KimyaKongreleri.org

3. Ulusal Afinite Teknikleri Kongresi, 12-14 Eylül 2007, Uludag Üniversitesi, Bursa
Poster 22
j3-GALAKTOzIDAZ ENZIMiNIN GERI DONO~OMLO IMMOBILIZASYONUNDA
KULLANILMAK OZERE AFiNiTE DESTEK MATERYALiNiN HAZIRLANMASI VE
SOREKLI SISTEM UYGULAMASI
Gulay Bayramoglu \ Elif Logoglu 2 , Begum Altmta!i
1
,
M . Yakup Anca 1
'Biyokimyasall~lemlerve Biyomateryal Ara~tlrma Laboratuvan, Klnkkale Universitesi. Klnkkale
2 Gazi
Universitesi. Fen-Edebiyat Fakultesi. Kimya Bollimli. Ankara
Biyoteknolojik yontemlerle uretilen enzimler, r;;ok say Ida endustriyel, analitik ve klinik
uygulamalarda substrat <;6zeltisi ile reaksiyonu sonucu urun elde edilir ve soma ekonomik
olarak geri kazamlamazlar. Enzimlerin buyuk bir klsml, uygun destek materyalleri uzerine,
r;;ok yuksek aktivite saglayarak ba~an" bir ~ekilde tutuk·lanabilmektedir. Bu tutuklanml~
urunler, enzim reakt6r1erinin, ve biyosensorlerin tasanmlnda aynca, yapay organlarln
yaplmlnda dakullamlmaktadlr. Bu
r;;a"~malannda
kullanllan
r;;all~mada,
adsorpsiyon
biyoteknoloji uygulamalanndaki enzim
yontemi
immobilizasyonuna olanak saglayacak destek
ile
J3-galaktozidaz
materyali
geli~tirildi.
enziminin
immobilizasyon
teknikleri arasmda, adsorpsiyon yontemi diger immobilizasyon yontemlerine gore r;;ok
say Ida avantajlara sahiptir. Adsorpsiyonla geri
etkile~im
destek araslnda, gur;;lu bir
donu~umlu
enzim tutuklanmasl, enzim ve
gerektirir. Bu nedenle, destek materyalleri uzerinde
enzim molekulleri ile gur;;lu hidrofobik ya da iyonik
etkile~imleri olu~turacak
fonksiyonel
gruplann bulunmasl gereklidir. poli(GMA) mikrokureleri bir r;;apraz baglaYlcl varhglnda
(etilendimetilmetakrilat), dispersiyon polimerizasyonu yontemi ile haz:lrlanarak, modifiye
edilerek J3-galaktozidaz enzimine afinite gostermesi sagland/. Poli(GMA) ve modifiye
poli(GMA) kureleri karakterize edildi. Destek materyaline p-galaktozida2 enziminin
adsorpsiyon yontemi ile immobilizasyonu sagland/. p-galaktozidaz enzimini optimizasyon
r;;a"~malan;
ba~langlr;;
enzim
konsatrasyonu.
pH
ve
slcak
gibi
adsorpsiyon
parametrelerinin etkisi ara~tllarak belirlendi. I'mmobilize enzimin kinetik parametreleri (Km
ve Vmax ),
i~lemsel
karallliQI. optimum pH ve slcakllk degerleri surekli sistemde incelendi.
Modifiye edilen poli(GMA) kurelerine l3-galaktozidaz enzimini maksimum tutuklama
miktan, 14.06 mglg olarak
belirlenmi~tir.
Tutuklu l3-galaktozidaz ir;;in Michaelis sabiti Km
degerleri, onemli derecede yuksek olmasl , enzimin substratl ir;;in azalan afinitesini
gosterirken, Vmax degerlerinin tutuklu l3-galaktozidaz ir;;in kur;;uk oldugu belirlendi. Aynca.
destek
materyalinin
tekrar
kullammlannda,
(3-galaktozidaz
enziminin
adsorpsiyon
kapasitesinde ve enzim aktivitesinde onemli bir kaYlp olmakdan yenidEin kullamma izin
verdigi ve immobilize enzimin rat omrunde de onemli bir
artl~
oldugll belirlendi. (3­
galaktozidaz immobilize destek materyali ile surekli sistem reaktoru, kulamlarak laktozun
hidrolizi r;;ah~llm I~tlr.
KimyaKongreleri.org