase, RNAase, pyrogen, RNA, DNA,dan yoksun
olmalrdrr.
5.
De$erlendirme numuneler laboratuvarr m rza teslim edilecektir.
Urunler test
edild ikten sonra laboratuvarr m rz tarafrndan de$errendirmeye
ar nacaktr r.
r
Arag.GOr. Dr, Barrg OzUdogru
28.07.201ti
Mikropipet ucu filtresiz 200 gl teknik gartnamesi
o
.
o
1000'lik pogeflerde filtresiz olmahdrr.
20-200p1 arahklarda gekim yapabilmelidir.
Butun ana pipetlerle mukemmel uyum gdstermeli Ozellikle
Finnpipet
uzun ve dijital formlardaki pipeflerle ve pipetman pipetiyle
uyurrlu
olmalrdrr.
o
DNAase, RNAase, pyrogen, RNA, DNA,dan yoksun olmalrdrr.
'
De0erlendirme numuneler laboratuva nmtza teslim edilecektir.
UrUnler
test edildikten sonra laboratuvarrmrz tarafrndan de$erlendirmeye
alrnacaktrr.
Arag.GOr. Dr. Barrg OzUdogru
28.07.2016
DNA Ladder
urun 100 bp uzunlugunda 1b00 bp ye kadar yaklagrk 15
fragment igermetidir.
Arag.GOr. Dr. Bang OzUdo$ru
Download