El Kitabı - Pera Medikal

 IVD
Sadece Vitro Diagnostic Kullanım için
HHV6 Real-TM Quant
El Kitabı
İnsan Herpes Virus 6
Kantitatif Tespiti İçin
Real Time PCR kiti
REF V10-100FRT
REF TV10-100FRT
100
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
ver. 30.05.2014
İSİM
HHV6 Real-TM Quant
KULLANIM
AMACI
HHV6 Real-TM Quant kiti biyolojik malzemelerde Human Herpes Virus 6 ‘nın kantitatif tespiti için ,
in vitro Real Time amplifikasyon testidir. DNA, Internal (iç) Kontrol (IC) ve HHV6 pol-gene için
spesifik floresan raportör boya propları ile Real Tme aplifikasyon kullanılarak , amplifiye edilen
numune ekstraktıdır. Test, her biri tek tek işlenmiş numune için , amplifikasyon kontrolü olarak
hizmet veren ve olası reaksiyon inhibasyonunu tanımlamak için bir IC (-globin gen) içerir .
TAHLİL PRENSİBİ
HHV6 Real-TM Quant kiti, örneklerden DNA izolasyonu ve Real Time amplifikasyonu olmak
üzere,
iki
ana
proses
esasına
dayanmaktadır. HHV6
DNA
amplifikasyon
sonuçları,
Joe/HEX/Yellow’ da ve Internal kontrol olarak kullanılan -globin gen FM/Green kanalda tespit
edilir. Eğer numune doğru hazırlanmamışsa veya muhafaza edilmemişse (yetersiz miktar < 2,0 x
104 genom/numune) , Internal Kontrol tespit edilemeyecek ya da çok düşük siyalli olacaktır. Kit, kan ve diğer hesaplamalarından lökosit ekstraksiyon prosedür çalışmalarını önleyen bir tüpte ,
-globin gen ve DNA HHV6 eş zamanlı tespiti için kantitatif standartlar içerir. Aşağıdaki formül kullanılarak, hücrelerin standar miktarlarında ( örneğin; 106 insan hücresinde)
HHV6 DNA konsantrasyonu hesaplanır.
106 hücrede* Kopya HHV6 DNA = reaksiyondaki kopya HHV6 DNA/ reaksiyondaki kopya insan
DNA x 2*106
*106 hücresi 2*106 insan genomu içerir.
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
ver. 30.05.2014
SAĞLANAN MALZEMELER
Modül No.1: Real Time PCR kit (V10-100FRT)
Part N° 2 – “HHV6 Real-TM Quant”: Real Time amplifikasyon
PCR-mix-1 “HHV6/Glob”, 2 x 0,6 ml
PCR- buffer-FRT, 2 x 0,3 ml
TaqF Polymerase, 2 x 0,03 ml
Negative Control, 1,2 ml;*
Pos HHV6 & Human DNA C+, 2 x 0,2 ml;**
DNA-buffer (C-), 0,5 ml
Quantitation Standard HHV6 & Glob:
o QS1, (konsantrasyon104 kopya/numune) 0,2 ml,
o QS2,(konsantrasyon 102 kopya/numune)0,2m l,
120 test için reaktif içerir.
Module No.2: Complete Real Time PCR test with DNA purification kit (TV10-100FRT)
(DNA purifikasyon kitli (TV10-100FRT) komple Real Time PCR testi)
Part N° 1 – “DNA-sorb-B”: Sample preparation (numune hazırlama kiti)
Lysis Solution, 2 x 15 ml;
Sorbent, 2 x 1,25 ml;
Washing Solution 1, 2 x 15 ml;
Washing Solution 2, 2 x 50 ml;
DNA-eluent, 2 x 5 ml;
100 test için reaktif içerir.
