155 BP-139 - KimyaKongreleri.org

BP-139 155
Glutatyon-S-Transferaz Enziminin Hindi Karacierinden
Saflatrlmas, Karakterizasyonu ve Baz Metallerin Enzim Aktivitesi
Üzerine Etkilerinin ncelenmesi
Ebru Akkemika, Pnar Taera, Ayegül Taranca, Harun Budakb, Mehmet Çiftcia
a) Atatürk Üniversitesi, Fen Fakültesi, Kimya Bölümü, 25240, Erzurum, Türkiye
b) Atatürk Üniversitesi, Fen Fakültesi, Moleküler Biyoloji ve Genetik Bölümü, 25240, Erzurum
[email protected]
Glutatyon-S-Transferaz (GST; EC.2.5.1.18) detoksifikasyon metabolik yolunda son ürün olan
merkapturik asit oluumundaki ilk basama katalizleyerek homeostasisi salayan çok ilevli bir
enzimdir. GST besinlerle birlikte alnan toksik maddelerin eliminasyonunu salad gibi,
prostaglandinleri izomerizasyonu, hem, bilirubin, safra tuzlar ve ya asitleri gibi nonsubstrat ligantlar
GSH ile balayarak tanmasn salamaktadr. Ayrca reaktif elektrofilik bileiklerin vücuda zarar
vermesini, ayn tür bileikleri birbirine kovalent balayarak da önleyebilmektedir [1-3].
Bu çalma kapsamnda GST enziminin hindi karacierinden saflatrlmas, karakterizasyonu
ve baz metallerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi amaçlanmtr.
GST enzimi hindi karacierinden saflatrld ve baz karakteristik özellikleri incelendi.
Saflatrma ilemi homojenatn hazrlanmas ve Glutatyon-Agaroz afinite kromatografisi olmak üzere
iki basamakta gerçekletirildi. 164,31 EÜ/mg protein spesifik aktivitesine sahip olan GST enzimi %45
verimle, 252,7 kat saflatrld ve enzimin safln kontrol etmek için SDS-PAGE yapld. Enzim
aktivitesi Awasthi’nin metoduna göre ölçüldü [4]. Enzimin optimum pH’s, stabil pH’s, optimum
scakl, optimum iyonik iddeti, molekül kütlesi, turnover says, kcat/KM deeri, CDNB ve GSH
substratlar için KM ve Vmax deerleri tespit edildi. Ayrca baz metallein enzim aktivitesi üzerine
etkileri incelendi.
KAYNAKLAR
[1] Andersson, C., Soderstorm, M., Mannervik, B., J. Biochem. 249, 819-823 1998.
[2] Boyer, T.D., The Glutathione S-Transferases: An Ubdate Hepatology, 9(3), 486-96, 1989.
[3] Goodman, A., Glman A.G., The Pharmacological Basis of Therapeutics. 7rd Ed.,1980 1638
[4] Awasthi, Y.C. Beutler, E. And Srivastava, S.K. J. Biochem., 250, 5144, 1975.