P-0327 250 - KimyaKongreleri.org

12. Ulusal Kimya Kongresi, Edirne, 1998
P-0327
KATALAZ İMMOBİLİZASYONU İÇİN SELÜLOZ ASETAT
KÜRECİKLER HAZIRLANMASI VE BAZI KOVALENT BAĞLAMA
YÖNTEMLERİNİN İNCELENMESİ
Hatice YILDIZ, Erhan DİNCKAYA
Ege Üniversitesi Fen Fakültesi Biyokimya Bölümü
35100 Bornova/İZMİR
Bu çalışmada katalazın uygun bir taşıyıcının dış yüzeyinde İmmobilizasyonu
amaçlandı. Taşıyıcının organik kökenli, bunun yanısıra mekanik olarak dayanıklı,
ayrıca daha ileride hedeflenen uygulamalar göz önüne alındığında sıvı ortamda kolay
karıştırılabilir bir nitelikte olması planlandı. Bu doğrultuda pratik imkanlar veren
selüloz asetat kullanıldı. Selüloz asetatın asetonda
çözünmesi amaca uygun
modifikasyona tabi tutulmuş
kürecik formunda
enjektörler yardımıyla
partiküüer hazırlanmasına imkan verdi.
partiküllerin
hangi
selüloz
asetat
taşıyıcı
İdeal küre formuna en yakın taşıyıcı
konsantrasyonunda
oluşturulabileceğinin
araştırılması amacıyla; 10,60,100,140,180 ve 220 mg selüloz asetat /mİ aseton
derişimlerinde çözeltiler hazırlandı. Selüloz asetat kürecikler, söz konusu çözeltilerin
uygun bir organik çözgen içine damlatılmasıyla oluşturuldu. Optimum damlatma
koşulları altında, en ideal formdaki kürecikler 180 mg selüloz asetat/ mİ aseton
derişimindeki
çözeltiyle
elde
edildi
Hazırlanan
küreciklerin
yüzeyinde
katalaz
immobilizasyonu için elverişli bir yöntemin belirlenmesi amacıyla, selüloz asetat,
Ce(IV)S04 , N al04 , TİCU, TiCl3 ve ZrOCI2 ile aktive edildi ve bu aktivasyonu takiben
enzimin taşıyıcıya
bağlanması
incelendi.
Bunlara
ilave
olarak selüloz asetat
küreciklerin jelatinle kaplanmasının enzim aktivitesinin korunmasına etkisi araştırldı.
Fosfat tamponunda ( 50 mM; pH: 7,0 ) ve 35 °C sıcaklıkta, 10,5 mM hidrojen
peroksidin substrat olarak kullanıldığı aktivite ölçümlerinde Ce(IV)S04 ile aktivasyonu
içeren îmmobilizasyon yöntemi ile en olumlu sonuçların alındığı belirlendi. Selüloz
asetat kürecik yüzeyinin Ce(IV)S04 ile aktivasyonunu takiben BSA ile uzatma kolu
oluşturulması, sodyum siyanoborhidrür ile indirgeme, katalazın kovalent bağlanması
ve glutaraldehid ile çapraz bağlama adımlarını içeren söz konusu immobilizasyon
yönteminde enzim ve glutaraldehid oranlarının hazırlanan preparatların aktivitesi
üzerine etkisi araştırıldı.
250