Part N° 2 – “HHV6 Real-TM Quant”: Real Time amplifikasyon
PCR-mix-1 “HHV6/Glob”, 2 x 0,6 ml
PCR- buffer-FRT, 2 x 0,3 ml
TaqF Polymerase, 2 x 0,03 ml
Negative Control, 1,2 ml;*
Pos HHV6 & Human DNA C+, 2 x 0,2 ml;**
DNA-buffer (C-), 0,5 ml
Quantitation Standard HHV6 & Glob:
o QS1, (konsantrasyon 104 kopya/numune) 0,2 ml,
o QS2, (konsantrasyon102 kopya/numune)0,2 ml,
120 test için reaktif içerir.
* numune hazırlama prosedüründe negatif kontrol olarak kullanılmalıdır : 100 µl C– (Negative Control) ‘ü Cneg
etiketli tüpe ekleyin
** 90 µl C– (Negative Control)’ü ve 10 µl Pos HHV6 & Human DNA C+’ü Cpos etiketli tüpe ekleyin.
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
ver. 30.05.2014
SAĞLANMAYAN , GEREKLİ MALZEMELER
Bölge 1: Örnek Hazırlama:
-DNA ekstraksiyon kiti(Modül No.1)
-Biolojik kabin
-Vortex
-“eppendorf” tipli tüpler için masaüstü mikrosantrifüj
-Kuru ısı bloğu
-Vorteks mikser
-Pipetler
-Filtreli steril pipet uçları
-1,5 ml polipropilen steril tüpler
-Biyolojik tehlikeli atık konteyneri
-Buzdolabı, dondurucu
Bölge2:Real Time amplifikasyon:
Real Time Thermal cycler
Reaksiyon Tüpleri
Çalışma İstasyonu
Pipetler (ayarlanabilir)
Filtreli steril pipet uçları
Vorteks Mikser
Dondurucu, buzdolabı
MUHAFAZA KOŞULLARI
HHV6 Real-TM Quant, – 20°C’de, DNA-sorb-B” +2-8°C’de muhafaza edilmelidir.. Kitler 2-8 ° C'de
sevk edilebilirler, ancak alındıklarında hemen 2-8°C ve -20°C de muhafaza edilmelidirler.
STABİLİTE
HHV6 Real-TM Quant etiketinde belirtilen son kullanım tarihine kadar stabildir. Ürün etiketinde
basılı kontrol tarihine kadar performansını koruyacaktır. Işık, ısı veya neme maruz kalma, kitin bazı
bileşenlerini etkileyebilir , bunlardan kaçınılmalıdır. Hassasiyet azalabileceğinden, reaktiflerin
tekrarlanan çözülme ve dondurma işlemlerinden kaçınılmalıdır. Bileşenler, etiketlerde belirtilenler
dışındaki koşullarda
muhafaza edildiğinde düzgün çalışmayabilir ve tahlil sonuçlarını olumsuz
etkileyebilir.
KALİTE KONTROL
Her lot , tutarlı ürün kalitesini sağlamak için; SACACE, ISO 13485 Sertifikalı Kalite Yönetim
Sistemine uygun olarak, önceden belirlenmiş özelliklere karşı test edilmektedir.
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
ver. 30.05.2014
UYARILAR VE ÖNLEMLER
In Vitro Diagnostic Medikal Cihaz
Sadece In Vitro Diagnostic kullanım için
Kullanıcı her zaman aşağıdakilere dikkat etmelidir:
Lysis Solüsyonu,guanidine thiocyanate* içerir. Guanidin tiyosiyanat solunduğunda veya
yutulduğunda veya deri ile temas halinde zararlıdır. Asit ile temasında toksik gaz oluşturur. (Xn;
R: 20/21/22-36/37/38; S: 36/37/39).
Aerosol engelli steril pipet uçları kullanın ve her işlem için yeni pipet ucu kullanın.
Ekstrakte edilmiş pozitif malzemeleri (örnekler, kontroller ve amplikonlar) diğer tüm reaktiflerden
uzakta tutun ve ayrı bir alanda reaksiyon karışımına ekleyin.
Tahlile başlamadan önce tüm bileşenleri oda sıcaklığında tamamen çözün.
