KimyaKongreleri.org

IV. Ulusal Afinite Teknikleri Kongresi, 4-7 Mayis 2008, Mugla Üniversitesi, Mugla
Soz10·2
pOLiMERiK FIR«;ALAR
Deniz Tiirkmett, Nila)' Bereli, Erkut Y,lmaz, Adil Denizli Hacetlepe Universitesi. Kimya Boliimii, Biyokimya Anabilim Dab, Ankara immobilize metal afinite kromatografisi degi~ik proteinlerin safla~tmlmasmda yayglll olarak
kullamlmaktadlf. Bir 90k
ge9i~
metali (Cu, Ni, Fe) 0, N, ve S ile kararh komplehler
olu~turabilmektedirler. immobilize metal afinitenin en onemli avantajlan ligandlll kararhhgl, yiiksek
oranda se<;iciligi, yiiksek protein baglama kapasitesi, Ihmh
<;ah~ma ~art1an, dii~iik
mali yeti ve
endiistriyel uygulamalar i<;in oIgek:"!?iiyiitmenin kolayhgt olarak saYllabilir. Polietilenimin protein
safla~tmlmaslllda
kullamlan 90k
di~li
bir ligandtr. Polietilenimin 90k1u baglanma bOlgelerine sahip
olan polikatyonik bir malzemedir. Ozellikle DNA molekiiliine olan yiiksek ilgisi do!aYlslyla
biyomedikal uygulamalarlllda yaygm olarak kullamlmaktadlr. Metal baglama miktannm yiiksek olu~u
kapasiteyi artIrmada kolayhkla uygulanmasllla olanak
saglanu~hr.
Makro gozenekli kriyojelik de!'i.ek
malzemelerinin ozmotik, mekanik. kimyasal kararhhgllllll yiiksek olmasl sistem
<;ah~malan
i<;in <;ok
onemli avantajlar saglaml~t:ir.
YapIlan
9ah~mada,
90k
di~li
bir ligand olan Polietilenimin bazh poli(HEMA) kriyojeller
ve model protein olarak se9i1en insan IgG
safla~ttnlmasl \ah~I1nu~tIr.
Bu
<;ah~ma
hazlrlanml~
kapsammda ilk
olarak 2-hidroksietil metakrilat monomeri bir enjektor kolon i<;erisinde ·12°C'da derin dondurucu
ilj:inde Ylgtn polimerizasyonu yontemiyle
hazlrlanml~t1r. Hazlrlanml~
polimer etanol ve su ile
)'lkanarak yapldaki kirlilikler teinizlenmi~tir. Daha sonra Polietilen imin baglanmasl ger<;ekle~tirilmi~
ve bagh olan polietilen imin mik"1an potansiyometrik yontemle tayin edilmi~tir. Son basamakta protein
safla~tIJ'J:lli)da yOgtlll olarak kullamlan CU
uygun
ko~ullar
baglanan Cu
2
+
aJtlllda
baglannu~tlf.
2T
iyonu poli(HEMA)-polietilen imin destek metaryeline
Baglanma i<;in optimum
ko~ullar
~i~me
anaHz (TGA) yontemleri
ve
testleri, FTIR, taramah elektron mikroskobu (SEM), termogravimetrik
kul1anIlml~hr.
Deneysel
a~amada
enjektor tipi kolon sistemiyle model
protein olarak se<;ilen insan IgG'si siirekli sistemde sulu ortamdan
safla~t1nlmaslllda
safla~tmlml~tIT.
Protein
optimum pH olarak fosfat 6.5 tamponu bulunmu~tur. Optimum protein adsorpsiyonu
65.2 mg IgG/g polimer olarak
yapllall
hulunmu~
iyonu miktan spektrofotometrik yontemle belirlenmi~tir. Hazrrlanan polimerin
karakterizasyonu i<;in
i~in
pH 5.4'de
<;ah~malarda
bulunmu~tur.
Polimerlerde kapasite
dii~mesi
olup olmadlgtm anlamak
uygun desorpsiyon ajam iIe polimerler kapasitesinde herhangi bir
dii~me
gozlenmemi~tir.
KimyaKongreleri.org
31