Bileşenleri, çözündüğünde karıştırın ve kısa süre santrifüjleyin.
Reaktif ve örnekler
ile çalışırken , atılabilir eldiven, laboratuar önlüğü ve göz koruyucu
kullanın.İşlem sonrası ellerinizi iyice yıkayın.
Laboratuar çalışma alanlarında, sigara içmeyin, herhangi birşey yemeyin- içmeyin, kozmetik
uygulamayın veya kontakt lenslere ellemeyin.
Son kullanı tarihlerinden sonra kitleri kullanmayın.
Tüm numuneleri ve kullanılmayan reaktifleri ,yerel yönetim kurallara uygun olarak imha edin.
Örnekler potansiyel bulaşıcı olarak dikkate alınmalı ve işlemler uygun biyogüvenlik yöntemlerine
uygun olan biyolojik kabinde yapılmalıdır.
Dökülen/ saçılan tüm numune veya reaktifleri temizleyin ve %0.5 lik sodyum hipoklorit veya diğer
uygun dezenfektanlarla dezenfekte edin.
Örnek veya reaktifin deri, göz ve mukoza zarları ile temasından kaçının, temas olması halinde su
ile yıkayınız ve hemen tıbbi yardım alın.
Malzeme Güvenlik Bilgi Formları (MSDS) istek üzerine verilebilir.
Bu ürünün kullanımı, DNA amplifikasyonu teknikleri konusunda eğitimli personel ile sınırlı
olmalıdır.
Laboratuvar süreci tek yönlü olmalı Ekstraksiyon alanında başlamalı ve sonra Amplifikasyon ve
Tespit alanlarına gidilmeli/ yönlenmelidir. Örnekleri, ekipmanları ve reaktifleri önceki adımın
yapıldığı bölgeye/alana geri döndürmeyin.
Bu kitteki bazı bileşenler koruyucu olarak sodium azid
i ç e r i r . Reaktif transferi için metal tüp kullanmayınız.
* Sadece Modül No.2için
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
ver. 30.05.2014
ÜRÜN KULLANIM SINIRLARI
T ü m r e a k t i f l e r s a d e c e i n v i t r o d i a g n o s t i c i ç i n k u l l a n ı l a b i l i r . Bu ürünün
kullanımı, DNA amplifikasyonu teknikleri konusunda eğitimli personel ile sınırlı olmalıdır (UNI EN ISO
18113-2:2012). Kullanım kılavuzu ile tam uyum, optimum PCR sonuçları için gereklidir. Kutu
üzerinde ve tüm bileşenlerin etiketlerinde yazılı olan son kullanma tarihlerine dikkat edilmelidir. Kiti,
son kullanım tarihinden sonra kullanmayın.
ÖRNEK ALINMASI, MUHAFAZA VE TAŞINMASI
HHV6 Real-TM Quant aşağıdakilerden DNA ekstrakt
analizi yapabilir:
ACD ya da EDTA’lı tüplerde toplanan tam kan;
buffy coat;
balgam: 1 hacim balgam 1 hacim tuzlu suya eklenir ve kuvvetlice vortekslenir. 10000g/dakika
devirde 10 dakika santrifüjlenir. Süpernatantı ayırın , DNA ekstraksiyonu için yaklaşık 100 µl
bırakın.
swab: swabı nükleaz içermeyen 1,5 ml tüpün içine koyun ve 0,2 ml medium transport ekleyin.
Swabları medium içerisinde 10-20 saniye şiddetlice çalkalayın.
Tükürük,
Beyin omurilik sıvısı
(liquor),
İç organ biyopsi
malzemesi,
Bu örneklerin toplandıktan hemen sonra işlenmesi önerilir. Örnekleri 24 saatten fazla
olmamak üzere 2–8 °C ‘de muhafaza edin ya da –20/80°C’de dondurun
Klinik örneklerin taşınması, etiyolojik ajanların taşınmasına yönelik ülke , federal , eyalet ya da
yerel yönetmeliklere, uymak zorundadır.
DNA
IZOLASYONU
Herhangi bir ticari RNA / DNA izolasyon kiti, burada belirtilen IVD-CE "NUMUNE TOPLAMA,
MUHAFAZA VE TAŞIMA" paragrafındaki örnek türleri için valide ise, kullanılabilir.
Sacace Biotechnologies aşağıdaki kitleri kullanmanızı önerir:
 DNA-Sorb-B (Sacace, REF K-1-1/B)
 Ribo Virus 50– spin column extraction kit (Sacace, REF K-2-C)
 SaMag Viral Nucleic Acids Extraction Kit (Sacace, REF SM003) beyin omurilik sıvısı
ve hücresiz vücut sıvıları için;
 SaMag STD DNA Extraction Kit (Sacace, REF SM007) swablar
için.
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
ver. 30.05.2014
DNA ekstraksiyonunu, lütfen üreticinin talimatına göre gerçekleştirin.
ÖRNEK VE REAKTİF HAZIRLAMA (modul no.2ile sağlanan reaktifler)
1. Lysis Solution ve Washing Solution (+2-8°C de muhafazası durumunda ) buz kristalleri yok
olana kadar 60 ° C 'ye kadar ısıtılmış olmalıdır.
2.. Gerekli miktarda 1.5 ml’lik polipropilen tüpleri hazırlayın.
3. Her tüpe 300 µl Lysis Solution u ekleyin.
4. Uygun tüplere 100 µl numune ekleleyin.
5. Kontrolleri aşağıdaki gibi hazırlayın:
Cneg etiketli tüpe100 µl C– (Negative Control .) ekleyin.
Cpos etiketli tüpe 90 µl C– (Negative Control) ve 10 µl Pos HHV6 & Human DNA C+
ekleyin
6. Tüpleri vortekleyin, 65°C’de 5 dakika inkübe edin ve 5 saniye santrifüjleyin.
7. Sorbent’i kuvvetlice vorteksleyin ve her tüpe 25 µl ekleyin.
8. 5-7 saniye vorteksleyin ve oda sıcaklıgında peryodik olarak vorteksleyerek 10 dakika inkübe
edin.
9.
Bütün tüpleri 5000g ‘de 1 dakika santrifüjleyin ve tıkaçlı aerosol bariyer uçlu mikropipet
kullanarak dikkatlice çıkarın ve her tüpten peleti dağıtmadan süpernatantı ayırın . Her tüp için
pipet ucunu değiştirin.
10. Her tüpe 300 µl Washing Solution 1 ekleyin. Kuvvetlice vorteksleyin ve 5000 g’de 1 dakika
santrifüjleyin ve tıkaçlı aerosol bariyer uçlu mikropipet kullanarak dikkatlice çıkarın ve her tüpten
peleti dağıtmadan süpernatantı ayırın . Her tüp için pipet ucunu değiştirin.
11. Her tüpe 500 µl Washing Solution 2 ekleyin. Kuvvetlice vorteksleyin ve 10000 g’de 1 dakika
santrifüjleyin ve tıkaçlı aerosol bariyer uçlu mikropipet kullanarak dikkatlice çıkarın ve her tüpten
peletleri dağıtmadan süpernatantı atın . Her tüp için pipet ucunu değiştirin.
12. 11. Adımı tekrarlayın.
13. Bütün tüpleri kapakları açık halde 65 °C’ de 5 dakika inkübe edin .
16. Peleti 50 µl
DNA-eluent
te resüspanse edin.5 dakika 65°C ‘de inkübe edin ve
periyodik olarak vorteksleyin.
17. Tüpleri en fazla (12000-16000 g) hızda 2 dakika inkübe edin.Süpernatant amplifikasyon için
hazır DNA içerir. Amplifikasyon, ekstraksiyonla aynı günde gerçekleştirilmelidir.
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
ver. 30.05.2014
PROTOKOL:
Reaksiyon Hacmi= 25 µl
1. Gerekli miktardaki tüpleri hazırlayın (N + 6 controls (4 standard, 1 Neg. control, 1 Pos. Control).
2. H e r b i r ö r n e k i ç i n , 10*(N+1) µl PCR-mix-1-FRT “HHV6/Glob”, 5,0*N
PCR-Buffer-FRT ve 0,5*N TaqF Polymerase yeni steril tüpler hazırlayın.Vorteksleyin ve 2-3
saniye santrifüjleyin.
3. Uygun tüpe 10 µl extracte DNA ve 15 µl Reaction Mix ekleyin. Pipetlemeyle karıştırın.
4. K a l i t a t i f ç a l ı ş m a i ç i n
1 pozitif kontrol ve 1 negatif kontrol hazırlayın:
Cpos etiketli tüpe 10 µl QS2 ekleyin;
Cneg etiketli tüpe 10 µl DNA-buffer ekleyin;
5. Kantitatif analiz için 1 negatif kontrol
(Cneg e t i k e t l i t ü p e 10 µl DNA-
buffer ekleyin ) ve standartlar için 4 tüp hazırlayın. 4 etiketli tüpe 10µl Quantitation
Standards HHV6 & Glob (QS1, QS2) ekleyerek , iki kez QS1 ve QS2 standartlarını yapın.;
Amplifikasyon
1. Tüpleri kapatın ve Real Time ThermalCycler’a transfer edin.
2. Numuneler, kontroller ve standartların pozisyonlarını programlayın.
3. Enstrümanları aşağıdaki gibi programlayın:
Adım
1
2
3
1
Rotor-tip Enstrümanlar1
Sıcaklık,
°С
95
95
60
72
95
60
72
Plate- veyamodular tip Enstrümanlar
Süre
Tekrarlar
15 dakika
5sn
20 sn
15 sn
5s
20 sn
Floresan sinyal
tespiti
15 sn
1
5
40
Sıcaklık
°С
95
95
60
72
95
60
72
Süre
Tekrarlar
15 dakika
5 sn
20 sn
15 sn
5 sn
30 sn
Floresan sinyal
tespiti
15 sn
1
5
40
Örneğin Rotor-Gene™ 3000/6000/Q (Corbett Research, Qiagen)
Örneğin, SaCycler-96™ (Sacace), CFX/iQ5™ (BioRad); Mx3005P™ (Agilent), ABI® 7300/7500/StepOne Real
Time PCR (Applied Biosystems), SmartCycler® (Cepheid), LineGeneK® (Bioer)
2
Floresan, Cycling 2 evresinin(60 °C) 2. adımında FAM/Green ve JOE/Sarı /Hex/Cy3 kanallarında
tespit edilir.
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
ver. 30.05.2014
ENSTRÜMAN AYARLARI
Rotor-tip enstrümanlar
Kalibrasyon/Gai Kanal
Eşik
n Optimizasyonu
FAMGreen
JOE/Yellow
5 Fl ila10
4 Fl ila 8
Fl
0.03
0.03
Diğer
Ayarlar/Outlier
Removal
%10
%10
Slope Correct
açık
açık
Plate-tip Enstrümanlar
Eşik çizgisi, sadece pozitif numunelerin sinyal birikiminin sigmoid eğrilerini geçmeli , taban
çizgisini geçmemelidir; aksi takdirde, eşik seviyesi yükseltilmelidir. Floresan eğrilerinin doğrusal
olduğu seviyede eşiği ayarlayın ve negatif örnek eğrilerini geçmeyin.
SONUÇ ANALİZİ:
Sonuçlar eşik hattı ile floresan eğrisinin geçiş varlığı sayesinde ,cihazın yazılımı ile yorumlanır.
İnternal Kontrol (İnsan DNA'sı) FAM/Green kanalda ve HHV6 Joe/HEX/Yellow kanalda tespit edilir.
Kopya HHV6 DNA konsantrasyonu
hesaplanır:
106 hücre içinde aşağıdaki formül kullanılarak
Kantitatif analizde,toplam DNA, tam insan kanı, beyaz kan hücreleri veya iç organ biyopsi
malzemelerinden izole edilmişse, örneklerdeki her standart hücre miktarı (105) başına HHV6 DNA
logaritmik konsantrasyonu aşağıdaki formül kullanılarak hesaplanır: Eğer DNA tükürük, orofarinjel swab ve beyin omurilik sıvısından (liquor) izole edilmişse,numunenin
(kopya HHV6 DNA) ml başına HHV6 DNA konsantrasyonu aşağıdaki formül kullanılarak
hesaplanır:
Kopya HHV6 DNA = Calc HHV6 DNA х 100 (kopya/ml),
HHV6 DNA Joe/HEX/SYellow kanalda hesaplanan, HHV6 DNA kopya/reaksiyon
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
sayısıdır.
ver. 30.05.2014
Hesaplama manuel ya da Microsoft® Excel program kullanılarak yapılabilir.
İsim
A
1
1
2
2
3
3
CCC+
C+
QS1
QS1
QS2
QS2
Tip
B
Bilinmeyen
Bilinmeyen Bilinmeyen Bilinmeyen Bilinmeyen Bilinmeyen Bilinmeyen Bilinmeyen Bilinmeyen Bilinmeyen Bilinmeyen Bilinmeyen Bilinmeyen Bilinmeyen kopya HHVkopyaGlob 6
(Fam/green) lg HHV-6/10*5
(Joe/yellow)/
/ reaksiyon hücreleri
reaksiyon
C
E=LOG(C/D*200000)
4.0
4.1
3.0
3.1
2.0
2.1
D
2907
2958
306
309
37
39
5630
5243
5784
5220
6696
6901
296
269
9968
10024
97
102
951
945
989
1010
105
98
kopya HHV6/10*6 hücreleri
F=C/D*2000000
1.03E+05
1.13E+05
1.06E+04
1.18E+04
1.11E+03
1.13E+03
3.8
3.8
6.22E+04
5.69E+04
“Pos HHV6 & Human DNA C+” 2 değeri arasındaki fark bir çalışma esnasında %25’ten büyük olmamalıdır.
PERFORMANS KARAKTERİSTİKLERİ
Analitik Özgünlük
Primerlerin ve probların analitik özgünlüğü, negatif numuneler ile valide edilmiştir.
Spesifik Human Herpes Virus 6 primerleri ve probları ile herhangi bir sinyal oluşturmamışlardır.
HHV6 Real-TM Quant kitinin özgünlüğü %100 idi. HHV6 Real-TM Quant kitinin potansiyel çapraz
reaktivitesi , kontrol gruplarına karşı test edilmiş ve diğer patojenlere karşı hiç bir çapraz reaktivite
gözlemlenmemiştir.
Analitik Hassasiyet
HHV6 Real-TM Quant kiti, 200 kopya/ml ya da 105 hücre başına 5 kopya HHV6 DNA ‘dan az
olmayan hassasiyetle,
testlerin %100’ünde Human Herpes Virus 6 DNA’nın tespitine olanak
sağlar. HHV6 Real-TM Quant’nın lineer aralığı, 500-10.000.000 HHV6 DNA kopya/ml’dir. Eğer
sonuç 500 kopya/ml’den az ise, sonuçlar “ 500 kopya/ml’den daha az” olarak belirtilmelidir.
Hedef Bölge: polymerase gene HHV6
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
ver. 30.05.2014
SORUN GİDERME
Analiz sonuçları aşağıdaki durumlarda dikkate alınmaz:
1. Negatif konrol aplifikasyonu (NCA) için FAM/Green ve JOE/Yellow/HEX 'teki Ct değerinin
sonuçları grid görünümü ve Ct değeri ekstraksiyon negatif kontrol (C-) JOE/Sarı/HEX kanalda
numune veya reaktif kontaminasyonu gösterirse. HHV6 DNA ,DNA ekstraksiyon aşamasından
başlanılarak tespit edildiği tüm numunelerin PCR analizi tekrarlanır.
2. Kantitatif analizde,
JOE/Yellowı/HEX (HHV6) veya FAM/Green kanalda pozitif kontrol
amplifikasyon (C+,KGS2) Ct değeri için grid sonuçlar yoksa, HHV6 DNA 'nın tespit edilmediği
tüm numune amplifikasyonları tekrarlanır.
3. Eğer pozitif kontrol ekstraksiyon (PCE, Pozitif Kontrol DNA HHV-6 ve insan DNA'sı) Ct değeri,
JOE(HHV6) veya FAM kanalda yoksa, tüm numunelerin analiz sonuçları geçersiz kabul edilir.
DNA amplifikasyon aşamasından başlanılarak tüm numune analizleri tekrarlanır.
4.
Eğer JOE/Yellow/HEX kanalında numune Ct değeri yoksa, DNA ekstraksiyon aşamasından
başlanılarak numune analizi tekrarlanır. Bu , DNA kaybı veya inhibitör varlığı nedeniyle , klinik
malzeme hazırlanmasındaki hatalar nedeniyle olabilir.
5. JOE/Yellow/HEX kanalında (HHV6 DNA) klinik numune Ct değeri , Ct sınır değerini (>36) aşarsa,
bu gibi numunelerin sonuçları belirsiz (şüpheli) kabul edilir. Bu tür numunelerin analizi çift
çalışılarak tekrarlanır. Eğer her iki tekrarda da sonuçlar pozitif ise, sonuç pozitif olarak kabul
edilir. Eğer sonuçlar iki tekrarda farklı çıkarsa, bu gibi numunelerin analiz sonuçları belirsiz
(şüpheli) olarak kabul edilir.
6.
Eğer kantitatif testlerde DNA kalibratörlerinde her reaksiyon başına kopya sayısı belirtilen
değerden %30 fazla çıkmışsa, rotordaki tüplerin yerleşim sırasını kontrol edin. DNA kalibratörleri
numune tablosunda "standartlar" olarak adlandırılan hücrelerin içinde olmalıdır ve rotor-tip
enstrümandaki hücre no.1 boş olmalıdır (herhangi bir test tüpü ile doldurun).
7. Eğer kantitatif testlerdeki Standart eğri penceresindeki R ilişki katsayısı, 0.9 'dan düşükse, bu
kalibrasyon hatasını gösterir. DNA kalibratör ayarları doğru olup olmadığını kontrol edin ve gerekirse
değiştirin. Bu işe yaramazsa, tüm numuneler ve kalibratörler için PCR çalışılır.
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
ver. 30.05.2014
KULLANILAN SEMBOLLERİN AMLAMLARI
Liste Numarası
Dikkat!
Lot Numarası
<n> testleri için
yeterli içerik
Sadece In vitro Diagnostic
kullanım
Versiyon
.:’de muhafaza
NCA
Negative Control of
Amplification
İmalatçı
NCE
Negative control of
Extraction
Kullanım Talimatlarına
Bakınız
C+
Positive Control of
Amplification
Son kullanım tarihi
IC
Internal (İç) Kontrol
* SaCycler™ is a registered trademark of Sacace Biotechnologies
* CFX™ and iQ5™ are registered trademarks of Bio-Rad Laboratories
* Rotor-Gene™ is a registered trademark of Qiagen
* MX3005P® is a registered trademark of Agilent Technologies
* ABI® is a registered trademark of Applied Biosystems
* LineGeneK® is a registered trademark of Bioer
* SmartCycler® is a registered trademark of Cepheid
Sacace Biotechnologies Srl
via Scalabrini, 44 – 22100 – Como – Italy Tel +390314892927 Fax +390314892926
mail: [email protected] web: www.sacace.com
Sacace™ HHV6 Real-TM Quant
ver. 30.05.2014